ABN249
Anticorpo Antiadutos de Michael HNE, reduzido
serum, from rabbit
Sinônimo(s):
Reduced 4-hydroxy-trans-2-nonenal Michael adducts, Reduced HNE Michael adducts
Faça loginpara ver os preços organizacionais e de contrato
About This Item
Código UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Produtos recomendados
fonte biológica
rabbit
Nível de qualidade
forma do anticorpo
serum
tipo de produto de anticorpo
primary antibodies
clone
polyclonal
reatividade de espécies
bovine, human
técnica(s)
western blot: suitable
Condições de expedição
ambient
modificação pós-traducional do alvo
unmodified
Descrição geral
Aldeídos reativos gerados durante a peroxidação de lipídios contribuem para o dano celular e tecidual associado ao estresse oxidativo. Compostos carbonílicos alfa e beta-insaturados, tais como 4-hidroxi-2-nonenal (HNE), 4-oxo-2-nonenal (ONE) e acroleína, gerados a partir da oxidação de ácidos graxos poli-insaturados (AGPIs), interagem prontamente com os grupos nucleofílicos nas proteínas, levando à reticulação intramolecular ou intermolecular de proteínas. Existem dois tipos de modificações de HNE, o primeiro tipo é formado por uma reação 1:1 de aduto de Michael de lisina-amina, histidina-imidazol ou cisteína-sulfidrila, enquanto o segundo tipo é produzido por um HNE que reage simultaneamente com dois grupos amina livres de duas N-alfa-acetil-lisinas (NALs), ou seja, o chamado aduto de Michael-base de Schiff. No último caso, a razão inicial de 2:1 de lisina não fluorescente de aduto de Michael de lisina-HNE-base de Schiff sofre ainda ciclização oxidativa para formar um derivado fluorescente 2-hidroxi-3-imino-1,2-di-hidropirrol comumente denominado de fluoróforo de HNE. O aduto de Michael de HNE-Lis formado de modo reversível não é estável e, com frequência, usa-se redução por boro-hidreto de sódio (NaBH4) para preservar a modificação de Lis-HNE em amostras de proteína. A estabilização redutiva pelo tratamento com NaBH4 também é usada para impedir a perda de 4-HNE do aduto de Michael de 4-HNE-Cis por retrorreação de adição de Michael (do inglês, RMA) durante MS/MS com dissociação induzida por colisão (do inglês, CID) e com dissociação por transferência de elétrons (do inglês, ETD).
Especificidade
A modificação do alvo não é específica para uma determinada espécie.
Este antissoro policlonal detectou BSA modificado por HNE somente depois, e não antes, da redução por boro-hidreto de sódio.
Imunogênio
KLH modificado por HNE quimicamente reduzido por boro-hidreto de sódio.
Aplicação
Notas de aplicação:
1. ABN249 substitui 393207 da Calbiochem. É esperado que o ABN249 funcione em imunocitoquímica e imuno-histoquímica. Consulte as 393207 citações a seguir como exemplos de preparo de amostras e detecção nesses dois tipos de aplicações:
Usatyuk, P.V., et al. (2006). J. Biol. Chem. 281(46):35554-35566 (imunocitoquímica).
McCormack, A.L., et al. (2005). J. Neurochem. 93(4):1030-1037 (imuno-histoquímica).
2. O antifluoróforo de HNE, N.º do cat. 393206, também está disponível para a detecção do fluoróforo de HNE por ELISA, imuno-histoquímica e western blot.
3. Para gerar um controle positivo para western blot, trate uma solução de BSA de 2 mg/ml em KH2PO4 10 mM, pH 7,4, com HNE 0,1 a 0,5 mM e incube por 1 h a 37 °C. A reação pode ser monitorada pela diminuição da absorbância de HNE em 224 nm (coeficiente de extinção 13.750/M). O HNE livre pode ser removido pela filtração em gel e diálise após a reação química.
Adutos de Michael com HNE em soluções proteicas devem ser quimicamente reduzidos por boro-hidreto de sódio (NaBH4) antes da análise usando ABN1348. Uma solução de NaBH4 100 mM recém-preparada em NaOH 1 mM é adicionada na proporção de 1:9 (V:V) à solução de amostra de proteínas para uma concentração final de NaBH4 de 10 mM. A solução proteica é mantida em temperatura ambiente por 10 a 30 min antes da supressão com a adição de 5 a 10 equivalentes molares de acetona.
