HTS157M
ChemiSCREEN Preparat błony ludzkiego receptora adrenergicznego α2B
Human alpha2B GPCR membrane prepation for Radioligand binding Assays.
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
41106514
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.84
Polecane produkty
pochodzenie biologiczne
human
Poziom jakości
rekombinowane
expressed in Chem-1 cells
producent / nazwa handlowa
ChemiScreen
Chemicon®
metody
radioligand binding assay (RLBA): suitable
numer dostępu NCBI
numer dostępu UniProt
Warunki transportu
dry ice
Opis ogólny
Endogenne aminy katecholowe, epinefryna i norepinefryna, mają głęboki wpływ na aktywność mięśni gładkich, czynność serca, metabolizm węglowodanów i tłuszczów, wydzielanie hormonów, uwalnianie neuroprzekaźników i działanie ośrodkowego układu nerwowego. W działaniach tych pośredniczą receptory GPCR należące do dwóch podrodzin, α- i β-adrenergicznych (Bylund i in., 1994). Członkowie podrodziny receptorów adrenergicznych α2, składającej się z α2A, α2B i α2C, łączą się głównie z Gi w celu hamowania produkcji cAMP i odgrywają ważną rolę w regulacji funkcji układu sercowo-naczyniowego i OUN. Eksperymenty z selektywnymi agonistami α2A i myszami pozbawionymi α2A pokazują, że aktywacja α2A powoduje niedociśnienie, uspokojenie, analgezję i hipotermię (Kable i in., 2000). Preparaty błonowe α2B firmy Chemicon są surowymi preparatami błonowymi wykonanymi z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dlatego są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych agonistów i antagonistów α2B. Preparaty błonowe wykazują Kd 11,5 nM dla[3H]-Rauwolscine. Przy 15 nM[3H]-Rauwolscine, preparat błonowy α2B o objętości 5 µg/dołek zazwyczaj daje ponad 30-krotny stosunek sygnału do tła.
Pełnej długości ludzki transkrypt ADRA2B cDNA kodujący α2B.
Działania biochem./fizjol.
Protein Target: alpha2B
Jakość
Table 1. Signal:background and specific binding values obtained in a competition binding assay with α2B membrane prep and unlabeled rauwolscine.
SPECIFICATIONS: 1 unit = 5 µg
Bmax for [3H]-rauwolscine binding: 154 pmol/mg protein
Kd for [3H]-rauwolscine binding: ~11.5 nM
| 5 µg/well | |
|---|---|
| Signal:Background | 64.7 |
| Specific Binding (cpm) | 14646 |
SPECIFICATIONS: 1 unit = 5 µg
Bmax for [3H]-rauwolscine binding: 154 pmol/mg protein
Kd for [3H]-rauwolscine binding: ~11.5 nM
Charakterystyka techniczna
Warunki indukcji
Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym na niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 godz. Przed filtracją 96-dołkowa płytka zbiorcza FC (Millipore nr kat. MAHF C1H) jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 minut, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i przemywana 3 razy (1 ml na studzienkę na przemywanie) buforem do przemywania. Płytka jest suszona i liczona.
Bufor wiążący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 0,2% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Radioligand: [3H]-Rauwolscine (Perkin Elmer#: NET-722)
Bufor płuczący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 500 mM NaCl, 0,1% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym na niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 godz. Przed filtracją 96-dołkowa płytka zbiorcza FC (Millipore nr kat. MAHF C1H) jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 minut, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i przemywana 3 razy (1 ml na studzienkę na przemywanie) buforem do przemywania. Płytka jest suszona i liczona.
Bufor wiążący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 0,2% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Radioligand: [3H]-Rauwolscine (Perkin Elmer#: NET-722)
Bufor płuczący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 500 mM NaCl, 0,1% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Postać fizyczna
Jedno opakowanie zawiera membrany wystarczające na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jednostka to ilość membrany, która da ponad 20-krotny stosunek sygnału do tła ze znakowaną 3H rauwolsyną w stężeniu 15 nM.
Płyn w buforze opakowaniowym: 50 mM Tris pH 7,4, 10% glicerol i 1% BSA bez konserwantów.
Płyn w buforze opakowaniowym: 50 mM Tris pH 7,4, 10% glicerol i 1% BSA bez konserwantów.
Informacje prawne
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Kod klasy składowania
12 - Non Combustible Liquids
Klasa zagrożenia wodnego (WGK)
WGK 2
Temperatura zapłonu (°F)
Not applicable
Temperatura zapłonu (°C)
Not applicable
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
J W Kable et al.
The Journal of pharmacology and experimental therapeutics, 293(1), 1-7 (2000-03-29)
Mice with altered alpha(2)-adrenergic receptor genes have become important tools in elucidating the subtype-specific functions of the three alpha(2)-adrenergic receptor subtypes because of the lack of sufficiently subtype-selective pharmacological agents. Mice with a deletion (knockout) of the alpha(2A)-, alpha(2B)-, or
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej