17-622
Set di anticorpi ChIPAb+ (convalidati per ChIP) anti-trimetilistone H3 (Lys27) e di primer
from rabbit, purified by using Protein A
Sinonimo/i:
Chip Antibody and primer set, H3K27me3 ChIP, H3K27me3, Histone H3 (tri methyl K27), Histone H3K27me3, Histone H3K27me3 ChIP
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About This Item
Codice UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.32
Prodotti consigliati
Origine biologica
rabbit
Livello qualitativo
Clone
polyclonal
Purificato mediante
using Protein A
Reattività contro le specie
human, mouse
Produttore/marchio commerciale
ChIPAb+
Upstate®
tecniche
ChIP: suitable
western blot: suitable
N° accesso NCBI
N° accesso UniProt
Condizioni di spedizione
dry ice
Informazioni sul gene
human ... H3F3B(3021)
Descrizione generale
La metilazione degli istoni può verificarsi su due diversi residui: arginina o lisina. Essa può essere associata all'attivazione o alla repressione della trascrizione, a seconda del residuo metilato. La lisina 27 dell'istone H3 può essere mono-, di- o trimetilata (istone H3 monometil Lys27, istone H3 dimetil Lys27 o istone H3 trimetil Lys27) da parte di diverse istone metiltransferasi come EZH2 o NSD3. La metilazione di questo residuo è associata principalmente alla repressione trascrizionale.
Tutti gli anticorpi ChIPAb+ vengono singolarmente convalidati per confermare la precipitazione della cromatina, ogni lotto,
sempre. Ogni set di anticorpi ChIPAb+ comprende primer di controllo (ogni lotto testato mediante qPCR) per convalidare biologicamente i tuoi risultati di IP in un contesto locus-specifico. Per permettere ai ricercatori di convalidare i protocolli di ChIP quando usano i nostri anticorpi nel loro specifico contesto cromatinico, si forniscono anche il protocollo della qPCR e le sequenze dei primer.
Ogni set comprende anche un anticorpo di controllo negativo per verificare la specificità della reazione di ChIP. Il set trimetil-istone H3 (Lys27) ChIPAb+ comprende l'anticorpo anti-trimetil-istone H3 (Lys27), un anticorpo di controllo negativo (IgG di coniglio purificate) e primer per qPCR che amplificano una regione di 139 bp dell′alfa-satellite umano. Gli anticorpi anti-trimetil-istone H3 (Lys27) e i controlli negativi sono forniti in un formato di reazione "per ChIP" scalabile e possono essere utilizzati per convalidare funzionalmente la precipitazione della cromatina associata al trimetil-istone H3 (Lys27).
sempre. Ogni set di anticorpi ChIPAb+ comprende primer di controllo (ogni lotto testato mediante qPCR) per convalidare biologicamente i tuoi risultati di IP in un contesto locus-specifico. Per permettere ai ricercatori di convalidare i protocolli di ChIP quando usano i nostri anticorpi nel loro specifico contesto cromatinico, si forniscono anche il protocollo della qPCR e le sequenze dei primer.
Ogni set comprende anche un anticorpo di controllo negativo per verificare la specificità della reazione di ChIP. Il set trimetil-istone H3 (Lys27) ChIPAb+ comprende l'anticorpo anti-trimetil-istone H3 (Lys27), un anticorpo di controllo negativo (IgG di coniglio purificate) e primer per qPCR che amplificano una regione di 139 bp dell′alfa-satellite umano. Gli anticorpi anti-trimetil-istone H3 (Lys27) e i controlli negativi sono forniti in un formato di reazione "per ChIP" scalabile e possono essere utilizzati per convalidare funzionalmente la precipitazione della cromatina associata al trimetil-istone H3 (Lys27).
Specificità
Prevista reattività crociata con molte specie.
trimetil istone H3 (Lys27)
Immunogeno
Epitopo: Trimetil Lys27
Peptide sintetico con due ramificazioni coniugato con KLH contenente la sequenza ...AR(me3K)SAP..., in cui me3K corrisponde alla trimetil-lisina al residuo 27 dell′istone H3 umano.