1. ABN249 substitui 393207 da Calbiochem. É esperado que o ABN249 funcione em imunocitoquímica e imuno-histoquímica. Consulte as 393207 citações a seguir como exemplos de preparo de amostras e detecção nesses dois tipos de aplicações:
Usatyuk, P.V., et al. (2006). J. Biol. Chem. 281(46):35554-35566 (imunocitoquímica).
McCormack, A.L., et al. (2005). J. Neurochem. 93(4):1030-1037 (imuno-histoquímica).
2. O antifluoróforo de HNE, N.º do cat. 393206, também está disponível para a detecção do fluoróforo de HNE por ELISA, imuno-histoquímica e western blot.
3. Para gerar um controle positivo para western blot, trate uma solução de BSA de 2 mg/ml em KH2PO4 10 mM, pH 7,4, com HNE 0,1 a 0,5 mM e incube por 1 h a 37 °C. A reação pode ser monitorada pela diminuição da absorbância de HNE em 224 nm (coeficiente de extinção 13.750/M). O HNE livre pode ser removido pela filtração em gel e diálise após a reação química.
Adutos de Michael com HNE em soluções proteicas devem ser quimicamente reduzidos por boro-hidreto de sódio (NaBH4) antes da análise usando ABN1348. Uma solução de NaBH4 100 mM recém-preparada em NaOH 1 mM é adicionada na proporção de 1:9 (V:V) à solução de amostra de proteínas para uma concentração final de NaBH4 de 10 mM. A solução proteica é mantida em temperatura ambiente por 10 a 30 min antes da supressão com a adição de 5 a 10 equivalentes molares de acetona.
O anticorpo antiadutos de Michael de HNE, reduzidos, N.º do cat. ABN249, é um anticorpo policlonal de coelho altamente específico direcionado à forma reduzida dos adutos de Michael de 4-hidroxi-2-noneal e foi testado em western blot.
Qualidade
Avaliado por western blot em HNE-BSA reduzido.
Análise de western blot: uma proporção de 1:10.000 deste anticorpo detectou 10 ng de BSA modificado por HNE somente depois, e não antes, da redução por boro-hidreto de sódio.
Análise de western blot: uma proporção de 1:10.000 deste anticorpo detectou 10 ng de BSA modificado por HNE somente depois, e não antes, da redução por boro-hidreto de sódio.
Descrição-alvo
Variável dependendo do(s) tamanho(s) da(s) proteína(s) modificada(s) por HNE. Bandas não caracterizadas podem ser observadas em um ou mais lisados.
Ligação
Substitui: 393207 da Calbiochem
Nota de análise
Controle
BSA modificado por HNE quimicamente reduzido por boro-hidreto de sódio.
BSA modificado por HNE quimicamente reduzido por boro-hidreto de sódio.
Outras notas
Concentração: consulte a ficha de informações específica do lote.
Não está encontrando o produto certo?
Experimente o nosso Ferramenta de seleção de produtos.
Código de classe de armazenamento
12 - Non Combustible Liquids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 1
Ponto de fulgor (°F)
Not applicable
Ponto de fulgor (°C)
Not applicable
Certificados de análise (COA)
Busque Certificados de análise (COA) digitando o Número do Lote do produto. Os números de lote e remessa podem ser encontrados no rótulo de um produto após a palavra “Lot” ou “Batch”.
Já possui este produto?
Encontre a documentação dos produtos que você adquiriu recentemente na biblioteca de documentos.
Bipradas Roy et al.
Toxics, 10(6) (2022-06-24)
Exposure to environmental pollutants, including dioxin-like polychlorinated biphenyls (PCBs), play an important role in vascular inflammation and cardiometabolic diseases (CMDs) by inducing oxidative stress. Earlier, we demonstrated that oxidative stress-mediated lipid peroxidation derived 4-hydroxy-2-nonenal (4HNE) contributes to CMDs by decreasing
Xinzhu Wang et al.
Scientific reports, 9(1), 16238-16238 (2019-11-09)
Protein interactions of Tau are of interest in efforts to decipher pathogenesis in Alzheimer's disease, a subset of frontotemporal dementias, and other tauopathies. We CRISPR-Cas9 edited two human cell lines to generate broadly adaptable models for neurodegeneration research. We applied
Nossa equipe de cientistas tem experiência em todas as áreas de pesquisa, incluindo Life Sciences, ciência de materiais, síntese química, cromatografia, química analítica e muitas outras.
Entre em contato com a assistência técnica