推荐产品
包裝
pkg of 5 x 1 mL (columns (06781543001))
pkg of 5 mL (column (06781535001))
製造商／商標名
Roche
參數
1,420 cm/hr max. flow rate
容量
≥40 mg/mL, resin binding capacity
儲存溫度
2-8°C
一般說明
蛋白质亲和纯化中最常用的技术是在蛋白质的 N-端或 C-端（甚至在暴露的环上）构建 6-14 个组氨酸序列。这样的多聚组氨酸伸展与镍和钴等二价金属离子强烈结合。这种作用可用于分离蛋白质。使用螯合剂可以将金属离子固定在基质上，这样仍然允许离子干扰蛋白质的多聚组氨酸标记。当这些带 his 标签的蛋白质通过含有固定金属离子的色谱柱时，蛋白质通过该标签与色谱柱结合。几乎所有未标记的蛋白质都将通过色谱柱。通过与多聚组氨酸标记竞争结合色谱柱的咪唑洗脱，或通过降低 pH 值来降低标记对树脂的亲和力，蛋白质将从色谱柱中释放出来。虽然该程序通常用于纯化具有工程亲和标记的重组蛋白，但也可用于对二价阳离子具有固有亲和力的天然蛋白。
特點和優勢
cOmplete His-Tag 纯化柱有2种规格，均预装cOmplete His-Tag纯化树脂。cOmplete His-Tag 纯化树脂是创新型大容量 IMAC 基质（固定化金属亲和色谱），可方便地从总裂解物中一步纯化组氨酸标记蛋白。罗氏专有的镍螯合物化学成分可确保与常用还原剂（如DTT）、螯合金属蛋白酶抑制剂（如EDTA）以及各种缓冲物质和缓冲盐存在出色的相容性。广泛的相容成分选择允许优化缓冲液，实现蛋白最大的稳定性和溶解性。
cOmplete His-Tag 纯化柱能完全兼容 ÄKTA Systems (Cytiva).等标准纯化系统。
cOmplete His-Tag 纯化柱能完全兼容 ÄKTA Systems (Cytiva).等标准纯化系统。
- 使用最适合您蛋白的缓冲液条件
- 重复获得高纯度蛋白
- 保护您的蛋白免受有毒镍污染
- 在安全和环保的环境中工作
包裝
- 06781535001（5 mL 色谱柱；1 个色谱柱含有 5 mL cOmplete His-Tag 纯化树脂）
- 06781543001（5 x 1 mL 色谱柱；5 个色谱柱，含 1 mL cOmplete His-Tag 纯化树脂）
相容性
长期储存的相容性： 20% 乙醇，pH 4.0 至 pH 9.0
色谱过程中的相容性： 树脂在纯化（孵育 1 小时），6M 盐酸胍、8M 尿素（pH 2.0 至 pH 14.0）过程中与 10 mM EDTA、10 mM DTT相容。
清洁过程中的相容性： 4%SDS 形成cOmplete His-Tag 纯化树脂填充柱，预先加入 Ni 2 + ，储存在 20% 乙醇中。
色谱过程中的相容性： 树脂在纯化（孵育 1 小时），6M 盐酸胍、8M 尿素（pH 2.0 至 pH 14.0）过程中与 10 mM EDTA、10 mM DTT相容。
清洁过程中的相容性： 4%SDS 形成cOmplete His-Tag 纯化树脂填充柱，预先加入 Ni 2 + ，储存在 20% 乙醇中。
其他說明
推荐体积流速： 5 mL 色谱柱 (06 781 535 001)：2.5-10 mL/分钟
1 mL 色谱柱 (06 781 543 001)：0.5-2.0 mL/分钟
体积流速是色谱柱截面的函数。
推荐上样/清洗咪唑浓度： 无 His 标记的蛋白非特异性结合较低。
上样和/或清洗缓冲液中使用 高达 5 mM 咪唑。
如果用cOmplete His-tag 纯化柱建立新的 His-tag 蛋白纯化检测方法 ，不要使用咪唑 。例如，如果第一步后 His 标签蛋白的纯度需要提高，则第二步使用最终浓度高达 5 mM 的咪唑。
推荐洗脱用咪唑浓度： 高达 500 mM
请注意：
与其他可用的树脂相比，结合 His标记蛋白质通常从咪唑浓度较低的cOmplete His 标记纯化柱中洗脱，例如，25-45 mM。
结合量
树脂与各种类型蛋白的结合能力可因蛋白的大小等蛋白特性而不同。
cOmplete His-Tag 纯化柱与多组氨酸标记蛋白可高度特异性结合。因此，与传统金属螯合物基质相比，其结合动力学可能不同。通过降低层析纯化过程中的流速，蛋白有更多的时间与树脂结合，从而可实现cOmplete His标记纯化柱的全容量。
1 mL 色谱柱 (06 781 543 001)：0.5-2.0 mL/分钟
体积流速是色谱柱截面的函数。
推荐上样/清洗咪唑浓度： 无 His 标记的蛋白非特异性结合较低。
上样和/或清洗缓冲液中使用 高达 5 mM 咪唑。
如果用cOmplete His-tag 纯化柱建立新的 His-tag 蛋白纯化检测方法 ，不要使用咪唑 。例如，如果第一步后 His 标签蛋白的纯度需要提高，则第二步使用最终浓度高达 5 mM 的咪唑。
推荐洗脱用咪唑浓度： 高达 500 mM
请注意：
与其他可用的树脂相比，结合 His标记蛋白质通常从咪唑浓度较低的cOmplete His 标记纯化柱中洗脱，例如，25-45 mM。
结合量
树脂与各种类型蛋白的结合能力可因蛋白的大小等蛋白特性而不同。
cOmplete His-Tag 纯化柱与多组氨酸标记蛋白可高度特异性结合。因此，与传统金属螯合物基质相比，其结合动力学可能不同。通过降低层析纯化过程中的流速，蛋白有更多的时间与树脂结合，从而可实现cOmplete His标记纯化柱的全容量。
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
法律資訊
cOmplete is a trademark of Roche
訊號詞
Warning
危險分類
Carc. 2 - Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 3 - Skin Sens. 1
儲存類別代碼
3 - Flammable liquids
水污染物質分類（WGK）
WGK 1
閃點（°F）
93.2 °F
閃點（°C）
34 °C
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商品
Get maximum protection after protein isolation by using protease and phosphatase inhibitor cocktail tablets from Roche.
使用罗氏的蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物片剂可最大程度地保护分离的蛋白质。
实验方案
cOmplete™ His-Tag Purification Column Protocol & Troubleshooting
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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