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グレード
for molecular biology
品質水準
形状
liquid
使用法
kit sufficient for 50 ligation reactions
テクニック
molecular cloning: suitable
輸送温度
dry ice
保管温度
−70°C
詳細
Sigma′s DNA Ligation Kit contains all of the reagents necessary to perform DNA ligation reactions at room temperature using blunt or sticky ends. This kit replaces previous workflows requiring cooking steps and long incubations. Pre-made buffers allow for fast & easy setup.
アプリケーション
QuickLink™ DNA Ligation Kit has been used for the ligation of pGL2-basic luciferase-reporter plasmid with vascular endothelial growth factor (VEGF) promoter sequence and for the ligation of NLR family caspase activating and recruitment domain (CARD)-containing protein 4 (Nlrc4) promoter with the luciferase plasmid vector pGL4.10-luc2
The QuickLink™ DNA Ligation Kit is suitable for:
- Joining blunt or cohesive-end fragments of DNA into a cloning vector
- Recircularization of linear DNA
- Formation of concatamers
- dsDNA nick repair
特徴および利点
- わずか5分でライゲ-ションします。
- 室温で操作可能、冷却装置は不要です。
- 高いライゲ-ション効率(ライゲ-ション産物を有する形質転換コロニ-数で測定)。
- 制限酵素処理したインサ-トやPCR産物の、平滑末端・突出末端へのライゲ-ションに最適化されています。
- ライゲ-ション反応液から直接、細菌の形質転換が行えます。
- プラスミド・ファ-ジにおけるクロ-ニング、リンカ-(アダプタ-)付加、直鎖状DNAの再環状化、コンカテマ-化に適しています。
構成
Sufficient for 50 reactions:
- 500uL 2X Ligation Buffer A (L9537)
- 100uL 5X Ligation Buffer B (L9662)
- 250 units T4 DNA Ligase (D2886) in 50% glycerol with 10 mM Tris-HCl (pH 7.5) 50 mM KCl, and 1 mM DTT
原理
One of the most important steps in the cloning process is the ligation of linear DNA into a cloning vector. DNA ligations are performed by incubating DNA fragments with appropriately linearized cloning vectors in the presence of buffer, ATP, and DNA ligase. Many parameters affect ligations such as the relative ratio of insert to vector, the quality and type of the DNA ends, the temperature of ligation and the concentration of DNA.
法的情報
QuickLink is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
関連製品
製品番号
詳細
価格
保管分類コード
10 - Combustible liquids
引火点(°F)
Not applicable
引火点(℃)
Not applicable
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
毒物及び劇物取締法
キットコンポーネントの情報を参照してください
PRTR
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消防法
キットコンポーネントの情報を参照してください
労働安全衛生法名称等を表示すべき危険物及び有害物
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労働安全衛生法名称等を通知すべき危険物及び有害物
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カルタヘナ法
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Jan Code
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試験成績書（COA）
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書（COA） を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
I R Lehman
Science (New York, N.Y.), 186(4166), 790-797 (1974-11-29)
DNA ligase of E. coli is a polypeptide of molecular weight 75,000. The comparable T4-induced enzyme is somewhat smaller (63,000 to 68,000). Both enzymes catalyze the synthesis of phosphodiester bonds between adjacent 5'-phosphoryl and 3'-hydroxyl groups in nicked duplex DNA
Sambrook, J., et al.
Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 5-5 (1989)
ErbB2 overexpression in mammary cells upregulates VEGF through the core promoter
Loureiro RMB, et al.
Biochemical and Biophysical Research Communications, 326(2), 455-465 (2005)
K Hayashi et al.
Nucleic acids research, 14(19), 7617-7631 (1986-10-10)
Polyethylene glycol (PEG) stimulates ligation with T4 DNA ligase. In 10% (w/v) PEG 6,000 solutions, only intermolecular ligation is enhanced by monovalent cations, while both inter- and intramolecular ligation occur without their presence. Similar stimulation was also caused by divalent
R Rossi et al.
Nucleic acids research, 25(11), 2106-2113 (1997-06-01)
ATP-dependent DNA ligases are essential enzymes in both DNA replication and DNA repair processes. Here we report a functional characterization of the T4 DNA ligase. One N-terminal and two C-terminal deletion mutants were expressed in Escherichia coli as histidine- tagged
プロトコル
T4 DNA ligase is used for the joining of DNA molecules with compatible cohesive (sticky) termini, joining of blunt ended double stranded DNA molecules
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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