(ELISA) 효소 결합 면역 흡착 분석법
다중웰, 마이크로티터 플레이트에서 일반적으로 수행되는 ELISA는 펩타이드, 단백질 및 항체를 포함한 다양한 분자를 검출하고 정량화하기 위해 흔히 사용되는 분자생물학 분석법입니다. 이러한 분석법은 관심 있는 분자를 pg/mL 수준에서 검출할 수 있으며 기초 연구 및 질병 연구 애플리케이션 필요성을 위해 중요합니다.
ELISA 분석법: 항체-항원 상호작용
ELISA의 기본 분자 구성은 효소에 접합된 항체, 고정된 관심 있는 분자(들) 및 검출 기질을 일반적으로 포함합니다. ELISA로부터 획득한 데이터의 성공과 품질을 결정하는 중요한 관점은 항체-항원 상호작용의 친화성 및 특이성에 달려 있습니다. 항원-항체 상호작용은 pH, 온도 및 이온강도를 포함한 여러 요인에 영향을 받습니다.
ELISA 검출 형식
직접 검출법을 사용하는 ELISA는 분석 플레이트 표면에 직접 또는 포획 항체에 의해 간접적으로 결합한 고정된 항원, 효소에 접합된 항원- 특이적 일차 항체 그리고 검출 기질이 필요합니다. 보다 더 일반적으로 사용되는 간접 검출 형식은 비접합 일차 항체, 일차 항체의 검출에 특이적인 접합된 이차 항체 모두를 포함합니다. 간접 검출법은 접합된 효소 요소가 이차 항체에만 존재하므로 표적 항원과 함께 면역반응성이 증가하여 그 혜택을 봅니다. 직접 및 간접 검출법 이외에도, 포획 또는 “샌드위치” 분석법은 마이크로플레이트 표면에 먼저 부착되고, 이전에 설명한 간접법과 유사한 일차 및 효소-접합 이차 항체 모두를 사용하는 추가적인 항원 포획 항체를 사용합니다.
관련 기술 문서
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관련 프로토콜
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- Cell Proliferation ELISA, BrdU (colorimetric) Protocol & Troubleshooting
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- cAMP measurements are obtained using an ELISA assay (Harlow and Lane 1988). Commercial radio-immunoassays, or ELISA kits, to assay cAMP can be purchased from various manufacturers.
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