Analiza GC steroli (sililowanych pochodnych) w oliwie z oliwek (frakcja wolnych steroli) na 3325-5ms po SPE przy użyciu Discovery DSC-Si
Materiały
kolumna analityczna
CONDITIONS
sample preparation
SPE (Solid Phase Extraction)
sample/matrix
olive oil spiked with a mixed sterol standard at 5 μg/g
SPE tube/cartridge
Discovery DSC-Si, 1 g/6 mL (52656-U)
condition
2 x 5 mL hexane
sample addition
1 mL
elution
esters fraction: 2.5 mL of hexane:ethyl acetate (90:10); free sterols fraction; 5 mL of hexane:ethyl acetate (90:10) and 3 mL x 5 of ethanol:diethyl ether:hexane (50:25:25)
eluate post-treatment
Evaporate to dryness and perform silylation as described in the Analysis Note.
column
SLB-5ms, 20 m x 0.20 mm I.D., 0.20 μm (28564-U)
oven
125 °C (1 min), 10 °C/min to 325 °C (10 min)
inj. temp.
250 °C
detector
MSD, rn/z 500 - 600
MSD interface
325 °C
carrier gas
helium, 0.6 mL/min, constant
injection
1 μL, splitless
liner
4 mm I.D. single taper
sample
Olive oil sample; fractionated, transesterified, and silylated
Opis
Komentarz do analizy
Wstępna obróbka próbki
Odważyć 0,25 g oleju do probówki. Do próbki dodać 12,5 μl 65-100 μg/mL mieszanki steroli std. Dodać 1 ml heksanu:octanu etylu (90:10). Po frakcjonowaniu SPE, odparować rozpuszczalnik z każdej frakcji, dodać 1 ml 30% metanolowego roztworu metanolanu sodu:MeOH:MTBE (13:27:60), wymieszać i pozostawić w temperaturze pokojowej na 30 min. Dodać 1 ml wody i 2 ml n-heptanu. Odciągnąć fazę wodną (na dno) i zastąpić ją 1 ml 1% roztworu kwasu cytrynowego. Wycofać fazę organiczną i wysuszyć nad bezwodnym siarczanem sodu. Sililowanie: Odparować fazę organiczną do sucha. Dodać 125 μL Sylon BFT i 125 μL pirydyny. Ogrzewać w temperaturze 70°C przez 20 minut. Próbka jest gotowa do analizy GC-MS.
Zawartość steroli jest jednym z szeregu testów stosowanych do analizy składu i określenia klasy i autentyczności oliwy z oliwek. Wyniki testów są porównywane z normami, takimi jak te ustanowione przez Międzynarodową Radę Oliwy z Oliwek (IOC) i Departament Rolnictwa Stanów Zjednoczonych. W olejach roślinnych sterole występują w postaci wolnej lub zestryfikowanej z kwasami tłuszczowymi. W tym zastosowaniu sterole były analizowane w oliwie z oliwek oddzielnie jako wolne i zestryfikowane. Osiągnięto to poprzez wykorzystanie różnicy polarności między tymi dwiema grupami do ich frakcjonowania przy użyciu żelu krzemionkowego SPE. Zamiast zmydlania, frakcje poddano transestryfikacji w celu uwolnienia zestryfikowanych steroli. Frakcje były następnie sililowane i analizowane za pomocą GC-MS. Wszystkie sililowane sterole zawierały znaczący jon molekularny w swoim widmie masowym, co umożliwiło identyfikację pików bez zakłóceń matrycy. Sterole wyizolowane w wolnej frakcji są pokazane tutaj.
Informacje prawne
SLB is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany