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P6556

Sigma-Aldrich

Proteinasi K

lyophilized powder, ≥30 units/mg protein

Sinonimo/i:

Endopeptidasi K

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About This Item

Numero CAS:
Classificazione EC (Enzyme Commission):
Numero CE:
Numero MDL:
Codice UNSPSC:
12352204
eCl@ss:
32160410
NACRES:
NA.54

Forma fisica

lyophilized powder

Livello qualitativo

Attività specifica

≥30 units/mg protein

PM

28.93 kDa

tecniche

DNA extraction: suitable

Solubilità

H2O: soluble 1 mg/mL, clear, colorless

Attività estranea

Dnase ≤30 Kunitz units/mg solid
RNase ≤0.003 Kunitz units/mg solid

Condizioni di spedizione

wet ice

Temperatura di conservazione

−20°C

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Applicazioni

Il prodotto P6556 è fornito come polvere liofilizzata. Il prodotto P6556 è stato utilizzato per frammentare le proteine del cristallino umano. Il footprinting da proteasi ottenuto mediante digestione con proteinasi K può rivelare le interazioni di superficie proteina-proteina. L'enzima di Sigma è stato utilizzato nella fase di pre-ibridazione degli embrioni di pollo. È stato inoltre utilizzato per l'arricchimento di PrPSc, una proteina prionica presente nei campioni di scrapie di pecora, criceto e topo.
La proteinasi K è usata per l'inattivazione proteolitica delle nucleasi durante la purificazione di DNA e RNA.
Viene utilizzata per la rimozione di endotossine legate a proteine​cationiche come il lisozima e la ribonucleasi A.
È usata per l'isolamento dei mitocondri epatici, di lieviti e di fagioli mung
E′ utilizzata per determinare la localizzazione degli enzimi nelle membrane
Viene usata su sezioni di tessuto incluse in paraffina per esporre i siti di legame dell'antigene e consentire il legame con l′anticorpo
Usata per la digestione di proteine da campioni di tessuto cerebrale per la ricerca sui prioni nelle encefalopatie spongiformi trasmissibili (TSE). Il prodotto P6556 è fornito come polvere liofilizzata. Il prodotto P6556 è stato utilizzato per frammentare le proteine del cristallino umano.
Utile per l′inattivazione proteolitica delle nucleasi durante l′isolamento di DNA ed RNA.
Rimuove le endotossine che si legano alle proteine cationiche come lisozima e ribonucleasi A.
Segnalato come utile per l′isolamento dei mitocondri epatici, di lievito e di fagiolo mungo
Determinazione della localizzazione degli enzimi sulle membrane
Trattamento di sezioni di tessuto incluse in paraffina per esporre i siti di legame dell′antigene per la marcatura dell′anticorpo.
Digestione delle proteine da campioni di tessuto cerebrale per la ricerca sui prioni nell′encefalopatia spongiforme trasmissibile (EST).

Azioni biochim/fisiol

La proteinasi K ha un'ampia specificità e degrada diverse proteine anche allo stato nativo. Scinde principalmente il legame peptidico adiacente al gruppo carbossilico degli amminoacidi alifatici e aromatici con gruppi α-amminici bloccati. Il pH ottimale è compreso tra 7,5 e 9,0 e il punto isoelettrico è 8,9 Per l′attivazione è necessaria la presenza di Ca2 + (1-5 mM) La proteinasi K è inibita dal diisopropilfluorofosfato (DFIP) e dal fenilmetansolfonil fluoruro (PMSF).
La proteinasi K è una serin proteasi stabile e molto reattiva. Le evidenze emerse da studi sulla struttura cristallina e molecolare indicano che l′enzima appartiene alla famiglia delle subtilisine con una triade catalitica nel sito attivo (Asp39-His69-Ser224). È stabile in un vasto assortimento di ambienti: pH, sali tampone, detergenti (SDS) e temperatura. In presenza di SDS 0,1-0,5%, la proteinasi K conserva la sua attività e digerisce una serie di proteine e nucleasi nelle preparazioni di DNA senza compromettere l′integrità del DNA isolato.

Definizione di unità

Una unità idrolizzerà l′emoglobina denaturata con urea per produrre l′equivalente di colore di 1,0 μmole di tirosina al minuto a pH 7,5 e a 37 °C (colore sviluppato con il reattivo di Folin-Ciocalteu).

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N° Catalogo
Descrizione
Determinazione del prezzo

Pittogrammi

Health hazardExclamation mark

Avvertenze

Danger

Indicazioni di pericolo

Classi di pericolo

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Organi bersaglio

Respiratory system

Codice della classe di stoccaggio

11 - Combustible Solids

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 1

Punto d’infiammabilità (°F)

Not applicable

Punto d’infiammabilità (°C)

Not applicable

Dispositivi di protezione individuale

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves


Certificati d'analisi (COA)

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