Applicazioni
Anticorpo anti-trimetil-istone H3 (Lys27) convalidato per ChIP & set di primer che comprende l′anticorpo per ChIP & i primer specifici di controllo per PCR utilizzati per l′immunoprecipitazione di H3K27Me3.
Categoria di ricerca
Epigenetica & funzione nucleare
Epigenetica & funzione nucleare
Immunoprecipitazione della cromatina
La cromatina sonicata ottenuta da 2x106 cellule HeLa è stata immunoprecipitata utilizzando 4 μg di anticorpo anti-trimetil-istone H3 (Lys27) purificato o IgG di coniglio normale e il kit Magna ChIP A (N° Cat. 17-610). L′avvenuto arricchimento dei frammenti di DNA associati al trimetil-istone H3 (Lys27) è stato verificato mediante qPCR utilizzando primer per ChIP specifici per la GAPDH, che fiancheggiano il promotore del gene GAPDH umano, e i primer specifici per il promotore del gene MyoD umano.
Per i dettagli sperimentali, consultare i protocolli del kit EZ-Magna ChIP A (N° Cat. 17-408) o del kit EZChIP (N° Cat. 17-371).
Analisi mediante Western blotting
L′istone H3 ricombinante (corsia 2) e gli estratti acidi di cellule HeLa (corsia 1) sono stati risolti mediante elettroforesi, trasferiti su nitrocellulosa e analizzati con una diluizione 1:5000 di anti-trimetilistone H3 Lys27 (0,4 μg/mL).
Le proteine sono state evidenziate con l′impiego di un anticorpo secondario di capra anti-coniglio coniugato con HRP e un sistema di rivelazione in chemiluminescenza (vedere figure).
La cromatina sonicata ottenuta da 2x106 cellule HeLa è stata immunoprecipitata utilizzando 4 μg di anticorpo anti-trimetil-istone H3 (Lys27) purificato o IgG di coniglio normale e il kit Magna ChIP A (N° Cat. 17-610). L′avvenuto arricchimento dei frammenti di DNA associati al trimetil-istone H3 (Lys27) è stato verificato mediante qPCR utilizzando primer per ChIP specifici per la GAPDH, che fiancheggiano il promotore del gene GAPDH umano, e i primer specifici per il promotore del gene MyoD umano.
Per i dettagli sperimentali, consultare i protocolli del kit EZ-Magna ChIP A (N° Cat. 17-408) o del kit EZChIP (N° Cat. 17-371).
Analisi mediante Western blotting
L′istone H3 ricombinante (corsia 2) e gli estratti acidi di cellule HeLa (corsia 1) sono stati risolti mediante elettroforesi, trasferiti su nitrocellulosa e analizzati con una diluizione 1:5000 di anti-trimetilistone H3 Lys27 (0,4 μg/mL).
Le proteine sono state evidenziate con l′impiego di un anticorpo secondario di capra anti-coniglio coniugato con HRP e un sistema di rivelazione in chemiluminescenza (vedere figure).
Sotto categoria di ricerca
Istoni
Istoni
Confezionamento
25 saggi per kit, circa 4 μL per immunoprecipitazione della cromatina.
Componenti
Anti-trimetil istone H3 (Lys27) policlonale, 1 fiala
Siero policlonale di coniglio controllo, 1 fiala
Set di primer per alfa-satellite umano, 1 fiala
Siero policlonale di coniglio controllo, 1 fiala
Set di primer per alfa-satellite umano, 1 fiala
Qualità
Immunoprecipitazione della cromatina
La cromatina sonicata ottenuta da 3x106 cellule NIH3T3 L1 è stata immunoprecipitata utilizzando 4 μg di anticorpo purificato o IgG di coniglio normale e il kit Magna ChIP® A (N° Cat. 17-610). L′avvenuto arricchimento dei frammenti di DNA associati al trimetil-istone H3
(Lys27) è stato verificato mediante qPCR utilizzando i primer per ChIP specifici per alfa-satellite umano (vedere le figure).
Per i dettagli sperimentali, consultare i protocolli del kit EZ-Magna ChIP A (N° Cat. 17-408) o del kit EZ-ChIP (N° Cat. 17-371).
