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Kit Magna RIP^® A/G per l′immunoprecipitazione della cromatina

Single day chromatin immunoprecipitation (ChIP) kit containing all necessary reagents to perform 22 individual chromatin immunoprecipitation (ChIP) reactions using magnetic A/G beads.

• Sinonimo/i: Magnetic ChIP Kit, Magnetic Chromatin Immunoprecipitation
• Codice UNSPSC: 12161503
• eCl@ss: 32161000
• NACRES: NA.52

Proprietà

• Livello qualitativo: 100
• Produttore/marchio commerciale: Magna ChIP^®
• tecniche: immunoprecipitation (IP): suitable
• Condizioni di spedizione: dry ice

Descrizione

Descrizione generale

Diversamente dai protocolli standard per la ChIP, solitamente lunghi e laboriosi, il protocollo del kit Magna ChIP permette di ridurre il tempo necessario per un esperimento di questo tipo da tre giorni a un giorno. Inoltre, dato che il minor volume della reazione con il kit Magna ChIP aumenta la concentrazione relativa dell′anticorpo, la reazione di ChIP può essere eseguita con quantità minori sia dell′anticorpo stesso sia della cromatina frammentata. Infine, poiché in questo kit si impiega una miscela di sferette di proteina A e proteina G, la gamma degli isotipi anticorpali utilizzabili è più ampia. Ciò evita la necessità di acquistare kit separati per l′immunoprecipitazione basata su proteina A e su proteina G. Poiché i kit Magna ChIP contengono sferette paramagnetiche, sono compatibili con piattaforme automatizzate ad alta produttività, rendendo possibile effettuare contemporaneamente un gran numero di reazioni di ChIP. Caratteristiche & vantaggi:

• Il protocollo rapido basato su sferette magnetiche consente di ottenere risultati in 1 solo giorno
• La miscela di sferette legate a proteina A e a proteina G permette di utilizzare per la ChIP una gamma di anticorpi più ampia rispetto alle sferette legate solo a proteina A o G
• Include colonnine da centrifuga che velocizzano la purificazione del DNA e la rendono più affidabile - basta estrazioni con fenolo-cloroformio
• Kit completo con tutti i reagenti necessari per ottenere risultati affidabili e riproducibili
• Compatibile con gli anticorpi ChIPAb+ validati e relativi set di primer

L′immunoprecipitazione della cromatina (ChIP) è una tecnica importante che permette l′analisi delle interazioni in vivo delle proteine con il DNA genomico. Con questa tecnica, posto che sia disponibile un buon anticorpo per la proteina di interesse, si può analizzare qualunque proteina legante il DNA o associata a cromatina. Si possono misurare proteine differenti localizzate in una specifica regione del genoma, oppure la distribuzione di una specifica proteina in tutto il genoma. Un′altra potente applicazione di questa tecnica è l′analisi dei cambiamenti delle modifiche istoniche che si correlano con processi come la trascrizione, la mitosi o la riparazione del DNA.

L′immunoprecipitazione della cromatina (ChIP) rappresenta una tecnica potente per mappare la distribuzione in vivo delle proteine associate al DNA cromosomico. Queste proteine possono essere subunità istoniche e modificazioni post-traduzionali o altre proteine associate alla cromatina, come fattori di trascrizione, regolatori della cromatina, ecc. Inoltre, si può usare la ChIP per identificare le regioni del genoma associate a queste proteine o, al contrario, per identificare le proteine associate a una particolare regione del genoma. La tecnica della ChIP spesso implica la formazione di legami crociati tra DNA e proteine o tra proteine, la frammentazione della cromatina con tali tipi di legami e la successiva immunoprecipitazione della cromatina con un anticorpo specifico per una proteina di interesse. I frammenti di DNA isolati in complessi con la proteina di interesse sono identificabili tramite svariati metodi, quali PCR, microarray di DNA e sequenziamento del DNA. La PCR standard o quantitativa può servire a verificare se una particolare sequenza del DNA (il gene o una regione del genoma) è associata alla proteina di interesse. La combinazione di ChIP e microarray “tiled” di DNA genomico o del promotore (ChIP-chip) serve per identificare a livello genomico i siti di legame al DNA delle proteine associate a cromatina con elevata risoluzione. In alternativa, il sequenziamento ad alta produttività di librerie costruite da DNA cromosomico immunoprecipitato (ChIP-Seq) è una valida alternativa al metodo ChIP-chip per mappare le interazioni proteine-DNA nei genomi di mammifero.

Applicazioni

Categoria di ricerca
Epigenetica & funzione nucleare

Usate per rilevare/quantificare: proteina A+G

Confezionamento

Capacità del kit: 22 saggi di immunoprecipitazione della cromatina

Componenti

Sferette magnetiche legate a proteina A/G

Tampone di diluizione per ChIP

Tampone di lavaggio a basso tenore salino

Tampone di lavaggio ad alto tenore salino

Tampone di lavaggio con LiCl

Tampone TE

Tampone di lisi cellulare

Tampone di lisi nucleare

Tampone di eluizione per ChIP (senza proteinasi K)

Proteinasi K

RNasi A

Glicina 10X

PBS 10X

Cocktail di inibitori delle proteasi II

Colonnine da centrifuga

Provette di raccolta

Reagente di legame A

Reagente di lavaggio B

Reagente di eluizione C

Stato fisico

Due scatole contenenti tutti i reagenti necessari per 22 reazioni singole di immunoprecipitazione della cromatina (ChIP). I tamponi in dotazione sono sufficienti per ottenere la cromatina da un massimo di cinque piastre da 15 cm per colture cellulari, fornendo ciascuna piastra un massimo di 10 preparazioni di cromatina (il numero varia in funzione del tipo di cellule e di saggio).

Stoccaggio e stabilità

Quando si riceve la confezione, conservare i componenti alle temperature indicate sulle rispettive etichette. I componenti del kit sono stabili per 1 anno dalla data di spedizione se conservati come indicato.

Note legali

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Esclusione di responsabilità

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Informazioni sulla sicurezza

• Pittogrammi: GHS02,GHS08,GHS07
• Avvertenze: Danger
• Indicazioni di pericolo: H225,H302,H315,H319,H334,H412
• Consigli di prudenza: P210 - P233 - P273 - P301 + P312 - P303 + P361 + P353 - P305 + P351 + P338
• Classi di pericolo: Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2
• Codice della classe di stoccaggio: 3 - Flammable liquids
• Punto d’infiammabilità (°F): 55.4 °F
• Punto d’infiammabilità (°C): 13 °C