HPLC Analysis of Barbiturates in Serum on Discovery® C18 after SPE using Discovery® DSC-18Lt
Materiały
Standardowe
Secobarbital solution
1 mg/mL in methanol, ampule of 1 mL, certified reference material, Cerilliant®Phenobarbital solution
1 mg/mL in methanol, ampule of 1 mL, certified reference material, Cerilliant®Butabarbital solution
1.0 mg/mL in methanol, ampule of 1 mL, certified reference material, Cerilliant®Barbiturate Mix-5 solution
250 μg/mL each component in methanol, ampule of 1.0 mL, certified reference material, Cerilliant®Pentobarbital solution
1.0 mg/mL in methanol, ampule of 1 mL, certified reference material, Cerilliant®kolumna analityczna
probówka lub płytka SPE
CONDITIONS
sample preparation
SPE (Solid Phase Extraction)
sample/matrix
0.5 mL porcine serum spiked with 0.5 μg/mL or 1.0 μg/mL each analyte then diluted with 0.5 mL water
SPE tube/cartridge
Discovery DSC-18Lt, 500 mg/3 mL (52613-U)
condition
2 mL methanol; 2 mL DI water
sample addition
1 mL at 0.75 mL/min
washing
2 mL 5% methanol, then vacuum or air dry for 5-10 min
elution
1-2 mL methanol
eluate post-treatment
dry eluate with nitrogen purge (40 °C; 15-20 min), reconstitute in 20 μL mobile phase
column
Discovery C18, 15 cm × 4.6 mm, 5 μm preceded by a 2 cm C18 guard column and 0.5 μm frit filter (504955)
mobile phase
[A] methanol; [B] water (40:60, A:B)
flow rate
1 mL/min
column temp.
30 °C
detector
UV, 214 nm
injection
30 μL, diluted porcine serum extract
Opis
Komentarz do analizy
Barbiturany są powszechnie nadużywane i należą do najczęściej testowanych związków w zastosowaniach klinicznych, kryminalistycznych lub terapeutycznego monitorowania leków. Przedstawiono tutaj podstawową separację zestawu barbituranów na kolumnie Discovery C18 HPLC po ekstrakcji z surowicy kolczastej za pomocą Discovery DSC-18Lt SPE. Zastosowano najwyższej jakości rozpuszczalniki HPLC, aby zapewnić niskie zakłócenia tła i niskie zanieczyszczenie cząstkami stałymi w celu zapewnienia niezawodnej i bezawaryjnej pracy. Wzorce referencyjne Cerilliant i Sigma-Aldrich zapewniły niezawodną identyfikację i kwantyfikację. W badaniu wykorzystano stację roboczą SPE 2518 2858.
Informacje prawne
Discovery is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
RapidTrace is a registered trademark of Zymark Corp.
Zymark is a registered trademark of Sotax Corporation