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NA0410

Sigma-Aldrich

Kit Maxiprep de plasmídeos, livre de endotoxinas GenElute HP

greener alternative

sufficient for 25 preparations

Sinônimo(s):

Gen Elute, Kit de plasmídeo sem endotoxinas GenElute

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About This Item

Código UNSPSC:
41105501
NACRES:
NA.52

uso

sufficient for 25 preparations

Nível de qualidade

características do produto alternativo mais ecológico

Designing Safer Chemicals
Learn more about the Principles of Green Chemistry.

sustainability

Greener Alternative Product

técnica(s)

DNA extraction: suitable

categoria alternativa mais ecológica

temperatura de armazenamento

15-25°C

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Descrição geral

O Kit Maxiprep de plasmídeo sem endotoxinas GenElute HP oferece um método simples e rápido para isolar o DNA de plasmídeo sem de endotoxinas a partir de culturas recombinantes de E. coli. O kit usa um formato a vácuo com uma coluna de filtro para limpeza rápida do lisado bacteriano e uma coluna de sílica para captura de DNA de plasmídeo. Uma solução proprietária liga o DNA do plasmídeo à coluna de ligação e, ao mesmo tempo, impede a adsorção de endotoxinas. A tecnologia permite que o usuário atinja de forma consistente níveis de endotoxina inferiores a 0,1 unidade de endotoxina por μg de DNA de plasmídeo.

O DNA sem endotoxinas de alta qualidade está pronto para uso imediato nas aplicações mais exigentes, incluindo transfecção com células sensíveis a endotoxinas.

Aplicação

O kit Maxiprep com plasmídeo livre de endotoxinas GenElute HP foi usado no isolamento de plasmídeos do fígado suíno e de células competentes de Escherichia coli.

Características e benefícios

  • Até 1,2 mg de DNA plasmidial com número elevado de cópias com níveis de endotoxina de ≤0,1 UE/μg
  • De células peletizadas a plasmídeo purificado em apenas 35 minutos
  • Formato a vácuo conveniente

Princípio

Uma cultura de E. coli recombinante de um dia para o outro é coletada por centrifugação e submetida a um procedimento de lise alcalina com SDS modificada. O lisado é clarificado por filtração, seguida pela adição de uma solução de ligação que foi otimizada para preparados de plasmídeo livres de endotoxinas. O DNA de plasmídeo é, em seguida, capturado em sílica, enquanto as endotoxinas são impedidas de adsorver à membrana. Duas etapas de lavagem removem os contaminantes. Por fim, o DNA ligado é eluído em água livre de endotoxinas. O DNA de plasmídeo recuperado está predominantemente em sua forma superenrolada. O teor de RNA e DNA genômico fica abaixo dos níveis detectáveis por eletroforese em gel de agarose corado com brometo de etídio.

Outras notas

Para informações adicionais, visite o site www.sigma-aldrich.com/genelutehp.

Informações legais

GenElute is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Palavra indicadora

Danger

Classificações de perigo

Acute Tox. 4 Oral - Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 3 - Met. Corr. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Órgãos-alvo

Central nervous system

Código de classe de armazenamento

3 - Flammable liquids

Ponto de fulgor (°F)

77.0 °F - closed cup

Ponto de fulgor (°C)

25 °C - closed cup


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