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P5147

Sigma-Aldrich

Protease

Type XIV, ≥3.5 units/mg solid, powder

Sinônimo(s):

Actinase E, Pronase E

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About This Item

Número CAS:
Número CE:
Número MDL:
Código UNSPSC:
12352204
eCl@ss:
32160410
NACRES:
NA.54

fonte biológica

Streptomyces griseus

Nível de qualidade

tipo

Type XIV

Formulário

powder

atividade específica

≥3.5 units/mg solid

solubilidade

10 mM NaAc (pH 7.5) and 5 mM CaAc: soluble 0.2 mg/mL at 37 °C, clear, colorless to tan

Condições de expedição

wet ice

temperatura de armazenamento

−20°C

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Especificidade

Uma mistura de pelo menos três atividades proteolíticas, incluindo uma protease de serina extracelular. De modo geral, as proteases de serina apresentam uma ampla gama de especificidades de substratos, que se acredita serem mediadas por um sítio ativo formado por um Asp, uma His e um resíduo de Ser na molécula. Essa enzima prefere hidrolisar ligações peptídicas no lado carboxila do ácido aspártico ou glutâmico.

Aplicação

A enzima da Sigma foi usada para digerir e analisar complexos heparina-antitrombina. Ela também foi usada para isolar amido resistente a enzimas.
A protease de Streptomyces griseus foi utilizada:
  • para digestão de tecido do núcleo pulposo (NP)
  • na catalisação da reação “one pot” assimétrica de Mannich
  • para desproteinização do amido
  • na digestão de cortes de cérebro para dissociação das células

A protease é tipicamente utilizada em procedimentos de isolamento de ácidos nucleicos em incubações de 0,5-3,0 horas suplementadas com dodecil sulfato de sódio 0,2% e EDTA 10 mM.
A protease é uma enzima utilizada para quebrar proteínas por meio da hidrólise de ligações peptídicas. A protease é utilizada para degradar proteínas, estudar inibidores de protease e estudar a cinética da inativação térmica. A protease é utilizada em procedimentos de isolamento de ácidos nucleicos em incubações. A protease de Streptomyces griseus foi utilizada em investigações cristalográficas e cinéticas do complexo covalente formado por aldeídos tetrapeptídeos e proteases de serina.
Essa enzima é mais ativa em uma faixa de pH mais elevada que a protease alcalina conhecida, demonstrando atividade proteolítica até mesmo em solução de NaOH 0,2 N. Essa enzima é útil na proteólise de proteína insolúvel e para investigação da estrutura da proteína.

Ações bioquímicas/fisiológicas

A protease cataboliza proteínas por hidrólise de ligações peptídicas. As proteases são inativadas por inibidores de sítio ativo de serina, como fluoreto de fenilmetilsulfonil (PMSF) e diisopropilfluorofosfato. A protease de Streptomyces griseus é uma mistura de pelo menos três atividades proteolíticas, incluindo uma protease de serina extracelular. As proteases de serina apresentam uma ampla gama de especificidades de substratos, que se acredita serem mediadas por um sítio ativo formado por um Asp, uma His e um resíduo de Ser na molécula. Essa enzima prefere hidrolisar ligações peptídicas no lado carboxila do ácido aspártico ou glutâmico.
Este produto é uma mistura de pelo menos três atividades caseinolíticas e uma atividade de aminopeptidase. As enzimas caseinolíticas foram denominadas protease A de Streptomyces griseus, protease B de Streptomyces griseus e tripsina de Streptomyces griseus. Este produto pode ser utilizado quando for necessária uma degradação extensa ou completa de proteínas. Esta mistura de proteases é altamente inespecífica e pode digerir até >70% de caseína como monoaminoácidos.

Características e benefícios

  • altamente estável na faixa de pH de 5,0 a 9,0, com pico de atividade em pH 8,8
  • compatível com muitos tampões para isolamento de DNA e RNA
  • ampla especificidade para substratos

Qualidade

Contém acetato de cálcio.

propriedades físicas

Completamente inativada por aquecimento acima de 80 °C por 15-20 minutos.

Definição da unidade

Uma unidade hidrolisa caseína para produzir uma cor equivalente a 1,0 μmol (181 μg) de tirosina por min em pH 7,5 a 37 °C (cor pelo reagente de Folin-Ciocalteu).

Nota de preparo

Coletada de caldo de cultura de S. griseus.

produto relacionado

Nº do produto
Descrição
Preços

Pictogramas

Health hazardExclamation mark

Palavra indicadora

Danger

Frases de perigo

Classificações de perigo

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Órgãos-alvo

Respiratory system

Código de classe de armazenamento

11 - Combustible Solids

Classe de risco de água (WGK)

WGK 2

Ponto de fulgor (°F)

Not applicable

Ponto de fulgor (°C)

Not applicable

Equipamento de proteção individual

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


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Protocolos

To standardize a procedure for the enzymatic assay of Protease using Casein as a substrate at Sigma-Aldrich St. Louis.

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