RPROTKSOL-RO
Roche
Proteinasi K, ricombinante, grado PCR
Solution from Pichia pastoris
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About This Item
Prodotti consigliati
Ricombinante
expressed in Pichia pastoris
Livello qualitativo
Forma fisica
buffered aqueous solution (18 ± mg/mL; pH 7.5)
Attività specifica
~2.5 units/mg protein
Confezionamento
pkg of 1.25 mL (03115887001)
pkg of 25 mL (03115844001)
pkg of 5 mL (03115828001)
Produttore/marchio commerciale
Roche
pH ottimale
6.5 and 9.5
Intervallo di pH
4.0-12.5
Temperatura di conservazione
2-8°C
Descrizione generale
Approximately 2.5 U/mg (Chromozym assay); ≥30 U/mg hemoglobin assay. Refer to the Certificate of Analysis for specific values for the present lot.
Applicazioni
- Questo enzima di grado PCR è estremamente efficace sulle proteine native e può quindi essere utilizzato per inattivare rapidamente le nucleasi endogene come le RNasi e le DNasi. Questa proprietà rende la Proteinasi K particolarmente adatta per la purificazione di RNA e DNA nativi da tessuti o da linee cellulari
- L'enzima promuove la lisi cellulare attivando un fattore autolitico batterico.
- La proteinasi K, modificando proteine e glicoproteine sulla superficie della cellula, fornisce informazioni sulla struttura della membrana.
- Questa proteinasi K di grado PCR è particolarmente adatta per la purificazione di acidi nucleici per le reazioni di amplificazione, inoltre:
- la proteinasi K può anche essere utilizzata per rimuovere i detriti cellulari durante la preparazione dei colony lift e per trattare le sezioni di tessuto per garantire un'infiltrazione efficiente della sonda durante l'ibridazione in situ.
Caratteristiche e vantaggi
Scinde le proteine tra gli amminoacidi X e Y (X-↓-Y), dove X = amminoacido alifatico, aromatico o idrofobico e Y = qualsiasi amminoacido. L'enzima è estremamente efficace sulle proteine native e può quindi essere utilizzato per inattivare rapidamente nucleasi endogene come RNasi e DNasi.
- Scegli un strumento efficace per la preparazione del templato. Inattiva le DNasi e RNasi della maggior parte delle specie.
- Fornisce qualità e prestazioni costanti. Rigorosi test di qualità garantiscono una stabilità ottimale e prestazioni di alto livello in tutti i lotti.
- Prepara i campioni in un'ampia gamma di condizioni. Questo enzima è affidabile, stabile in un ampio intervallo di pH ed è ideale per una varietà di applicazioni.
- Avvantaggiati di questo enzima privo di contaminazioni. L'enzima viene testato per l'assenza di RNasi e DNasi ed è praticamente privo di DNA. È particolarmente adatto per la purificazione dei templati per la PCR.
Qualità
Questa preparazione è priva di RNasi, DNasi e DNA, secondo le attuali procedure di controllo della qualità.
Assenza di nucleasi: ogni lotto viene testato su vari substrati per garantire l'assenza di attività endonucleasica, esonucleasica, ribonucleasica e di attività di taglio (nick) del DNA.
Contenuto in DNA: ≤10pg/mg enzima (in base la limite di rilevabilità)
Carica microbica: ≤5 cfu/g (determinato mediante il test più stringente della Farmacopea Europea, che identifica il numero totale di lieviti, funghi e batteri aerobi vitali)
Assenza di nucleasi: ogni lotto viene testato su vari substrati per garantire l'assenza di attività endonucleasica, esonucleasica, ribonucleasica e di attività di taglio (nick) del DNA.
Contenuto in DNA: ≤10pg/mg enzima (in base la limite di rilevabilità)
Carica microbica: ≤5 cfu/g (determinato mediante il test più stringente della Farmacopea Europea, che identifica il numero totale di lieviti, funghi e batteri aerobi vitali)
Definizione di unità
Attività per volume: circa 50 U/mL di soluzione (dosaggio chromozyme); circa 600 U/mL di soluzione (dosaggio dell'emoglobina). Un′unità corrisponde all′attività enzimatica che taglia 18 mmol Chromozym TRY, a +25 °C in 1 min (equivalente a 600 U/mL con il saggio su emoglobina). Per conoscere i valori specifici del lotto in uso fare riferimento al certificato di analisi.
Nota sulla preparazione
Attivatori: per stimolare l'attività della Proteinasi K, aggiungere agenti denaturanti (SDS e urea). Ad esempio, l′aggiunta di SDS a una concentrazione finale del 2% può aumentare significativamente l'attività della proteinasi K. L'ottimizzazione mediante aggiunta di agenti denaturanti può aumentare l'attività della proteinasi fino a sette volte.
Soluzione di lavoro: tamponi consigliati:
la scelta del tampone da utilizzare per la proteinasi K dipende dall′applicazione a cui è destinata. Nella messa a punto dei parametri, seguire sempre le linee guida relative a pH e temperatura. Come regola generale, la proteinasi K è stabile e molto attiva nei tamponi che contengono reagenti denaturanti quali urea, sodio dodecil solfato (SDS) e sali di guanidinio.
Inibitori: l'enzima viene inattivato da Pefabloc® SC. Non è invece inattivato da ioni metallici, agenti chelanti (ad es. EDTA), reagenti sulfidrilici o inibitori della tripsina e della chimotripsina.
Soluzione di lavoro: tamponi consigliati:
la scelta del tampone da utilizzare per la proteinasi K dipende dall′applicazione a cui è destinata. Nella messa a punto dei parametri, seguire sempre le linee guida relative a pH e temperatura. Come regola generale, la proteinasi K è stabile e molto attiva nei tamponi che contengono reagenti denaturanti quali urea, sodio dodecil solfato (SDS) e sali di guanidinio.
Inibitori: l'enzima viene inattivato da Pefabloc® SC. Non è invece inattivato da ioni metallici, agenti chelanti (ad es. EDTA), reagenti sulfidrilici o inibitori della tripsina e della chimotripsina.
Altre note
Da utilizzare solo per ricerca nel settore life science. Non usare a scopo diagnostico.
Per l′inattivazione rapida di RNasi e DNasi.
L'enzima, se presente in grande eccesso e per lunghi periodi di incubazione, può scomporre le proteine fino ad amminoacidi liberi.
L'enzima, se presente in grande eccesso e per lunghi periodi di incubazione, può scomporre le proteine fino ad amminoacidi liberi.
Note legali
Pefabloc is a registered trademark of Pentapharm
Avvertenze
Danger
Indicazioni di pericolo
Consigli di prudenza
Codice della classe di stoccaggio
12 - Non Combustible Liquids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 1
Punto d’infiammabilità (°F)
No data available
Punto d’infiammabilità (°C)
No data available
Certificati d'analisi (COA)
Cerca il Certificati d'analisi (COA) digitando il numero di lotto/batch corrispondente. I numeri di lotto o di batch sono stampati sull'etichetta dei prodotti dopo la parola ‘Lotto’ o ‘Batch’.
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