NGLYFL-RO

N-glicosidase F

recombinant form of the gene from Flavobacterium meningosepticum

• Sinônimo(s): N-glicosidase F, PNGase F, Peptídeo-N-glicosidase F, Peptídeo-N⁴-(acetil-β-glicosaminil)-asparagina amidase
• Número da licença da enzima: 3.5.1.52 (BRENDA, IUBMB)
• Código UNSPSC: 12352204

Propriedades

• fonte biológica: bacterial (Flavobacterium meningosepticum)
• Nível de qualidade: 100
• recombinante: expressed in E. coli
• conjugado: (N-linked)
• Ensaio: ≥90% (SDS-PAGE)
• Formulário: lyophilized
• atividade específica: >25000 units/mg protein
• peso molecular: 35.5 kDa
• purificado por: electrophoresis
• embalagem: pkg of 100 U (11365185001); pkg of 250 U (11365193001)
• fabricante/nome comercial: Roche
• condição de armazenamento: (Keep container tightly closed in a dry and well-ventilated place.)
• técnica(s): activity assay: suitable
• cor: colorless
• pH ideal: 7.0-8.0
• solubilidade: water: soluble
• adequação: suitable for enzyme test
• atividade externa: Endoglycosidase F, none detected; a-Fucosidase, present; b-Galactosidase, present; b-N-Acetylhexosaminidase, present; dA(17h ≤100 units, present
• temperatura de armazenamento: 2-8°C

Descrição

Descrição geral

A N-Glicosidase F (PNGase F) é uma enzima potente que se hidrolisa na ligação de glicosilamina. Ele também ajuda a gerar um peptídeo e um oligossacarídeo sem carboidratos com unidade de di-N-acetilquitobiose.

A N-glicosidase F, também conhecida como PNGase F, é uma enzima asparagina amidase derivada da Flavobacterium meningosepticum. Ela é amplamente usada como uma ferramenta valiosa em pesquisa de proteínas para investigar e analisar a N-glicosilação.

Especificidade

Hidrolisa todos os tipos de cadeias de N-glicanos a partir de glicopeptídeos e glicoproteínas, a menos que contenham resíduos de fucose central ligados a α1,3 presentes em glicoproteínas de insetos e plantas. Livre de atividades proteolíticas contaminantes (x = H ou açúcar[es]) de acordo com os procedimentos de controle de qualidade atuais.

Aplicação

A N-glicosidase F tem sido usada para a desglicosilação de N-glicoproteínas.

Use N-glicosidase F para clivar todos os tipos de N-glicanos ligados à asparagina, contanto que o grupo amino e o grupo carboxila estejam presentes em uma ligação peptídica e o oligossacarídeo tenha o comprimento mínimo da unidade central da quitobiose. Os produtos da reação são amônia, ácido aspártico (na cadeia peptídica) e o oligossacarídeo completo.
Observação: A N-Glicosidase F recombinante também está disponível como solução.

Definição da unidade

Uma unidade representa a atividade enzimática que hidrolisa 1 nmol de glicopeptídeo fibrina dabsyl ou 0,2 nmol de glicoproteína fetuína dansyl em 1 minuto a 37 °C e pH 7,8.

forma física

Solução transparente e incolor após a reconstituição

Nota de preparo

Condições de armazenamento (solução de trabalho): 2-8 °C
A solução reconstituída é estável entre 2 ºC a 8 °C por pelo menos quatro semanas.

Reconstituição

A dissolução do conteúdo em 0,1 ml de água redestilada (pacote com 100 unidades) ou 0,25 ml de água bidestilada (pacote com 250 unidades) respectivamente, resulta em uma concentração de tampão de fosfato de sódio 100 mM, EDTA 25 mM, pH 7,2.
Observação: A N-Glicosidase F recombinante também está disponível como solução de glicerol a 50%.

Outras notas

Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.

Informações de segurança

• Código de classe de armazenamento: 13 - Non Combustible Solids
• Classe de risco de água (WGK): WGK 2
• Ponto de fulgor (°F): does not flash
• Ponto de fulgor (°C): does not flash