微生物細胞培養

分子生物学では、クローニングおよび組換えタンパク質の発現のために微生物の細胞培養が使用されています。また臨床用途としても、病原性の微生物を分離、検出および同定するために使用されます。微生物培養によって、細胞は管理された試験室条件下で増殖・分裂できます。細菌および他の微生物も、混入汚染を防ぐ無菌技術を用いて、培養液または固形の栄養寒天培地で増殖させることができます。

クローニングおよび組換えタンパク質の発現

細菌培養は、組換えタンパク質の発現、プラスミドのクローニングおよび増幅、そして細菌人工染色体（BAC）やコスミドクローニングのために使用されます。細菌細胞は、外来性の遺伝子およびプラスミドを取り込んで組み入れる形質転換によって、変化させることができます。一般に、化学的に処理した形質転換受容性細胞（コンピテントセル）は、エレクトロポレーションまたはヒートショックによって形質転換します。

その後、組換えプラスミドDNAによって獲得した後天性の抗生物質耐性に基づき、またはマーカーとしてβ-ガラクトシダーゼを発現する組換え細菌を識別する「ブルー・ホワイト」セレクションを用いて、形質転換させた細菌を識別・選択します。酵母もまた、酵母ツーハイブリッド法やレポーター遺伝子アッセイのため、エレクトロポレーションやその他の方法を用いて形質転換させ、タンパク質の発現およびタンパク質間の相互作用の研究に使用できます。

微生物の分離・同定用の培養

微生物培養は、感染症の原因となる細菌や他の微生物の分離、検出および鑑別において、医学的に重要です。培養法を用いた特性化および同定は、微生物の表現型と遺伝子型の両方に依存します。プレートに線条接種して細胞を分離することで、純粋なコロニーを作成できます。選択培地を用いて特定の微生物群の増殖を阻害し、それ以外の増殖を可能にします。鑑別用培地には、代謝や溶血活性の差による微生物コロニーの外観または周囲の培地におきる変化を視覚的に識別できる成分が含まれています。これらの培地は差別化と排除によって、細菌や他の微生物の同定に役立ちます。

関連技術資料

• 微生物培地の基礎
  微生物培地の種類、使用法および用途のご紹介組成および製品の選択ガイドを含みます。
• Antifoams
  Antifoams are supplied as two basic types of composition or mixtures of the two. Organic antifoams are of synthetic origin. Silicone-based antifoams are generally considered to be siloxane polymers and are also synthetic.
• Streptococci - Overview of Detection, Identification, Differentiation and Cultivation Techniques
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• Virus Cultivation
  Cell lines for vaccine production and cultivation of SARS CoV-2 and other viruses. Primary, human diploid, and continuous culture cell lines for the propagation of viruses and virus-based vaccines.
• Yeast
  Yeast is one of the most important microorganisms known and utilised by mankind. Ancient Middle Eastern civilisations used the organism to bake bread and to produce mead, beer and wine.
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関連プロトコル

• 酵母形質転換のプロトコル
  酵母は成長が速く、細胞が分散しているため、真核生物の研究に適したモデル生物と考えられています。
• Competent Cell Protocols
  Technical Article on competent cells. Transformation is a process by which some bacteria take up foreign genetic material (naked DNA) from the environment.
• Initiating a Starter Culture
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• Microbial Growth Protocols
  General protocols for growth of competent cells in microbial medium.
• Yeast Transformation Kit
  The selection of plasmids in yeast is based on the use of auxotrophic mutant strains, which cannot grow without a specific medium component (an amino acid, purine, or pyrimidine)
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