AB5719
Przeciwciało anty-KCa3.1
Chemicon®, from rabbit
Synonim(y):
Intermediate conductance Ca2+-activated K+ Channel 4, SK4, IKCa1, KCNN4
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Polecane produkty
pochodzenie biologiczne
rabbit
Poziom jakości
forma przeciwciała
affinity purified immunoglobulin
rodzaj przeciwciała
primary antibodies
klon
polyclonal
oczyszczone przez
affinity chromatography
reaktywność gatunkowa
human, mouse
producent / nazwa handlowa
Chemicon®
metody
western blot: suitable
numer dostępu NCBI
numer dostępu UniProt
Warunki transportu
wet ice
docelowa modyfikacja potranslacyjna
unmodified
informacje o genach
human ... KCNN4(3783)
Specyficzność
KCa3.1 (Kanał K+ aktywowany pośrednim przewodnictwem Ca2+4, IKCa1, SK4, KCNN4)
Immunogen
Syntetyczny peptyd z C-końcowego obszaru szczurzego KCa3.1 (przystąpienie Q9QYW1).
Zastosowanie
Western blot: 1:300 z użyciem ECL na komórkach KCa3.1 transfekowanych HEK-293 i K562.
Rozcieńczenia należy wykonywać przy użyciu białka nośnikowego, takiego jak BSA (1-3%)
Optymalne rozcieńczenia robocze muszą być określone przez użytkownika końcowego.
SUGEROWANY PROTOKÓŁ WESTERN BLOT
1. Wymieszać próbki (błony narządów: 50 μg/pas; transfekowane komórki: 500 000 komórek/pas) z buforem do próbek X 2 i ogrzewać przez 10 minut w temperaturze 70°C.
2. 5-50 μL nanieść na pas Minigel (szerokość 0,75-1,5 mm) i przeprowadzić w standardowych warunkach. (60 mA dla 2 żeli Minigel 1,5 mm, 1,4 h). Sugeruje się, aby uruchomić 5-15% akryloamid (37,5:1 akryloamid:bisakryloamid) minigel (szerokość 1,5 mm) przy 30 mA/żel ~1-1,5 godziny.
3. Transfer w systemie półsuchym w standardowych warunkach (3 h 100 mA dla dwóch żeli minigel).
4. Wybarwić przeniesione pasma za pomocą Chemicon BLOT-FastStain (numer katalogowy 2076).
5. Odbarwić za pomocą wody dejonizowanej. 6. Zablokować za pomocą 5% beztłuszczowego mleka (Marvel lub Carnation) w PBS i 0,025% azydku sodu, przez noc w temperaturze 2-8°C. Mleko beztłuszczowe powinno być świeżo rozpuszczone, odwirowane z prędkością 10 000 obrotów na minutę przez 10 minut i przefiltrowane przez filtr szklany (Gelman Acrodisc). 7.
7. Inkubacja z pierwszym przeciwciałem przez 2 godziny w temperaturze pokojowej lub przez noc w temperaturze 4°C w roztworze blokującym. Preparat przeciwciała należy odwirować przed użyciem (10 000 g 5 min.). Optymalne rozcieńczenia robocze i czas inkubacji muszą zostać określone przez użytkownika końcowego.
8. Płukać 4 x 10 min. za pomocą PBS-0,1% tween 20. Na tym etapie należy pominąć azydek.
9. Inkubacja z przeciwciałem drugorzędowym (kozie przeciwciało przeciwkrólicze sprzężone z HRP, na przykład Chemicon nr katalogowy AP132P, odpowiednio rozcieńczone) przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej.
10. Płukać 4 x 10 min. za pomocą PBS-0,1% tween 20.
11. Wykonać ECL przy użyciu komercyjnych zestawów (Chemilucent, numer katalogowy Chemicon 2600).
Rozcieńczenia należy wykonywać przy użyciu białka nośnikowego, takiego jak BSA (1-3%)
Optymalne rozcieńczenia robocze muszą być określone przez użytkownika końcowego.
SUGEROWANY PROTOKÓŁ WESTERN BLOT
1. Wymieszać próbki (błony narządów: 50 μg/pas; transfekowane komórki: 500 000 komórek/pas) z buforem do próbek X 2 i ogrzewać przez 10 minut w temperaturze 70°C.
