단백질 표지법 및 변형
단백질은 폴리펩타이드 사슬로 구성되어 있으며 생물학적 기능은 정확한 접힘, 크기 및 폴리펩타이드 사슬에 있는 반응성 작용기의 수에 의해 부분적으로 결정됩니다. 부위에 특정한 단백질 변형 능력은 광범위한 특성 및 전체적인 생물학적 기능을 조사할 능력을 과학자들에게 제공합니다. 단백질 표지법 및 변형 기술은 전체적인 단백질 구조 및 생물학적 기능을 조사하기 위해 단백질-단백질 상호작용, 단백질 접힘을 검사하는 형광체, 바이오틴 그리고 기타 소분자를 포함합니다.
형광 단백질 표지법
녹색형광 단백질(GFP)의 발견 및 광범위한 사용은 이러한 기술의 우수한 사례입니다. GFP 및 상응 분자는 여러 분야의 연구 및 생물학적 공정에 대한 우리의 이해에 커다란 영향을 주었습니다. 예를 들면, 항체에 형광 태그의 결합으로 조직에서 고도로 특이적인 단백질 복합체의 검출 및 정량화 또는 ELISA 및 웨스턴 블롯 애플리케이션을 위한 항체-단백질 복합체의 방향성 고정이 가능해졌습니다. 그러나, GFP 사용의 커다란 단점은 이러한 크기의 추가적인 단백질 태그 결합으로 단백질 기능이 방해받을 수 있다는 것입니다. 이러한 어려움을 극복하기 위해, 과학자들은 GFP, 바이오틴에 비해 소형인 형광 태그를 사용하거나 이중직교 기능성을 포함하는 비천연적 아미노산을 결합합니다.
효소-단백질 접합
고유한 효소 또는 프로브의 통합은 단백질을 표지하려는 과학자들이 사용하는 다른 방법입니다. 일반적으로 이용되는 효소-단백질 접합은 알칼리인산분해효소(AP) 및 양고추냉이과산화효소(HRP)를 포함합니다. 신호 증폭, 다양한 신호 출력을 허용하고 각 효소를 위한 여러 기질이 있어, 효소-단백질 표지 기술 사용에는 수많은 장점이 있습니다. 일반적인 신호 출력에는 형광, 화학발광 또는 발색 검출을 포함합니다. 이러한 신호 출력의 다양성으로 세포 및 조직에서 면역조직화학(IHC) 또는 면역형광(IF) 기반 검출 애플리케이션에 적절합니다.
신규 단백질 표지 기술
질병 연구 및 약물 발견의 분야에서, 신규 약물 표적 및 잠재적인 치료요법을 식별하려는 과학자들이 표적 단백질 분해 기술을 집중적으로 연구합니다. 단백질-표적 키메라 기술은 한쪽은 표적 질환 단백질에 결합하고 다른 한쪽은 E3 연결효소에 결합하여 세포에서 해당 단백질을 제거하도록 디자인된 이작용성 분자를 활용합니다. 광범위한 질병 표적에 대한 이러한 분자의 통합된 특이성 및 내부 세포 단백질 분해 시스템을 사용하는 단백질 분해를 위한 표적 능력때문에 질병 연구를 위한 강력한 단백질 표지법 기술입니다.
관련 기술 문서
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- Peptide Modifications: N-Terminal, Internal, and C-Terminal
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관련 프로토콜
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