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N8630

Sigma-Aldrich

Nuclease P1

lyophilized powder, ≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)

Sinônimo(s):

3′-fosfo-hidrolase, Nuclease 5′-nucleotidesidrolase, Endonuclease P1

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About This Item

Número CAS:
Número da licença da enzima:
Número MDL:
Código UNSPSC:
12352204
NACRES:
NA.54

fonte biológica

Penicillium citrinum

Nível de qualidade

Formulário

lyophilized powder

atividade específica

≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)

secondary activity

≥1,000 units/mg protein 3′-nucleotidase

peso molecular

42-50 kDa

embalagem

vial of ≥250 units (using RNA substrate)

técnica(s)

DNA extraction: suitable
DNA purification: suitable

adequação

suitable for molecular biology

aplicação(ões)

cell analysis

temperatura de armazenamento

2-8°C

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Descrição geral

A nuclease P1 é um dos núcleos específicos de fita simples mais conhecidos em biologia molecular; a nuclease P1 é uma endonuclease específica de fita simples (de ssDNA ou ssRNA). A nuclease P1 também pode clivar regiões de fita simples em ácidos nucleicos de fita dupla.
A nuclease P1 de Penicillium citrinum é uma endonuclease dependente de zinco que exibe aumento da atividade na presença de baixas concentrações de ureia. A atividade seletiva da nuclease P1 revelou ter aplicações úteis em estudos sobre a estrutura de ácidos nucleicos.

Aplicação

  • A nuclease P1 cliva DNA ou RNA de fita simples em mononucleotídeos 5'
  • A nuclease P1 auxilia em pesquisas de danos e modificação do DNA
  • A composição de bases de ácidos nucleicos e a análise estrutural podem ser feitas usando a nuclease P1
  • A nuclease P1 foi historicamente utilizada para a produção industrial de 5′-mononucleotídeos a partir de RNA de levedura.
  • A remoção de ácidos nucleicos através da purificação de proteínas pode ser feita usando a nuclease P1
  • A nuclease P1 é um reagente-chave para o desenvolvimento de métodos para estudos que envolvem biossíntese de aminoácidos dependente de t-RNA e transamidação dependente de t-RNA
  • A nuclease P1 de Penicillium citrinum foi usada em um estudo para avaliar estruturas cristalinas usando sulfato de amônio ou polietilenoglicol 4000 como um agente precipitante.
  • A nuclease P1 foi usada em um estudo para investigar um método para análise de sequência direta de 20 a 25 nucleotídeos a partir de RNA marcado com grupo terminal nas extremidades 5′ ou 3′.
  • A nuclease P1 é usada para melhorar a sensibilidade de um método de marcação com 32P para detecção de adutos de DNA.
A enzima tem uma temperatura ideal de aproximadamente 70 °C, mas para um período longo de incubação, uma temperatura abaixo de 60 °C é mais adequada. Ela é estável na faixa de pH de 5 a 8.
A enzima tem uma temperatura ideal de aproximadamente 70 °C, mas para um período longo de incubação, uma temperatura abaixo de 60 °C é mais adequada. Ela é estável na faixa de pH de 5 a 8.

Ações bioquímicas/fisiológicas

Catalisa a clivagem endonucleolítica não específica de DNA e RNA de fita simples para produzir nucleosídeos 5′-fosfatos e 5′-fosfoligonucleotídeos. Não degrada mensuravelmente ácidos nucleicos de fita dupla, especialmente na presença de cloreto de sódio de mais de 400 mM em pH 6,0.

Características e benefícios

Nossa Nuclease P1 altamente ativa é testada quanto à atividade de 3′- 5′-fosfodiesterase e à atividade 3′-nucleotidase, além de ser a nuclease P1 mais ativa no mercado

propriedades físicas

Uma glicoproteína dependente de zinco que consiste de 270 resíduos de aminoácidos. Massa molecular: 42-50 kDa.

Definição da unidade

3′-5′-fosfodiesterase: Uma unidade liberará 1,0 μmol de nucleotídeos solúveis em ácido de RNA por min em pH 5,3 a 37 °C.
3′-nucleotidase: Uma unidade hidrolisará 1,0 μmol de ortofosfato de 3′-AMP por min em pH 7,2 a 37 °C.

Pictogramas

Health hazard

Palavra indicadora

Danger

Frases de perigo

Declarações de precaução

Classificações de perigo

Resp. Sens. 1

Código de classe de armazenamento

11 - Combustible Solids

Classe de risco de água (WGK)

WGK 3

Ponto de fulgor (°F)

Not applicable

Ponto de fulgor (°C)

Not applicable

Equipamento de proteção individual

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


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Exceedingly sensitive procedures are required to detect the presence of covalent DNA adducts in humans exposed to environmental genotoxicants because of low levels of such derivatives (1 adduct in 10(8)-10(10) DNA nucleotides). A 32P-postlabeling assay for detection and quantitation of
Enhancement of nuclease P1 activity in low concentration of denaturants
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