T7168

Tripsina

tablet, 1 mg tablet

• Numero CAS: 9002-07-7
• Classificazione EC (Enzyme Commission): 3.4.21.4 (BRENDA, IUBMB)
• Numero MDL: MFCD00082094
• Codice UNSPSC: 12352204
• NACRES: NA.54

Proprietà

• Origine biologica: Porcine pancreas
• Livello qualitativo: 200
• Stato: tablet
• Attività specifica: 90-110% (compared to standard)
• PM: 23.8 kDa
• Temperatura di conservazione: −20°C

Descrizione

Descrizione generale

Trypsin consists of a single chain polypeptide of 223 amino acid residues, produced by the removal of the N-terminal hexapeptide from trypsinogen which is cleaved at the Lys - lle peptide bond. The sequence of amino acids is cross-linked by 6 disulfide bridges. This is the native form of trypsin, beta-trypsin. BETA-trypsin can be autolyzed, cleaving at the Lys - Ser residue, to produce alpha-trypsin. Trypsin is a member of the serine protease family.

Applicazioni

Per la digestione dei peptidi con tripsina, utilizzare un rapporto di circa 1:100-1:20 tra tripsina e peptide. L′uso tipico di questo prodotto è nella rimozione delle cellule aderenti dalla superficie di una coltura. La concentrazione di tripsina necessaria ad allontanare le cellule dal loro substrato dipende in primo luogo dal tipo cellulare e dall′età della coltura. Le tripsine sono state usate anche per risospendere le cellule durante la coltura, nella ricerca proteomica per la digestione delle proteine e in diverse digestioni tramite gel†. Ulteriori applicazioni includono la valutazione della cristallizzazione per mezzo di tecniche basate sulle membrane e in uno studio per accertare che la presenza di trappole cinetiche può limitare i tassi di ripiegamento e le rese delle proteine.

For use in immunohistochemical procedures to enhance staining and to unmask antigens after routine fixation and processing.

Azioni biochim/fisiol

La tripsina scinde i peptidi dall′estremità C-terminale dei residui della lisina e dell′arginina. Se su una o l′altra estremità del sito di scissione vi è un residuo acido, la velocità dell′idrolisi della reazione si riduce, mentre la presenza di un residuo di prolina sull′estremità carbossilica del sito di scissione interrompe l′idrolisi. Il pH ottimale per l′attività della tripsina è tra 7 e 9. La tripsina è anche in grado di scindere i legami esteri e ammidici dei derivati sintetici degli aminoacidi. Alle soluzioni di tripsina si aggiunge EDTA come agente chelante che neutralizza gli ioni calcio e magnesio che coprono i legami peptidici su cui agisce la tripsina. La rimozione di questi ioni aumenta l′attività enzimatica.

Gli inibitori delle serin proteasi, inclusi tra gli altri DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF e aprotina inibiranno la tripsina

Avvertenza

Solutions in 1 mM HCl are stable for 1 year in aliquots and stored at -20°C. The presence of Ca²⁺ will also diminish the self-autolysis of trypsin and maintain its stability in solution. Trypsin will also retain most of its activity in 2.0 M urea, 2.0 M guanidine HCl, or 0.1% (w/v) SDS.

Definizione di unità

Una unità BAEE produrrà un ΔA₂₅₃ di 0,001 per minuto a pH 7,6 a 25 °C, usando BAEE come substrato. Una unità BTEE = 320 unità ATEE. Volume della reazione = 3,2 mL (1 cm via luminosa).

Nota sulla preparazione

This product is a lyophilized powder soluble in Hank′s Balanced Salt Solution at 25 mg/mL.
For applications that require EDTA, solubilizing trypsin should be done with a buffered salt solution contaiing no Ca²⁺ or Mg²⁺.

Informazioni sulla sicurezza

• Pittogrammi: GHS08
• Avvertenze: Danger
• Indicazioni di pericolo: H334
• Consigli di prudenza: P261 - P284 - P304 + P340 + P312 - P501
• Classi di pericolo: Resp. Sens. 1
• Codice della classe di stoccaggio: 11 - Combustible Solids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable
• Dispositivi di protezione individuale: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves