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NA0410

Sigma-Aldrich

Kit Maxiprep de plasmídeos, livre de endotoxinas GenElute HP

greener alternative

sufficient for 25 preparations

Sinônimo(s):

Gen Elute, Kit de plasmídeo sem endotoxinas GenElute

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About This Item

Código UNSPSC:
41105501
NACRES:
NA.52

uso

sufficient for 25 preparations

características do produto alternativo mais ecológico

Designing Safer Chemicals
Learn more about the Principles of Green Chemistry.

sustainability

Greener Alternative Product

técnica(s)

DNA extraction: suitable

categoria alternativa mais ecológica

temperatura de armazenamento

15-25°C

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Descrição geral

O Kit Maxiprep de plasmídeo sem endotoxinas GenElute HP oferece um método simples e rápido para isolar o DNA de plasmídeo sem de endotoxinas a partir de culturas recombinantes de E. coli. O kit usa um formato a vácuo com uma coluna de filtro para limpeza rápida do lisado bacteriano e uma coluna de sílica para captura de DNA de plasmídeo. Uma solução proprietária liga o DNA do plasmídeo à coluna de ligação e, ao mesmo tempo, impede a adsorção de endotoxinas. A tecnologia permite que o usuário atinja de forma consistente níveis de endotoxina inferiores a 0,1 unidade de endotoxina por μg de DNA de plasmídeo.

O DNA sem endotoxinas de alta qualidade está pronto para uso imediato nas aplicações mais exigentes, incluindo transfecção com células sensíveis a endotoxinas.

Aplicação

O kit Maxiprep com plasmídeo livre de endotoxinas GenElute HP foi usado no isolamento de plasmídeos do fígado suíno e de células competentes de Escherichia coli.

Características e benefícios

  • Até 1,2 mg de DNA plasmidial com número elevado de cópias com níveis de endotoxina de ≤0,1 UE/μg
  • De células peletizadas a plasmídeo purificado em apenas 35 minutos
  • Formato a vácuo conveniente

Princípio

Uma cultura de E. coli recombinante de um dia para o outro é coletada por centrifugação e submetida a um procedimento de lise alcalina com SDS modificada. O lisado é clarificado por filtração, seguida pela adição de uma solução de ligação que foi otimizada para preparados de plasmídeo livres de endotoxinas. O DNA de plasmídeo é, em seguida, capturado em sílica, enquanto as endotoxinas são impedidas de adsorver à membrana. Duas etapas de lavagem removem os contaminantes. Por fim, o DNA ligado é eluído em água livre de endotoxinas. O DNA de plasmídeo recuperado está predominantemente em sua forma superenrolada. O teor de RNA e DNA genômico fica abaixo dos níveis detectáveis por eletroforese em gel de agarose corado com brometo de etídio.

Outras notas

Para informações adicionais, visite o site www.sigma-aldrich.com/genelutehp.

Informações legais

GenElute is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Palavra indicadora

Danger

Classificações de perigo

Acute Tox. 4 Oral - Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 3 - Met. Corr. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Órgãos-alvo

Central nervous system

Código de classe de armazenamento

3 - Flammable liquids

Ponto de fulgor (°F)

77.0 °F - closed cup

Ponto de fulgor (°C)

25 °C - closed cup


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