Przejdź do zawartości
Merck

Środki sieciujące

Ogólny schemat biokoniugacji ilustrujący tworzenie biokoniugatu

Jesteśmy dumni mogąc zaoferować szeroką gamę środków łączących i sieciujących dla wszystkich potrzeb biochemii. Nasze odczynniki białkowe nadają się do stabilizowania struktur w interakcjach białko-białko, białko-peptyd i peptyd/białko-małe cząsteczki, do unieruchamiania białek na stałym podłożu do testów lub oczyszczania, a także do różnych koniugacji peptyd-kwas nukleinowy i kwas nukleinowy-kwas nukleinowy, a także do wielu innych zastosowań.Zapoznaj się z naszą bogatą ofertą wszechstronnych łączników i sieciatorów, aby znaleźć najbardziej wydajny i optymalny odczynnik do przełomowych odkryć naukowych.



Related Product Resources

Aldrichimica Acta VOL. 50 NO. 1, 2, 3


Łączniki homobifunkcyjne i heterofunkcyjne

Nasze łączniki homobifunkcyjne i heterofunkcyjne zawierają różne grupy funkcyjne, takie jak aminy pierwszorzędowe, sulfhydryle, kwasy, alkohole i bromki. Wiele z naszych łączników jest funkcjonalizowanych maleimidem (reaktywnym sulfhydrylem) i estrem sukcynimidylowym (NHS) lub grupami izotiocyjanianowymi (ITC), które reagują z aminami.

Odczynniki sieciujące

Odczynniki sieciujące to cząsteczki zawierające dwa lub więcej reaktywnych końców, które są "aktywowane" w celu przyłączenia się do określonych grup funkcyjnych (np. amin i sulfhydryli) za pomocą wiązania kowalencyjnego. Przydatność chemii sieciowania jest realizowana w takich zastosowaniach jak:

  • określanie struktury i/lub funkcji białek
  • immobilizacja białek lub innych biomolekuł
  • ogólna koniugacja biomolekuła-biomolekuła
  • koniugaty przeciwciało-lek

Niektóre z najpopularniejszych środków sieciujących zawierają maleimid, reaktywne grupy sulfhydrylowe lub estry sukcynimidylowe (często określane jako estry NHS), które reagują z aminami. Nasze portfolio obejmuje wszystkie grupy funkcjonalne o różnych długościach łączników i rozpuszczalności. Estry sulfobursztynoimidylowe pozwalają na bardziej rozpuszczalne w wodzie sieciowanie, co może być przydatne podczas pracy z dużymi biomolekułami, które nie są podatne na rozpuszczalniki organiczne. Nasze środki sieciujące z rozszczepialnymi łącznikami (np, disulfidy) są optymalne do zastosowań, w których trwałe wiązanie nie jest pożądane.

Wybór środków sieciujących

Wybierając środek sieciujący do danego zastosowania, należy wziąć pod uwagę kilka czynników, takich jak właściwości chemiczne i fizyczne odczynnika, grupy funkcjonalne, które ma on łączyć, jego długość, wielkość cząsteczkową, rozpuszczalność w wodzie i zdolność do rozszczepiania:

Specyficzność chemiczna: Jednym z najbardziej podstawowych aspektów projektowania środków sieciujących jest to, czy odczynnik jest homobifunkcyjny czy heterobifunkcyjny. Związki homobifunkcyjne reagują na obu końcach z tą samą docelową grupą funkcyjną, tworząc w ten sposób kowalencyjne usieciowanie między dwiema cząsteczkami przy użyciu tego samego rodzaju wiązania. Są one stosowane w jednoetapowych reakcjach polimeryzacji podobnych grup funkcyjnych, w tworzeniu wewnątrzcząsteczkowych wiązań krzyżowych oraz w ocenie interakcji białkowych. Odczynniki heterobifunkcyjne mają dwie różne grupy końcowe, dzięki czemu każdy koniec może reagować z inną grupą funkcyjną. Są one stosowane w kontrolowanych reakcjach dwuetapowych, aby uniknąć niepożądanych reakcji krzyżowych i polimeryzacji.

Celowane grupy funkcyjne: Aminy, tiole i hydroksyle są głównymi grupami nukleofilowymi i w odpowiednich warunkach reagują bezpośrednio z elektrofilowymi grupami reaktywnymi obecnymi w wielu odczynnikach biokoniugacyjnych. Natomiast grupy funkcyjne składające się z karboksylanów, aldehydów, organicznych fosforanów i reaktywnych miejsc wodorowych wymagają specjalnych środków aktywujących lub wtórnych środków sprzęgających, zanim utworzą wiązania kowalencyjne z inną grupą funkcyjną.

Długość środka sieciującego:Przy wyborze środka sieciującego należy wziąć pod uwagę wymiary lub całkowitą długość liniową cząsteczki docelowej przed i po koniugacji. Ramię dystansowe lub mostek krzyżowy odczynnika określa głównie długość cząsteczkową powstałego związku. Długość tę można określić za pomocą niektórych programów do modelowania molekularnego.

Cleavable vs. Noncleavable Crosslinkers: Jeśli oddziałujące biomolekuły, które zostały wychwycone przez sieciowanie, muszą być następnie wyizolowane i przeanalizowane, ważne jest, aby ramię dystansowe środka sieciującego było rozszczepialne. Dodatkowo, rozszczepialne łączniki są stosowane jako odczynniki transferowe do badania oddziałujących białek. Nasze disulfidy są jednymi z najpopularniejszych rozszczepialnych łączników krzyżowych. Nasze portfolio obejmuje również rozszczepialne estry i sulfony.

Hydrofobowe vs hydrofilowe odczynniki sieciujące: W niektórych zastosowaniach hydrofobowość odczynnika może być zaletą, zwłaszcza gdy aplikacja obejmuje penetrację błon komórkowych. Hydrofobowe odczynniki bez silnie polarnych grup mogą szybko przenikać przez błony i sieciować lub znakować wewnętrzne białka komórkowe. Jednak związki hydrofobowe, które zawierają jedną lub więcej ujemnie naładowanych grup sulfo-NHS, będą ograniczone do reagowania z białkami na zewnętrznej powierzchni błony komórkowej ze względu na ich ujemny ładunek. Możliwość przełączania między znakowaniem powierzchni komórki a znakowaniem wewnątrzkomórkowym poprzez wybór naładowanych lub nienaładowanych odczynników jest jedną z zalet stosowania hydrofobowych środków sieciujących.



Zaloguj się, aby kontynuować

Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.

Nie masz konta użytkownika?