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Merck

ROAPRO

Roche

アプロチニン

from bovine lung

別名:

アプロチニン, トリプシン - カリクレインインヒビター, トリプシン阻害剤、膵型(bpti), 膵臓トリプシンインヒビター

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About This Item

UNSPSCコード:
12352204

由来生物

bovine lung

品質水準

形状

lyophilized

包装

pkg of 10 mg (10236624001)
pkg of 100 mg (11583794001)
pkg of 50 mg (10981532001)

メーカー/製品名

Roche

テクニック

electrophoresis: suitable
tissue culture: suitable

pH範囲

3-10

溶解性

water: soluble 10 mg/mL

吸収

0.84 at 280 nm

輸送温度

wet ice

保管温度

2-8°C

詳細

ウシ肺に由来する膵型トリプシンの阻害剤。膵臓トリプシン阻害剤(BPTI)として知られています。 膵臓トリプシン阻害剤およびトリプシン-カリクレイン阻害剤としても知られるアプロチニンは、肺、脾臓、肝臓、および膵臓での発現が認められています。また、仔ウシ血清中に遊離型で存在することも分かっています。

特異性

アプロチニンはセリンプロテアーゼを阻害します。カリジンやブラジキニンなどの血圧降下ペプチドを分解、遊離するプロテアーゼであるカリクレインを阻害します (ヒト血漿カリクレイン: Ki = 3 × 10-8 M、pH 8.0、ブタ膵臓カリクレイン: Ki = 1 × 10-9 M、pH 8.0)、トリプシン (Ki = 2.8 × 10-11 M、pH 7.8, Ki = 2.6 × 10-9 M、pH 4.0、非競争的)、トリプシノーゲン、キモトリプシン (Ki = 9 × 10-9 M、pH 8.0)、細菌フィブリノリジン、プラスミン(Ki = 1 nM、pH 7.3)。
カテプシンG、アクロシン、ヒト白血球エラスターゼ、およびヒトウロキナーゼは弱く阻害されます。Xa因子、トロンビン、スブチリシン、パパイン、ペプシン、アンジオテンシン変換酵素(ACE)、カルボキシペプチダーゼAおよびB、その他のメタロプロテアーゼ、およびチオールプロテアーゼは阻害されません。

アプリケーション

アプロチニンは、分離/精製中のタンパク質と酵素の保護に使用されます。プロテアーゼ活性を阻害することで、細胞および組織の培養研究における細胞の寿命を延ばします。
  • さらなる用途:固定化アプロチニンによるウロキナーゼ、トリプシン、キモトリプシンの精製
  • エステラーゼとプロテアーゼの混合物中でのカリクレイン活性の定量化
  • 非特異的タンパク質分解を回避することによる臨床化学試験における制御された基質分解
  • タンパク質の折りたたみに関する研究におけるモデルタンパク質としてのアプロチニン
  • SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動での分子量マーカー

シーケンス

3つのジスルフィド結合により高次構造が保持された58個のアミノ酸から構成される単量体ペプチド。

単位の定義

阻害剤1単位(IU)は、pH 6で<10分間に1 Uのトリプシンを完全に阻害するアプロチニンの量として定義されます(トリプシン活性は、+25°C、pH 8.0、BAEEを基質として測定)。
阻害剤1単位ユニット(IU)(+25°C、BAEEを基質とする)は阻害剤約2.8ユニット(+25°C、Chromozym TRYを基質とする)に相当します。
阻害剤1単位(IU)(+25°C、BAEEを基質とする)は、カリクレイン阻害剤約26単位(KIU)(+25°C)に相当します。
阻害剤1単位(IU)(+25°C、BAEEを基質とする)は阻害剤約0.067単位(+25°C;Bz-D、L-Arg-4-Naを基質としたpH 7.8でのトリプシン測定)に相当します。
カリクレイン阻害剤1単位 = 0.17 μgの結晶アプロチニン。

調製ノート

作業濃度:0.06~2 μg/mL (0.01~0.3 μM)
作業溶液:水(10 mg/mL)または緩衝水溶液(例えば、0.1 M Tris、pH 8.0)に可溶。
注:負に帯電した固相(例えば、クロマトグラフィーゲル、限外ろ過膜)へのアプロチニンの吸着を回避するには、NaCl濃度を0.1 M超とするか、分離中に使用するすべてのバッファーに他の適切な塩を添加する必要があります。
保管条件(作業溶液):-15〜-25°C

再構成

水(10 mg/mL)または緩衝水溶液(例えば、Tris、0.1 M、pH 8.0)に溶解しやすいです。pH 7〜8に調整された溶液は、2〜8°Cで約1週間安定です。
-15〜-25°Cで保管されたアリコートは、約6か月間安定です。
注:凍結と解凍を繰り返したり、強アルカリ性溶液(pH > 12.8で不活性)に暴露しないでください。

その他情報

生命科学研究専用です。診断手順には使用しません。

保管分類コード

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

引火点(°F)

Not applicable

引火点(℃)

Not applicable


試験成績書(COA)

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[EXPERIMENTS ON THE ISOLATION OF THE KALLIKREIN INACTIVATOR. V. THE ISOLATION OF A KALLIKREIN INACTIVATOR FROM THE BOVINE LUNG AND ITS IDENTIFICATION WITH THE INHIBITOR FROM THE BOVINE PAROTID GLAND].
H KRAUT et al.
Hoppe-Seyler's Zeitschrift fur physiologische Chemie, 338, 231-237 (1964-01-01)
Kamlesh Shroff et al.
Langmuir : the ACS journal of surfaces and colloids, 28(3), 1858-1865 (2011-12-14)
In recent years, a variety of biomimetic constructs have emerged which mimic the bioactive sequences found in the natural extracellular matrix (ECM) proteins such as fibronectin (FN) that promote cell adhesion as well as proliferation on artificially functionalized interfaces. Much
Glucose Starvation Increases V-ATPase Assembly and Activity in Mammalian Cells through AMP
Kinase and Phosphatidylinositide 3-Kinase/Akt Signaling
Christina M. McGuire and Michael Forgac
The Journal of Biological Chemistry (2018)
Selecting protein N-terminal peptides by combined
fractional diagonal chromatography
An S, et al.
Nature Protocols (2011)
H Fritz et al.
Hoppe-Seyler's Zeitschrift fur physiologische Chemie, 360(3), 437-444 (1979-03-01)
Using the indirect immunofluorescence technique, the basic kallikrein-trypsin inhibitor of bovine organs, Trasylol, could be localized in tissue mast cells of bovine lung, liver, pancreas and parotid gland. Identification of cells exhibiting specific fluorescence as tissue mast cells was achieved

ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.

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