07-360

Anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27)

serum, Upstate^®

• Sinonimo/i: H3K27Ac, Histone H3 (acetyl K27)
• Codice UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Proprietà

• Origine biologica: rabbit
• Livello qualitativo: 100
• Forma dell’anticorpo: serum
• Tipo di anticorpo: primary antibodies
• Clone: polyclonal
• Reattività contro le specie: human, vertebrates, Saccharomyces cerevisiae
• Reattività contro le specie (prevista in base all’omologia): yeast (based on 100% sequence homology)
• Produttore/marchio commerciale: Upstate^®
• tecniche: ChIP: suitable (ChIP-seq); dot blot: suitable; western blot: suitable
• Isotipo: IgG
• N° accesso NCBI: NM_003493
• N° accesso UniProt: P61830
• Condizioni di spedizione: dry ice
• modifica post-traduzionali bersaglio: acetylation (Lys27)
• Informazioni sul gene: human ... HIST1H3F(8968)

Descrizione

Descrizione generale

L′istone H3 (UniProt: P61830) nei lieviti è codificato dal gene HHT1 (conosciuto anche come YBR010W, YBR0201, HHT2, SIN2, YNL031C, N2749) (Gene ID: 852295). L'istone H3 è un componente fondamentale del nucleosoma. I nucleosomi avvolgono e compattano il DNA in cromatina, limitandone l'accessibilità agli apparati cellulari che richiedono il DNA come stampo. L'istone H3 può subire diverse modificazioni post-traduzionali che attivano o reprimono l'espressione genica. Può essere mono-, di- o trimetilato. È stato dimostrato che l'istone H3 (H3K27) trimetilato è strettamente associato ai promotori genici inattivi, mentre l'H3K27 monometilato ai promotori attivi. L'H3K27 dimetilato ha un pattern di distribuzione simile all'H3K27. L'istone H3 può anche subire l'acetilazione a livello delle Lys9, 14, 18, 23, 27 e 56. La sua acetilazione porta all′attivazione della trascrizione. L'acetilazione dell'istone determina l'apertura della cromatina, poiché gli istoni acetilati non possono impacchettarsi bene tra loro come gli istoni deacetilati. L′istone H3 acetilato (H3K27ac) è un importante segno di amplificazione che consente di distinguere tra enhancer attivi e poised; i geni enhancer prossimali che non presentano un arricchimento di H3K27ac mostrano livelli di espressione inferiori rispetto alla media dei geni enhancer prossimali. È stato dimostrato che la quantità di H3K27ac diminuisce gradualmente dal primissimo stadio pronucleare fino allo stadio a 8 cellule, corrispondente alla maggiore attivazione del genoma embrionale (EGA). La successiva riacetilazione di H3K27, che avviene a partire dallo stadio di morula, accompagna la prima specificazione del lignaggio cellulare negli embrioni FIV. Nella Drosophila, H3K27ac è presente ad alti livelli nei primi stadi embrionali e diminuisce dopo 4 ore, mentre aumenta il livello di H3K27 trimetilato. (Rif.: Creyghton, MP et al. ( ). Proc. Natl. Acad. Sci. USA 107(50); 21931-21936; Tie, F et al (2009). Dvelopment 136 (18); 3131-3141).

Specificità

Riconosce l′istone H3 acetilato sulla lisina 27.

Immunogeno

Epitopo: Lys27

Peptide lineare, coniugato con KLH, corrispondente a 11 amminoacidi della regione N-terminale dell′istone H3 umano acetilato sulla Lisina 27.

Applicazioni

Saggio di ChIP-seq: L′immunoprecipitazione della cromatina è stata ottenuta con il kit Magna ChIP HiSens (N° Cat. 17-10460), 2 µL di anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27) (N° Cat. 07-360), 20 µL di sferette con Proteina A/G e cromatina trattata con formaldeide (crosslinked) ottenuta da 1e6 cellule HeLa, seguita da purificazione del DNA su sferette magnetiche. Le librerie sono state preparate da campioni di DNA input e ChIP usando protocolli standard con adattatori Illumina contrassegnati da codici a barre e analizzati nello strumento Illumina HiSeq. Gli oltre 14 milioni di letture contenute nei file FastQ del sequenziatore sono state mappate usando il sistema di allineamento Bowtie (http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml) dopo rimozione dei tag con TagDust (http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource/). I picchi sono stati identificati con il software MACS (http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/), con picchi e letture visualizzati come track personalizzato nel Genome Browser dell′UCSC (http://genome.ucsc.edu) da file nei formati BigWig e BED. I picchi più alti identificati nel set di dati 07-360, corrispondenti al 25% dei campioni, erano sovrapponibili al 96% ai picchi identificati nel track H3K27Ac BROAD Histone di ENCODE per la linea cellulare HeLa S3.

Categoria di ricerca
Epigenetica & funzione nucleare

L'anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27), è un anticorpo policlonale di coniglio che permette la rivelazione dell'istone H3 acetilato sulla Lisina 27. Conosciuto anche come anti-H3K27ac, questo anticorpo è oggetto di pubblicazioni su riviste soggette a "peer review”; è convalidato per scopi di ChIP, ChIP-seq, WB, DB, Mplex e la sua specificità è stata verificata mediante dot blot (DB).

Sotto categoria di ricerca
Istoni

Qualità

Valutata mediante Western blotting su estratto acido di cellule HeLa trattate con butirrato di sodio 5 mM.
Saggio di Western blotting: questo anticorpo diluito 1:5.000 ha permesso di rivelare l′acetil-istone H3 (Lys27) in estratto acido di cellule HeLa trattate con butirrato di sodio 5 mM.

Descrizione del bersaglio

17 kDa

Stato fisico

Antisiero policlonale di coniglio con azoturo di sodio allo 0,05% e glicerolo al 30%.

Non purificato

Stoccaggio e stabilità

A -20°C si conserva per 2 anni dalla data di spedizione. Suddividere in aliquote per evitare di scongelare/ricongelare ripetutamente. Per ottimizzare il recupero del prodotto, centrifugare il flaconcino originale dopo lo scongelamento e prima di togliere il tappo.

Risultati analitici

Controllo
Proteine ​estratte in acido da cellule HeLa trattate con butirrato di sodio

Altre note

Concentrazione: per la concentrazione specifica del lotto, fare riferimento al Certificato di Analisi.

Note legali

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Esclusione di responsabilità

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable