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Merck
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主要文書

安全性情報

ECM600

Sigma-Aldrich

uPA活性アッセイキット

The uPA Activity Assay Kit provides a quick, efficient & sensitive system for evaluation of uPA activity & for screening of uPA inhibitors.

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About This Item

UNSPSCコード:
12161503
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.84

品質水準

比活性

100000 units/mg protein

交差性

human

包装

pkg of ~10 μg standard

メーカー/製品名

Chemicon®

テクニック

activity assay: suitable

NCBIアクセッション番号

UniProtアクセッション番号

検出方法

colorimetric

輸送温度

dry ice

遺伝子情報

human ... PLAU(5328)

詳細

ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子(uPA)は、52 kDaのセリンプロテアーゼで、組織リモデリング1、血管新生2、線維素溶解、腫瘍の広がりなど、多くの生理学的・病理学的プロセスに関係しています。 uPAは、細胞表面受容体に結合すると、単鎖プロフォームuPAから活性型2鎖HMW-uPAに変換されます。 uPAは、プラスミノーゲンおよびマトリックスメタロプロテアーゼの活性化を伴うカスケードを介して、基底膜分解に役割を果たすことが示されています3。 uPAの阻害薬は、原発性腫瘍の成長と転移を遅らせることが示されています4-7。

CHEMICON uPA活性アッセイキットは、uPA活性評価のためおよびuPA阻害薬のスクリーニングのための、迅速で効率の良い高感度なシステムとなります。 このアッセイは比色法であり、放射能または蛍光装置は必要ありません。 このアッセイは、0.05~50単位のuPA活性の範囲で高感度です。

原理:

CHEMICON uPA活性アッセイキットは、活性化uPAによって切断される発色基質を使用します。 uPAを含むサンプルにこの基質を加えると、405 nmの光学密度(OD405)で検出可能な有色生成物が生成されます。

用途:

CHEMICON uPAアッセイキットは、精製産物や細胞培養物、および敗血症などの病的状態の血清中のuPA活性の測定に最適です。 このアッセイは、uPAの酵素活性の阻害剤のスクリーニングにも役立ちます。

各CHEMICON uPA活性アッセイキットには、ポジティブコントロールとしてのヒト尿のuPAを含めて、96サンプルの評価に十分な試薬が含まれています。 デュプリケートまたはトリプリケートで試験することをお勧めします。

CHEMICON uPA活性アッセイキットは、研究用途のみを意図しており、診断用途や治療用途には使用できません。

アプリケーション

uPA活性アッセイのサンプル調製の注意点



血漿: 10分以上安静にした後、うっ血は最小限にして、肘脈の静脈穿刺を行います。 最初の数ミリリットルの血液は廃棄します。 ポリカーボネートチューブに、0.11 mol/Lの冷クエン酸ナトリウム1容量に対して9容量の割合で血液を採取し、穏やかに混ぜて氷上に置きます。 次に、冷却遠心機で遠心分離し(30 分、2000g)、乏血小板血漿を調製します。 0.3 mL~0.6 mLの血漿サンプルを瞬間凍結し、-60℃で保存します。使用前に、37℃の湯浴で血漿を急速解凍し、氷上に置きます。



組織: 組織からのuPAの抽出については多数の文献が報告されています。 膜画分からのuPAの抽出に適したバッファーには、Triton X100が必要です。 非界面活性剤抽出物(細胞質画分とも呼ばれる)にはTritonは不要ですが、膜画分は超遠心分離によって除去されるため、膜画分に関連するuPA活性は、細胞質のみを測定することで回避できます。uPAの抽出手順を説明した参考文献については、査読済み論文を参照してください。

細胞培養: 細胞培養上清を分離し、直接使用します。
研究のカテゴリー
細胞構造

構成

uPAポジティブコントロール:(Part No. 90058)1000単位のヒト尿のuPAを凍結乾燥したバイアル1本。

発色基質:(Part No. 90057)pNA基を含むトリペプチド5 mgのボトル1本。

アッセイバッファー10X:(Part No. 90091)5 mLボトル1本。

単位の定義

感度:1単位は、Johnsonらの線溶法により試験された国際標準に相当する酵素量と定義されています {Johnson, A.J., et al. 1969.Thromb.Diath.Haemorrh.21, 259.}

保管および安定性

キットは、-20℃で最長6カ月保存できます。 溶解後、uPAポジティブコントロールは-70℃で、基質は2~8℃で保存してください。

法的情報

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免責事項

メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。

ピクトグラム

Health hazard

シグナルワード

Danger

危険有害性情報

注意書き

危険有害性の分類

Resp. Sens. 1

保管分類コード

10 - Combustible liquids


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

毒物及び劇物取締法

キットコンポーネントの情報を参照してください

PRTR

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消防法

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労働安全衛生法名称等を表示すべき危険物及び有害物

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労働安全衛生法名称等を通知すべき危険物及び有害物

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カルタヘナ法

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Jan Code

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