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Purificazione mediante FLAG®

I tag FLAG® consentono una migliore rivelazione e una purificazione robusta di proteine di fusione ricombinanti, con comprovata utilità in numerose applicazioni a valle, dai saggi di legame e di attività all'analisi strutturale. L’epitopo FLAG® è un peptide corto, idrofilo, di otto amminoacidi (tag DYKDDDDK) facilmente scindibile dall'enterochinasi (EK). A causa delle sue piccole dimensioni e della sua natura idrofila, il tag FLAG® è generalmente localizzato sulla superficie della proteina di fusione, riducendo al minimo gli effetti sulla sua funzione, la secrezione o il trasporto. Qualunque sia l'applicazione finale, forniamo gli strumenti necessari per esprimere, purificare e rivelare le proteine di fusione FLAG®.

Espressione di proteine con tag FLAG®

Purificazione di proteine con tag FLAG®

Rilevazione del tag FLAG®

Il nostro portafoglio per l’espressione di proteine con tag FLAG® include i vettori per un'efficiente espressione di proteine di fusione ricombinanti in sistemi batterici e di mammifero. La tecnologia SnapFast™vector consente di spostare facilmente il gene di interesse da un vettore all'altro, per un clonaggio più efficiente ed economico.

  • Il peptide FLAG® (sequenza: DYKDDDDK) è un piccolo tag che può essere incorporato con minimi rischi di ingombro sterico o di effetti negativi sulla solubilità delle proteine
  • La sequenza tag 3xFLAG® fonde tre epitopi FLAG® in tandem, per una rivelazione potenziata (fino a 200X) delle proteine​di fusione

Offriamo una varietà di gel di agarosio per la purificazione mediante affinità, microsfere magnetiche, kit di purificazione e piastre rivestite per l'isolamento e la purificazione delle proteine con tag FLAG®.

  • I gel di agarosio per separazione mediante affinità consentono la purificazione delle proteine con tag di fusione utilizzando anticorpi anti-FLAG® immobilizzati alle sferette di agarosio e sono adatti alla purificazione su piccola e grande scala. Queste resine sono adatte per la purificazione in colonna con flusso per gravità.
  • Le sferette magnetiche Anti-FLAG® M2permettono di purificare la proteina ricombinante con il tag utilizzando un rack magnetico o una piattaforma che separa le sferette e isola la proteina per il successivo, rapido processamento.
  • Le piastre da 96 pozzetti rivestite con Anti-FLAG®M2 High Sensitivity sono adatte per screening di espressione, studi di interazioni proteina-proteina e test ELISA.

I tag FLAG® e 3xFLAG™ presentano dei siti di legame per gli anticorpi monoclonali anti-FLAG® altamente specifici, ma anche per anticorpi policlonali e coniugati idonei per saggi ELISA, applicazioni di blotting, immunofluorescenza, immunocitochimica, immunoistochimica (IHC), blotting e citometria a flusso.

  • L’anticorpo anti FLAG®M2 si lega a proteine di fusione con FLAG® N-terminale, FLAG® C-terminale e Met-FLAG®.
  • Il legame dell’anticorpo anti-FLAG®M1 è calcio-dipendente e specifico per il tag FLAG® in posizione N-terminale.
  • L’anticorpo anti-FLAG® M5 lega le proteine di fusione con FLAG® e Met-FLAG® N-terminale.

Non sei sicuro di quale anticorpo per FLAG® scegliere? Consulta la nostraguida alla scelta degli anticorpi anti FLAG® e le caratteristiche di binding degli anticorpi anti FLAG®.

Risorse sui prodotti

Brochure: Refine Protein Preparation
Manuale d’uso: FLAG - Proven System for Detection and Purification of Proteins
Bollettino applicativo: EZviewTM Red Protein A and ANTI-FLAG® M2 Affinity Gels - Immunoprecipitation with Enhanced Visibility Affinity Beads

Guida alla scelta degli anticorpi anti FLAG®

*IP=immunoprecipitazione; IC=immunochimica, WB=Western blot, EIA=saggio di immunoadsorbimento enzimatico (ELISA)

Caratteristiche di legame dell'anticorpo anti FLAG®

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