539480
Proteinasi K
Sinonimo/i:
Endopeptidasi K
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About This Item
Numero CAS:
Numero MDL:
Codice UNSPSC:
12352202
NACRES:
NA.21
Prodotti consigliati
Forma fisica
lyophilized solid
Livello qualitativo
Attività specifica
≥30 mAnson units/mg dry wt
≥40 mAnson units/mg protein
PM
28.93 kDa
Produttore/marchio commerciale
Calbiochem®
Condizioni di stoccaggio
OK to freeze
Colore
white
Solubilità
50 mM Tris-HCl, 2 mM calcium acetate, pH 8.0: soluble
Attività estranea
DNase, none detected (nicking activity with pBR322, incubation for 6 h at 37°C)
RNase, none detected (ribonuclease activity with MS2 RNA detected after incubation for 6 h at 37°C)
Condizioni di spedizione
ambient
Temperatura di conservazione
2-8°C
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Descrizione generale
Serin proteasi con una forte attività proteolitica su un′ampia varietà di proteine denaturate e native ad alto peso molecolare. Da questa attività enzimatica consegue la sua capacità di inattivare rapidamente le nucleasi endogene per cui viene utilizzata per l′isolamento di mRNA e DNA ad alto peso molecolare. Taglia di preferenza legami vicini al gruppo carbonilico di amminoacidi idrofobi, alifatici e aromatici N-sostituiti. Inibita da DFP, Hg2+e PMSF. Non inattivata da chelanti di metalli, reagenti solfidrilici, TLCK o TPCK.
Applicazioni
Utile per l′inattivazione proteolitica delle nucleasi durante l′isolamento di DNA ed RNA.
Rimuove le endotossine che si legano alle proteine cationiche come lisozima e ribonucleasi A.
Segnalato come utile per l′isolamento dei mitocondri epatici, di lievito e di fagiolo mungo
Determinazione della localizzazione degli enzimi sulle membrane
Trattamento di sezioni di tessuto incluse in paraffina per esporre i siti di legame dell′antigene per la marcatura dell′anticorpo.
Digestione delle proteine da campioni di tessuto cerebrale per la ricerca sui prioni nell′encefalopatia spongiforme trasmissibile (EST).
Rimuove le endotossine che si legano alle proteine cationiche come lisozima e ribonucleasi A.
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Trattamento di sezioni di tessuto incluse in paraffina per esporre i siti di legame dell′antigene per la marcatura dell′anticorpo.
Digestione delle proteine da campioni di tessuto cerebrale per la ricerca sui prioni nell′encefalopatia spongiforme trasmissibile (EST).
Azioni biochim/fisiol
La proteinasi K è una serin proteasi stabile e molto reattiva. Le evidenze emerse da studi sulla struttura cristallina e molecolare indicano che l′enzima appartiene alla famiglia delle subtilisine con una triade catalitica nel sito attivo (Asp39-His69-Ser224). È stabile in un vasto assortimento di ambienti: pH, sali tampone, detergenti (SDS) e temperatura. In presenza di SDS 0,1-0,5%, la proteinasi K conserva la sua attività e digerisce una serie di proteine e nucleasi nelle preparazioni di DNA senza compromettere l′integrità del DNA isolato.
Attenzione
Tossicità: Irritante (B)
Definizione di unità
Una unità mAnson è definita come la quantità di enzima che libera 1,0 µmoli di aminoacidi folin-positivi (calcolati come tirosina) per minuto a 37°C, pH 7,5.
Stato fisico
Liofilizzato da acetato di calcio.
Ricostituzione
Conservare in frigorifero dopo la ricostituzione (4°C). Soluzioni madri preparate in Tris-HCl 50 mM, acetato di calcio 2 mM, pH 8,0 sono stabili per almeno 1 anno a 4°C.
Altre note
Watazu, Y., e altri 1993. J. Lab. Clin. Anal. 7, 81.
Lebherz, H.G., e altri 1986. Biochem. J.233, 51.
Ebeling, W., e altri 1974. Eur. J. Biochem.47, 91.
Lebherz, H.G., e altri 1986. Biochem. J.233, 51.
Ebeling, W., e altri 1974. Eur. J. Biochem.47, 91.
Note legali
CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Avvertenze
Danger
Indicazioni di pericolo
Consigli di prudenza
Classi di pericolo
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Organi bersaglio
Respiratory system
Codice della classe di stoccaggio
11 - Combustible Solids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 1
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
Certificati d'analisi (COA)
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