Przejdź do zawartości
Merck
Wszystkie zdjęcia(1)

Kluczowe dokumenty

MGECKO2G

Sigma-Aldrich

Gecko2 Mouse Whole Genome CRISPR Pool, gRNA Only Lenti Particles (wektor Gecko2)

Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych


About This Item

Kod UNSPSC:
12352200
NACRES:
NA.51

opakowanie

pkg of 8x25 μL (vials)

Poziom jakości

stężenie

5x108  VP/ml (via p24 assay)

Zastosowanie

CRISPR

Warunki transportu

dry ice

temp. przechowywania

−70°C

Opis ogólny

Opracowane przez laboratorium Fenga Zhanga w Broad Institute, mysie biblioteki GeCKO v2 (system dwóch wektorów) składają się z ponad 100 000 unikalnych gRNA do nokautowania genów w genomie myszy. Wykorzystując podwójny wektor lenti CRISPR, w którym połączone biblioteki będą wyrażać tylko gRNA (z wektorem lentiGuide-Puro), system ten wytwarza ponad 100-krotnie wyższe miano wirusa w porównaniu do wersji 1. Pula lentiGuide-Puro powinna być używana tylko w liniach komórkowych z już zintegrowanym Cas9 (który można wygenerować za pomocą oddzielnego wektora lenti-Cas9-Blast). Pula lentiwirusowego mysiego RNA GeCKO firmy Sigma jest dostarczana wyłącznie w podwielokrotnościach 8 x 25 ul przy minimalnym mianie 5X10^8 TU/ml (mierzonym za pomocą testu p24).

Każda biblioteka specyficzna dla gatunku jest dostarczana jako dwie półbiblioteki (A i B). Zaleca się przesiewanie obu bibliotek A i B razem, które będą zawierać 6 sgRNA na gen (3 sgRNA w każdej bibliotece). Obie biblioteki zawierają 1000 niecelujących kontrolnych sgRNA. Biblioteka A jest również ukierunkowana na miRNA (4 sgRNA na miRNA).

Zastosowanie

Genomika funkcjonalna / screening / walidacja celów

Cechy i korzyści

  • Wykorzystanie nukleaz CRISPR do eliminacji genów kodujących białka w celu oceny ich funkcji.
  • Efektywne badanie całego ludzkiego genomu (ponad 16 000 genów) na stanowisku badawczym bez użycia robotów lub specjalistycznego sprzętu.
  • Liczne wbudowane kontrole wzbogacania i pozbawiania pozwalają badaczom na pewną ocenę powodzenia ich zbiorczych eksperymentów przesiewowych - Lentiwirusowe CRISPR mogą infekować szeroką gamę komórek ssaków poprzez transdukcję pojedynczego RNA przewodnika (sgRNA) do mysiej linii komórkowej z ekspresją Cas9, aby ułatwić nokaut genów w zastosowaniach przesiewowych.
  • Użyj systemu podwójnego wektora dla mysich bibliotek GeCKO w wersji 2 dla mysich linii komórkowych, które mają Cas9 już zintegrowany z genomem.
  • Po transdukcji należy zastosować selekcję gRNA puromycyną.

Uwaga dotycząca przygotowania

Krzywa zabijania Puro i określanie CFU (jednostki tworzenia kolonii) na ml. Przed wykonaniem badań przesiewowych w skali biblioteki należy przeprowadzić dwa wstępne eksperymenty. Odwiedź stronę Sigma.com/pooledscreening.

Inne uwagi

This product is for R&D use only, not for drug, household, or other uses. Please consult the Material Safety Data Sheet for information regarding hazards and safe handling practices. Though the lentiviral transduction particles produced are replication incompetent, it is recommended that they be treated as Risk Group Level 2 (RGL-2) organisms in laboratory handling. Follow all published RGL-2 guidelines for laboratory handling and waste decontamination.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Kod klasy składowania

12 - Non Combustible Liquids

Klasa zagrożenia wodnego (WGK)

WGK 3

Temperatura zapłonu (°F)

Not applicable

Temperatura zapłonu (°C)

Not applicable


Wybierz jedną z najnowszych wersji:

Certyfikaty analizy (CoA)

Lot/Batch Number

It looks like we've run into a problem, but you can still download Certificates of Analysis from our Dokumenty section.

Proszę o kontakt, jeśli potrzebna jest pomoc Obsługa Klienta

Masz już ten produkt?

Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.

Odwiedź Bibliotekę dokumentów

Klienci oglądali również te produkty

Produkty

Our lentiviral vector systems are developed with enhanced safety features. Numerous precautions are in place in the design of our lentiviruses to prevent replication. Good handling practices are a must.

Systemy wektorów lentiwirusowych mają priorytetowe znaczenie dla bezpieczeństwa, a środki ostrożności zapobiegają replikacji. Dobre praktyki obsługi są niezbędne do użytkowania.

Uzyskaj wskazówki dotyczące obchodzenia się z lentiwirusami, optymalizacji konfiguracji eksperymentu, miareczkowania cząstek lentiwirusów i wyboru przydatnych produktów do transdukcji.

Successful targeting relies on optimizing key sensitive steps in the process, including lentiviral transduction. Below are some helpful handling and titration tips from our R&D lentiviral experts.

Protokoły

You are not alone designing successful CRISPR, RNAi, and ORF experiments. Sigma-Aldrich was the first company to commercially offer lentivirus versions of targeted genome modification technologies and has the expertise and commitment to support new generations of scientists.

FACS (Fluorescence-Activated Cell Sorting) provides a method for sorting a mixed population of cells into two or more groups, one cell at a time, based on the specific light scattering and fluorescence of each cell. This method provides fast, objective, and quantitative recording of fluorescent signals from individual cells.

Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.

Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej