단백질 농축 및 완충액 교환
단백질 농축 및 완충액 교환은 단백질 및 항체 정제, 생물공정 및 단백질체 분석 작업공정에서 일반적으로 이용됩니다. 단백질, 효소, 항체 및 바이러스와 같은 거대분자 용액의 샘플 전처리는 다운스트림 공정 또는 검출에 호환되지 않는 다량의 희석된 단백질 및 기타 생물분자 완충액을 빈번히 생산합니다. 샘플 추출 이후, 희석된 단백질은 분석 또는 사용 이전에 농축 또는 정제되어야 할 필요가 빈번히 있습니다.
단백질 농축
단백질 농축을 위한 여러 방법이 있으며, 다공성 멤브레인 필터 여과법, 고장액 투석 그리고 침전/탈염을 포함합니다. 한외여과는 해당 단백질의 최소 변성, 비활성화 및 분해를 방지하도록 압력 또는 원심력 하에서 단백질을 농축하기 위해 반투과성 멤브레인을 활용하는 편리한 방법을 제공합니다. 이러한 기술을 이용하면 초과 유체는 필터를 투과하지만, 표적 단백질은 잔류하므로, 샘플 용적이 감소하여 단백질 농도는 증가합니다.
단백질 강화
단백질 강화에서는 생물학적 샘플에 있는 단백질의 특정군 또는 유형이 추가적인 분석을 위해 농축됩니다. 단백질 강화법은 함량이 적은 단백질을 분리하여 샘플의 복잡성을 줄입니다. 강화법은 하류 단백질체 분석 향상을 위해 표적 단백질을 분리하여 농축합니다. 한외여과는 분자량을 기반으로 단백질 계열을 분리하기 위한 단백질 강화에 자주 이용됩니다.
완충액 교환 및 탈염
정제된 단백질은 추가적인 분석을 위해 적절한 완충액으로 이전되어야 합니다. 완충액 교환, 탈염 및 세제 제거는 다음과 같은 방법으로 달성할 수 있습니다.
- 투석: 염, 세제, 용매 및 기타 불순물과 같은 소형의 투과성 분자는 멤브레인을 투과하는 능력에 따라서 제거됩니다.
- 컬럼 크로마토그래피: 염류는 분리를 위한 크기 배제에 의존하는 젤 여과 컬럼을 활용하여 제거됩니다.
- 정용여과: 염류, 세제 및 기타 불순물은 압력 또는 원심력 하에서 다공성 한외여과 멤브레인을 사용하여 분자 크기에 따라 제거됩니다.
관련 기술 문서
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