2. 5-50 μL nanieść na pas Minigel (szerokość 0,75-1,5 mm) i przeprowadzić w standardowych warunkach. (60 mA dla 2 żeli Minigel 1,5 mm, 1,4 h). Sugeruje się, aby uruchomić 5-15% akryloamid (37,5:1 akryloamid:bisakryloamid) minigel (szerokość 1,5 mm) przy 30 mA/żel ~1-1,5 godziny.
3. Transfer w systemie półsuchym w standardowych warunkach (3 h 100 mA dla dwóch żeli minigel).
4. Wybarwić przeniesione pasma za pomocą Chemicon BLOT-FastStain (numer katalogowy 2076).
5. Odbarwić za pomocą wody dejonizowanej. 6. Zablokować za pomocą 5% beztłuszczowego mleka (Marvel lub Carnation) w PBS i 0,025% azydku sodu, przez noc w temperaturze 2-8°C. Mleko beztłuszczowe powinno być świeżo rozpuszczone, odwirowane z prędkością 10 000 obrotów na minutę przez 10 minut i przefiltrowane przez filtr szklany (Gelman Acrodisc). 7.
7. Inkubacja z pierwszym przeciwciałem przez 2 godziny w temperaturze pokojowej lub przez noc w temperaturze 4°C w roztworze blokującym. Preparat przeciwciała należy odwirować przed użyciem (10 000 g 5 min.). Optymalne rozcieńczenia robocze i czas inkubacji muszą zostać określone przez użytkownika końcowego.
8. Płukać 4 x 10 min. za pomocą PBS-0,1% tween 20. Na tym etapie należy pominąć azydek.
9. Inkubacja z przeciwciałem drugorzędowym (kozie przeciwciało przeciwkrólicze sprzężone z HRP, na przykład Chemicon nr katalogowy AP132P, odpowiednio rozcieńczone) przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej.
10. Płukać 4 x 10 min. za pomocą PBS-0,1% tween 20.
11. Wykonać ECL przy użyciu komercyjnych zestawów (Chemilucent, numer katalogowy Chemicon 2600).
Wykrywaj KCa3.1 przy użyciu tego przeciwciała Anti-KCa3.1 zatwierdzonego do stosowania w WB.
Research Category
Neuroscience
Neuroscience
Research Sub Category
Ion Channels & Transporters
Ion Channels & Transporters
Postać fizyczna
Immunoglobulina oczyszczona metodą powinowactwa. Liofilizowana z soli fizjologicznej buforowanej fosforanami, pH 7,4, zawierającej 1% BSA i 0,025% azydku sodu jako środka konserwującego. Rozpuścić w 50 μl sterylnej wody dejonizowanej. Przed użyciem odwirować preparat przeciwciała (10 000 xg przez 5 min).
Przechowywanie i stabilność
Przechowywać liofilizowany materiał w temperaturze -20°C przez okres do 12 miesięcy od daty otrzymania. Po rekonstytucji przechowywać w temperaturze -20°C w nierozcieńczonych podwielokrotnościach przez okres do 6 miesięcy. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania.
Komentarz do analizy
Kontrola
Do przeciwciała dołączono bezpłatnie 40 μg antygenu kontrolnego. Roztwór podstawowy antygenu można sporządzić przy użyciu 100 μl sterylnej wody destylowanej. W przypadku kontroli negatywnej należy wstępnie inkubować 2 μg peptydu z 1 μg przeciwciała przez godzinę w temperaturze pokojowej. Optymalne stężenia muszą zostać określone przez użytkownika końcowego.
Do przeciwciała dołączono bezpłatnie 40 μg antygenu kontrolnego. Roztwór podstawowy antygenu można sporządzić przy użyciu 100 μl sterylnej wody destylowanej. W przypadku kontroli negatywnej należy wstępnie inkubować 2 μg peptydu z 1 μg przeciwciała przez godzinę w temperaturze pokojowej. Optymalne stężenia muszą zostać określone przez użytkownika końcowego.
Inne uwagi
Stężenie: Stężenie specyficzne dla danej partii można znaleźć w certyfikacie analizy.
Informacje prawne
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Nie możesz znaleźć właściwego produktu?
Wypróbuj nasz Narzędzie selektora produktów.
Zwroty wskazujące rodzaj zagrożenia
Zwroty wskazujące środki ostrożności
Klasyfikacja zagrożeń
Aquatic Chronic 3
Kod klasy składowania
11 - Combustible Solids
Klasa zagrożenia wodnego (WGK)
WGK 3
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej