HTS086M

Preparat błonowy ludzkiego receptora histaminowego_H2 ChemiSCREEN

Human H2 GPCR membrane preparation for Radioligand binding Assays & GTPγS binding.

• Kod UNSPSC: 41106514
• eCl@ss: 32161000
• NACRES: NA.81

Właściwości

• pochodzenie biologiczne: human
• Poziom jakości: 100
• rekombinowane: expressed in Chem-2 cells
• producent / nazwa handlowa: ChemiScreen; Chemicon^®
• metody: ligand binding assay: suitable (GTPγS); radioligand binding assay (RLBA): suitable
• numer dostępu NCBI: NM_022304.1
• numer dostępu UniProt: P25021
• Warunki transportu: dry ice

Opis

Opis ogólny

Pełnej długości ludzki HRH2 cDNA kodujący H2

Receptor histaminowy H2 jest szeroko rozpowszechnionym receptorem sprzężonym z białkiem G, który jest ważny w regulacji wielu działań fizjologicznych, od wydzielania kwasu żołądkowego po motorykę przewodu pokarmowego (Del Valle i Gantz, 1997). Aktywacja receptora za pośrednictwem histaminy prowadzi do sygnalizacji zarówno przez cyklazę adenylanową, jak i fosfoinozytyd / kinazę białkową C (Hill, 1990). Antagoniści tego receptora okazali się skuteczną terapią zaburzeń żołądkowo-jelitowych. Niektórzy antagoniści są stosowani w leczeniu chorób neuropsychiatrycznych i neurologicznych, np. schizofrenii, choroby Alzheimera i choroby Parkinsona. Preparaty błonowe H2 firmy Chemicon to surowe preparaty błonowe wykonane z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dzięki temu są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych agonistów i antagonistów H2. Preparaty błonowe wykazują Kd 0,8 nM dla [125I]-Iodoaminopotentydyny. Przy 0,65 nM [125I]-jodoaminopotentydyny, 10 µg/dołek preparatu membranowego H2 zazwyczaj daje ponad 7-krotny stosunek sygnału do tła.

Zastosowanie

Preparat błonowy ludzkiego H2 GPCR do testów wiązania radioligandów i wiązania GTPγS.

Działania biochem./fizjol.

Protein Target: H2

Jakość

Table 1. Signal:background and specific binding values obtained in a competition binding assay with H2 membrane prep and unlabeled tiotidine.

	10 µg/well
Signal:Background	11.68
Specific Binding (cpm)	4152

SPECIFICATIONS: 1 unit = 10 µg
Bmax for [125I] Iodoaminopotentidine binding: 0.46 pmol/mg protein
Kd for [125I] Iodoaminopotentidine binding: ~0.8 nM

Charakterystyka techniczna

Warunki indukcji
Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym na niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 godz. Przed filtracją 96-dołkowa płytka zbiorcza FC (Millipore nr kat. MAHF C1H) jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 minut, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i płukana 3 razy (1 ml na studzienkę na płukanie) buforem płuczącym. Płytka jest suszona i liczona.

Bufor wiążący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 0,2% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Radioligand: [125I] Jodoaminopotentydyna (Amersham#: IM264)
Bufor płuczący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 500 mM NaCl, 0,1% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.

Postać fizyczna

Jedno opakowanie zawiera membrany wystarczające na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jednostka to ilość membrany, która da ponad 7-krotny stosunek sygnału do tła ze znakowaną 125I jodoaminopotentydyną w stężeniu 0,65 nM.

Płyn w buforze opakowaniowym: 50 mM Tris pH 7,4, 10% glicerol i 1% BSA bez konserwantów.
Metoda pakowania: Białko błonowe dostosowano do 1 mg/ml w buforze opakowaniowym i dozowano w ilości 1 ml/fiolkę. Fiolki zostały szybko zamrożone i przechowywane w temperaturze -80oC.

Informacje prawne

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Kod klasy składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• Klasa zagrożenia wodnego (WGK): WGK 2
• Temperatura zapłonu (°F): Not applicable
• Temperatura zapłonu (°C): Not applicable