유세포 분석
유세포 분석은 단일 또는 다중 레이저를 사용하여 단일 세포의 다중 파라미터 분석을 하는 기법입니다. 각 세포 또는 입자는 각 레이저가 세포를 빠르게 통과할 때 가시광선 산란 또는 형광에 의해 분석됩니다. 빛 산란 분석과는 독립적으로 형광 측정은 일반적인 형광 단백질 (예: 녹색 형광 단백질, GFP)의 전사 및 발현, 그리고 형광으로 표지된 항체나 형광 염료로 염색하는 것을 통해 이루어집니다. 유세포 분석은 면역학, 암 생물학, 질병 연구를 포함한 분자 및 세포생물학 연구 응용분야에서 일반적으로 사용되는 강력한 기술입니다.
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유세포 분석 항체 및 라벨
유세포 분석을 수행하기 위해서는 다양한 유세포 분석 항체와 표지를 사용해야 합니다. 유세포 분석 항체는 특정한 세포 표지에 특이적으로 결합하여 세포 유형을 특징화하고 실험의 일환으로 단백질 발현의 변화를 평가하는 데 사용됩니다. 실험 디자인에 따라 핵산 염료, 세포 생존성 염료, 고분자 염료, 퀀텀 도트, 소규모 유기 분자 및 형광 단백질과 같은 다양한 유형의 표지가 사용될 수 있으며, 이러한 표지들은 유세포 분석기에서 항체를 시각화하고 감지하기 위해 사용됩니다. 항체는 일반적으로 직접 결합(상업적으로 구매 가능한 제품이나 결합 키트를 통해 최종 사용자가 반응을 수행할 수 있도록 함) 또는 이차 항체를 사용하여 표지가 부착됩니다. 새로운 독점적인 유세포 분석 기술은 최종 사용자가 독립적으로 선택한 항체와 염료를 유연하게 혼합하고 매칭하여 어떤 조합이든 조립할 수 있게 해줍니다. 이 과정에서 결합 키트나 이차 항체를 사용하지 않아도 됩니다.
유세포 분석 응용분야
다양한 연구 분야에서 유세포 분석을 사용하며 종종 다양한 세포 집단 내에서 여러 매개변수를 분석합니다. 일반적인 분자 생물학 응용분야에는 다양한 세포 유형에서 유도된 발현을 가진 재조합 형광 단백질의 분석이 포함되며, 이를 통해 유전자 기능을 밝히거나 in vivo세포 추적을 할 수 있습니다. DNA 염색은 세포 주기 분석을 가능하게 하지만, 항체의 사용은 신호 전달, RNA 및 단백질 발현을 포함한 다양한 분석을 수행할 수 있게 합니다. 그러나 면역형광형질분석(immunophenotyping)은 유세포 분석에서 가장 일반적으로 사용되는 응용분야 중 하나입니다. 면역형광형질분석(immunophenotyping)을 통해 형광결합 항체는 다수의 세포 표면 항원을 표적으로 삼아 세포 집단 내에서 특정한 면역 세포를 식별합니다.
유세포 분석 데이터 분석
유세포 분석 데이터 분석은 종종 특정한 세포 영역이나 군집을 식별하고 실험 내에서 추가적인 매개변수를 적용하는 작업을 포함합니다. 또한 추가적인 세포 식별 요소가 있는지 조사하여 세포의 정체성에 대한 더 깊은 통찰력을 얻는 것도 포함됩니다. 이러한 종류의 데이터 분석 및 기타 세포주기 분석을 용이하게 하기 위해 수많은 컴퓨터 소프트웨어 프로그램을 사용할 수 있습니다.
유세포 분석 기기
유세포 분석에 사용되는 주요 구성 요소에는 전자 부품, 광학 부품, 유체가 포함됩니다. 유체는 액체 전달 시스템 역할을 하며, 샘플을 투과 광학 부품으로 안내합니다. 이 광학 부품에는 excitation 광학 (레이저)과 광전 다이오드 및 광증배관 (PMT)으로 이루어진 수집 광학이 포함됩니다. 중요한 점은 전자 부품이 감지기에서 수집한 정보를 디지털 신호로 변환하여 컴퓨터가 해석할 수 있는 형태로 만든다는 것입니다. 추가 시스템의 조합은 샘플을 정제하고 수집하는 세포분리기와 유세포 분석과 형광 현미경을 결합한 이미징 세포측정기와 같은 더 진보된 샘플 분석을 용이하게 합니다.
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