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一般說明
对硝基苯基磷酸酯以50X浓缩液（0.19 mol/l）的形式提供。与对-NPP 底物缓冲液（货号 487664）一起使用。
对硝基苯基磷酸酯是基于碱性磷酸酶的 ELISA 测定中最常见的底物。磷酸酯水解释放出对硝基苯酚，它是一种可溶的黄色色原体，可在 405 nm（ε= 1.83 x 104M-1cm-1）以分光光度法测定。由于反应是线性的，因此可以进行动力学分析。终点的确定也可以通过用强碱终止反应并测量 405 nm 处的吸光度来进行。这种p-NPP 制剂是一种在专有溶剂中的稳定、便捷的液体浓缩物。
基于碱性磷酸酶的ELISA分析的出色底物。产生黄色可溶成品，可在405 nm至410 nm处读取。可以进行动力学和终点测定。以即用型产品提供。可单独购买的即用型稀释剂（货号487664）。
这种对-硝基苯基磷酸酯经过验证可用于 ELISA。
應用
ELISA
生化／生理作用
主要靶标
基于碱性磷酸酶的ELISA分析的底物。
基于碱性磷酸酶的ELISA分析的底物。
产物不与ATP竞争。
警告
毒性：标准处理（A）
外觀
以 50X 浓缩液形式提供。
重構
如果溶液变为黄色或浑浊，则丢弃。
其他說明
通过ELISA对最终产品进行产品测试。
在基于碱性磷酸酶的 ELISA 中使用p-NPP的建议程序：
1。 制备1X p-NPP 底物溶液： 向 39 份 dH2O 中加入 1 份 50X p-NPP 浓缩液和 10 份 p-NPP 底物缓冲液（货号 487664）。混匀并避光储存。这种稀释的试剂在制备后可稳定达10 小时
注：货号 487664 是一种基于 AMP（2-氨基-2-甲基-1-丙醇）的缓冲液。其它缓冲液，例如基于二乙醇胺（DEA）和基于2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇（AMPD）的缓冲液，也可以使用。
2．用抗体和碱性磷酸酶标记的探针完成所有要求的培养。
3.用含有0.1%吐温®-20洗涤剂的Tris缓冲盐水（TBS）清洗板孔至少4次。 不要使用磷酸盐缓冲液； 无机磷酸盐是碱性磷酸酶的强效抑制剂。
4．最后一次洗涤后，振摇并吸干孔中的全部残留缓冲液。
5.向每个孔中加入 100 µl 1X p-NPP 底物溶液（在步骤 2 中制备）并培养 15-60 分钟。 （如果需要进行动力学研究，可以按一定时间间隔获取 405 nm 的读数）。
[注意：最佳培养时间可能因酶的含量而异。如果显色过快，可能需要稀释探针、抗体或碱性磷酸酶标记的试剂。]
6.添加100 µl 1 N NaOH终止反应。
7.读取 405 nm 处的吸光度。
注：时间、试剂体积和温度的变化可能需要用户进一步标准化。
在基于碱性磷酸酶的 ELISA 中使用p-NPP的建议程序：
1。 制备1X p-NPP 底物溶液： 向 39 份 dH2O 中加入 1 份 50X p-NPP 浓缩液和 10 份 p-NPP 底物缓冲液（货号 487664）。混匀并避光储存。这种稀释的试剂在制备后可稳定达10 小时
注：货号 487664 是一种基于 AMP（2-氨基-2-甲基-1-丙醇）的缓冲液。其它缓冲液，例如基于二乙醇胺（DEA）和基于2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇（AMPD）的缓冲液，也可以使用。
2．用抗体和碱性磷酸酶标记的探针完成所有要求的培养。
3.用含有0.1%吐温®-20洗涤剂的Tris缓冲盐水（TBS）清洗板孔至少4次。 不要使用磷酸盐缓冲液； 无机磷酸盐是碱性磷酸酶的强效抑制剂。
4．最后一次洗涤后，振摇并吸干孔中的全部残留缓冲液。
5.向每个孔中加入 100 µl 1X p-NPP 底物溶液（在步骤 2 中制备）并培养 15-60 分钟。 （如果需要进行动力学研究，可以按一定时间间隔获取 405 nm 的读数）。
[注意：最佳培养时间可能因酶的含量而异。如果显色过快，可能需要稀释探针、抗体或碱性磷酸酶标记的试剂。]
6.添加100 µl 1 N NaOH终止反应。
7.读取 405 nm 处的吸光度。
注：时间、试剂体积和温度的变化可能需要用户进一步标准化。
法律資訊
CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
TWEEN is a registered trademark of Croda International PLC
儲存類別代碼
12 - Non Combustible Liquids
水污染物質分類（WGK）
WGK 3
閃點（°F）
Not applicable
閃點（°C）
Not applicable
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