HTS050M
Przygotowanie membrany ChemiScreen H1
Human H1 GPCR membrane preparation for Radioligand binding Assays & GTPγS binding.
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
41106514
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.84
Polecane produkty
pochodzenie biologiczne
human
Poziom jakości
rekombinowane
expressed in Chem-3 cells
opakowanie
pkg of 2 mL
producent / nazwa handlowa
ChemiScreen
Chemicon®
stężenie
0.5 mg/mL
metody
ligand binding assay: suitable (GTPγS)
radioligand binding assay (RLBA): suitable
numer dostępu NCBI
numer dostępu UniProt
Warunki transportu
dry ice
Opis ogólny
Histamina wywiera swoje działanie biologiczne poprzez rodzinę czterech receptorów GPCR. Stymulacja receptora histaminowego H1 powoduje skurcz mięśni gładkich, indukuje przepuszczalność naczyń krwionośnych i stymuluje uwalnianie katecholamin z rdzenia nadnerczy. H1 jest również szeroko wyrażany w mózgu, a aktywacja H1 pobudza kilka typów neuronów poprzez blokowanie przewodnictwa potasowego (Hill i in., 1997).
Preparaty błonowe H1 firmy Chemicon są surowymi preparatami błonowymi wykonanymi z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dlatego są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych antagonistów interakcji H1 i jego ligandów. Preparaty błonowe wykazują Kd na poziomie 4,5 nM dla [3H]-piryloaminy. Przy stężeniu 3 nM[3H]-Pyrilaminy, preparaty membranowe H1 o stężeniu 5 mg/dobę i 10 mg/dobę zazwyczaj dają odpowiednio ponad 3- i 6-krotny stosunek sygnału do tła.
Preparaty błonowe H1 firmy Chemicon są surowymi preparatami błonowymi wykonanymi z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dlatego są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych antagonistów interakcji H1 i jego ligandów. Preparaty błonowe wykazują Kd na poziomie 4,5 nM dla [3H]-piryloaminy. Przy stężeniu 3 nM[3H]-Pyrilaminy, preparaty membranowe H1 o stężeniu 5 mg/dobę i 10 mg/dobę zazwyczaj dają odpowiednio ponad 3- i 6-krotny stosunek sygnału do tła.
Ludzki cDNA HRH1 o pełnej długości
Zastosowanie
Test wiązania radioligandu i wiązanie GTPγS.
Działania biochem./fizjol.
GPCR Class: A
Protein Target: H1
Target Sub-Family: Histamine
Jakość
Signal:background and specific binding values obtained in a competition binding assay with varying amounts of TP membrane prep:
SPECIFICATIONS: 1 unit = 10 µg for most lots. Specific activity (units/µg) may vary between lots.
Bmax: 8.3 pmol/mg
Kd: 4.5 nM
Note: Lot number MM1357015 contains 2 mL at 2 mg/mL, for which 1 unit = 20 µg
| 10 µg/well | |
|---|---|
| Signal:Background | 6.6 |
| Specific Binding (cpm) | 925 |
SPECIFICATIONS: 1 unit = 10 µg for most lots. Specific activity (units/µg) may vary between lots.
Bmax: 8.3 pmol/mg
Kd: 4.5 nM
Note: Lot number MM1357015 contains 2 mL at 2 mg/mL, for which 1 unit = 20 µg
Charakterystyka techniczna
Warunki indukcji
Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym na niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 h. Przed filtracją 96-dołkowa płytka filtracyjna GF/C jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 min, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i przemywana 3 razy (1 ml na studzienkę na przemywanie) buforem do przemywania. Płytka jest suszona i liczona.
Bufor wiążący: 50 mM Tris, pH 7,4, 10 mM MgCl2, 1 mM EDTA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Radioligand:[3H] Pyrilamine (Perkin Elmer#:NET594250UC )
Bufor płuczący: 50 mM Tris, pH 7,4, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Jedno opakowanie zawiera wystarczającą ilość membran na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jednostka to ilość membrany, która da ponad 3-krotny stosunek sygnału do tła ze znakowaną 3H piryloaminą przy 3 nM.
Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym na niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 h. Przed filtracją 96-dołkowa płytka filtracyjna GF/C jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 min, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i przemywana 3 razy (1 ml na studzienkę na przemywanie) buforem do przemywania. Płytka jest suszona i liczona.
Bufor wiążący: 50 mM Tris, pH 7,4, 10 mM MgCl2, 1 mM EDTA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Radioligand:[3H] Pyrilamine (Perkin Elmer#:NET594250UC )
Bufor płuczący: 50 mM Tris, pH 7,4, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Jedno opakowanie zawiera wystarczającą ilość membran na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jednostka to ilość membrany, która da ponad 3-krotny stosunek sygnału do tła ze znakowaną 3H piryloaminą przy 3 nM.
Postać fizyczna
Płyn w buforze opakowaniowym: 50 mM Tris pH 7,4, 10% glicerol i 1% BSA bez konserwantów. Metoda pakowania: Białko membranowe dostosowano do 0,5 mg/ml w 1 mL buforu do pakowania, szybko zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C.
Przechowywanie i stabilność
Przechowywać zamrożone w temperaturze -70°C przez okres do 2 lat. Nie zamrażać i nie rozmrażać.
Informacje prawne
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności
RESEARCH USE ONLY. This product is regulated in France when intended to be used for scientific purposes, including for import and export activities (Article L 1211-1 paragraph 2 of the Public Health Code). The purchaser (i.e. enduser) is required to obtain an import authorization from the France Ministry of Research referred in the Article L1245-5-1 II. of Public Health Code. By ordering this product, you are confirming that you have obtained the proper import authorization.
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Kod klasy składowania
12 - Non Combustible Liquids
Klasa zagrożenia wodnego (WGK)
WGK 2
Temperatura zapłonu (°F)
Not applicable
Temperatura zapłonu (°C)
Not applicable
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej