B20223

Mieszanka kolagenazy - DNazy I - Dyspazy II

Tissue dissociation blend, lyophilized powder, suitable for cell culture

• Synonim(y): 5′-oligonukleotydohydrolaza dezoksyrybonukleinianowa, Clostridium histolyticum, DNaza I, Deoksyrybonukleaza I, Dispase II, Klostridiopeptydaza A, Proteaza z Bacillus polymyxa, kolagenaza, mieszanka dysocjacji tkanek, mieszanka enzymów, mieszanka kolagenazy
• Kod UNSPSC: 12352204
• NACRES: NA.71

Właściwości

• Poziom jakości: 200
• Formularz: lyophilized powder
• aktywność właściwa: ≥2 units/mL Dispase II
• stężenie: 0.1 mg/mL (DNase); 1 mg/mL (collagenase)
• metody: cell culture | mammalian: suitable
• Warunki transportu: dry ice
• temp. przechowywania: -10 to -25°C

Opis

Opis ogólny

Mieszanka kolagenazy, deoksyrybonukleazy I i dyspazy II to koktajl enzymów do dysocjacji tkanek w celu izolacji komórek. Proces dysocjacji tkanek polega na uwolnieniu funkcjonalnych i żywotnych komórek z tkanek zwierzęcych, przy minimalnym wpływie na żywotność komórek. Głównym odczynnikiem stosowanym w procesie dysocjacji tkanek jest kolagenaza. Kolagenazy to enzymy, które rozkładają natywny kolagen utrzymujący tkanki zwierzęce razem. Drugim enzymem znajdującym się w naszej mieszance jest deoksyrybonukleaza I (DNaza I). DNaza I jest endonukleazą z rodziny DNaz, której szczególną rolą jest degradacja DNA. DNaza I jest jedną z najlepiej scharakteryzowanych endonukleaz pochodzenia ssaczego. Podczas dysocjacji tkanki, części komórek ulegają lizie, co powoduje uwolnienie DNA. Monomolekularne DNA może powodować zlepianie się komórek, więc dodanie DNazy I do naszej mieszanki prowadzi do degradacji tego pozakomórkowego DNA, unikając w ten sposób utraty komórek z powodu niepożądanego zlepiania się. Trzecim enzymem znajdującym się w naszej mieszance jest Dispase II. Diapaza II jest wolna od ssaków pochodzenia zwierzęcego. Jego łagodne działanie proteolityczne sprawia, że enzym ten jest szczególnie odpowiedni do przygotowywania komórek pierwotnych i jako enzym pomocniczy w zastosowaniach związanych z izolacją komórek i dysocjacją tkanek. Jest ona powszechnie stosowana do oddzielania naskórka od skóry właściwej, pozostawiając nienaruszone płaty nabłonka oraz do izolacji komórek macierzystych, hepatocytów i innych komórek. Ta mieszanka kolagenazy pozwala na znacznie mniej szkodliwą izolację komórek, zapobiegając niepożądanemu zlepianiu się komórek bez uszkodzenia błony komórkowej.

Działania biochem./fizjol.

Kolagenaza: Skuteczne uwolnienie komórek z tkanki wymaga działania enzymów kolagenazy. Kolagenaza jest aktywowana przez cztery gramy wapnia (^Ca2+) na mol enzymu. Optymalne pH wynosi 6,3-8,8. Enzym ten jest zwykle stosowany do trawienia składników łącznych w próbkach tkanek w celu uwolnienia poszczególnych komórek. Leczenie kolagenazą może spowodować śmierć niektórych komórek. Zazwyczaj do trawienia stosuje się stężenia od 0,1 do 5 mg/ml. Czas trwania reakcji waha się od 15 minut do kilku godzin i zapewnia zadowalającą dysocjację komórek bez powodowania zbyt dużej ich śmierci. Hialuronidaza: degraduje hialuronian i losowo rozszczepia wiązania β-N-acetyloheksozamino-(1-4)-glikozydowe w kwasie hialuronowym, chondroitynie i siarczanach chondroityny.

Uwaga dotycząca przygotowania

Dla stężenia roboczego: Kolagenazy o stężeniu 1 mg/ml, Deoksyrybonukleazy I o stężeniu 0,1 mg/ml i Dyspazy II o stężeniu ≥ 2 jednostek/ml, odtworzyć liofilizowany proszek z 10 ml roztworu soli zbilansowanej Hanka z wodorowęglanem sodu, bez czerwieni fenolowej, chlorku wapnia i siarczanu magnezu (#H6648).

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Piktogramy: GHS08,GHS07
• Hasło ostrzegawcze: Danger
• Zwroty wskazujące rodzaj zagrożenia: H315,H319,H334,H335
• Zwroty wskazujące środki ostrożności: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Klasyfikacja zagrożeń: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Organy docelowe: Respiratory system
• Kod klasy składowania: 11 - Combustible Solids
• Klasa zagrożenia wodnego (WGK): WGK 3