La cromatina sonicata ottenuta da 3x106 cellule NIH3T3 L1 è stata immunoprecipitata utilizzando 4 μg di anticorpo purificato o IgG di coniglio normale e il kit Magna ChIP® A (N° Cat. 17-610). L′avvenuto arricchimento dei frammenti di DNA associati al trimetil-istone H3
(Lys27) è stato verificato mediante qPCR utilizzando i primer per ChIP specifici per alfa-satellite umano (vedere le figure).
Per i dettagli sperimentali, consultare i protocolli del kit EZ-Magna ChIP A (N° Cat. 17-408) o del kit EZ-ChIP (N° Cat. 17-371).
Descrizione del bersaglio
17 kDa
Stato fisico
Anti-trimetil istone H3 (Lys27) (IgG policlonali di coniglio). Una microprovetta contenente 100 μg di IgG purificate su proteina A in 100 μL di tampone contenente 0,1 M di Tris-glicina, pH 7,4, 0,15 M di NaCl con lo 0,05% di azoturo di sodio. Conservare a -20 °C.
IgG di coniglio normale. Una fiala contenente 125 μg di IgG di coniglio purificate in 125 μL di tampone di conservazione contenente lo 0,1% di azoturo di sodio. Conservare a -20 °C.
Primer per ChIP per alfa-satellite umano. Una microprovetta contenente 75 μL di ciascun primer di controllo specifico per l′alfa-satellite umano ad una concentrazione di 5 μM. Conservare a -20 °C.
FOR: CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
REV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
IgG di coniglio normale. Una fiala contenente 125 μg di IgG di coniglio purificate in 125 μL di tampone di conservazione contenente lo 0,1% di azoturo di sodio. Conservare a -20 °C.
Primer per ChIP per alfa-satellite umano. Una microprovetta contenente 75 μL di ciascun primer di controllo specifico per l′alfa-satellite umano ad una concentrazione di 5 μM. Conservare a -20 °C.
FOR: CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
REV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
Stoccaggio e stabilità
1 anno a -20 °C dalla data di spedizione
Risultati analitici
Controllo
1 fiala contenente 75 μl di ciascun primer di controllo specifico per l′alfa-satellite umano ad una concentrazione 5 μM. Conservare a -20 °C.
FOR: CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
REV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
1 fiala contenente 75 μl di ciascun primer di controllo specifico per l′alfa-satellite umano ad una concentrazione 5 μM. Conservare a -20 °C.
FOR: CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
REV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
Note legali
MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Esclusione di responsabilità
Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.
Codice della classe di stoccaggio
12 - Non Combustible Liquids
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
Certificati d'analisi (COA)
Cerca il Certificati d'analisi (COA) digitando il numero di lotto/batch corrispondente. I numeri di lotto o di batch sono stampati sull'etichetta dei prodotti dopo la parola ‘Lotto’ o ‘Batch’.
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Long noncoding RNA-mediated maintenance of DNA methylation and transcriptional gene silencing.
Mohammad, F; Pandey, GK; Mondal, T; Enroth, S; Redrup, L; Gyllensten, U; Kanduri, C
Development null
Transgene- and locus-dependent imprinting reveals allele-specific chromosome conformations.
Lonfat, N; Montavon, T; Jebb, D; Tschopp, P; Nguyen Huynh, TH; Zakany, J; Duboule, D
Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA null
Genome-wide bovine H3K27me3 modifications and the regulatory effects on genes expressions in peripheral blood lymphocytes.
He, Y; Yu, Y; Zhang, Y; Song, J; Mitra, A; Zhang, Y; Wang, Y; Sun, D; Zhang, S
Testing null
Extensive co-operation between the Epstein-Barr virus EBNA3 proteins in the manipulation of host gene expression and epigenetic chromatin modification.
White, RE; Groves, IJ; Turro, E; Yee, J; Kremmer, E; Allday, MJ
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Temporal dynamics and developmental memory of 3D chromatin architecture at Hox gene loci.
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eLife null
Il team dei nostri ricercatori vanta grande esperienza in tutte le aree della ricerca quali Life Science, scienza dei materiali, sintesi chimica, cromatografia, discipline analitiche, ecc..
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