04693132001
Roche
Cocktail di inibitori delle proteasi cOmplete™ senza EDTA
Tablets provided in EASYpacks
Sinonimo/i:
inibitore delle proteasi
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About This Item
Codice UNSPSC:
12352204
NACRES:
NA.21
Prodotti consigliati
Forma fisica
tablet
Confezionamento
pkg of 20 tablets (individually packed in foil blister packs)
Produttore/marchio commerciale
Roche
Solubilità
aqueous buffer: soluble
water: soluble
Assorbimento
0.08 at 280 nm
Temperatura di conservazione
2-8°C
Descrizione generale
Le compresse di inibitori delle proteasi cOmplete senza EDTA inibiscono un ampio spettro di proteasi a serina e a cisteina. Contrariamente ad altre compresse cOmplete, non contengono EDTA o altri agenti chelanti, come ad esempio l′EGTA, e lasciano inalterate la stabilità e la funzionalità delle proteine metallo-dipendenti. Il loro utilizzo facilita inoltre la purificazione per affinità delle proteine di fusione con tag di poli-His mediante IMAC (cromatografia di affinità con ioni metallici immobilizzati) in quanto evita la dialisi
Grazie alla loro composizione ottimizzata, le compresse mostrano eccellenti effetti di inibizione delle proteasi a serina e a cisteina e sono efficaci nel preservare le proteineisolate da tessuti animali e vegetali, nonché da lieviti e batteri. Le compresse cOmplete senza EDTA contengono inibitori delle proteasi sia irreversibili che reversibili. Non inibiscono le proteasi aspartiche e le metalloproteasi
Le compresse cOmplete senza EDTA sono identiche alle compresse cOmplete, l′unica differenza è che non contengono EDTA o altri agenti chelanti (ad es. EGTA).
Grazie alla loro composizione ottimizzata, le compresse mostrano eccellenti effetti di inibizione delle proteasi a serina e a cisteina e sono efficaci nel preservare le proteineisolate da tessuti animali e vegetali, nonché da lieviti e batteri. Le compresse cOmplete senza EDTA contengono inibitori delle proteasi sia irreversibili che reversibili. Non inibiscono le proteasi aspartiche e le metalloproteasi
Le compresse cOmplete senza EDTA sono identiche alle compresse cOmplete, l′unica differenza è che non contengono EDTA o altri agenti chelanti (ad es. EGTA).
Specificità
Miscela di vari inibitori di proteasi. Per l′inibizione di proteasi a serina e cisteina ma non di metalloproteasi.
Applicazioni
Il cocktail cOmplete™ senza EDTA inibisce efficacemente le proteasi a serina e cisteina in estratti ottenuti da cellule batteriche, di lievito, vegetali e animali. Non inibisce le metalloproteasi e le proteasi aspartiche.
Si utilizzano le compresse cOmplete senza EDTA per inibire l′attività proteolitica in grandi volumi (fino a 50 mL) nei casi in cui la presenza di EDTA potrebbe interferire con la stabilità delle proteine (ad es., proteine contenenti metalli) o con le analisi successive. Poiché l′EDTA interferisce con l′IMAC (cromatografia di affinità con ioni metallici immobilizzati), per l′isolamento di proteine di fusione marcate con poli-His è consigliabile l′utilizzo delle compresse cOmplete senza EDTA.
Se si lavora con volumi più piccoli (fino a 10 mL), raccomandiamo l′impiego delle compresse cOmplete, Mini, senza EDTA.
Una compressa cOmplete senza EDTA è stata aggiunta per 50 mL di soluzione di incubazione. L′attività proteolitica è stata determinata con il substrato per proteasi Roche Universal (marcato con caseina e resorufina). Nei casi in cui sono necessarie estrazioni o isolamenti con un solo passaggio entro il range del pH acido, è sufficiente aggiungere la pepstatina insieme alle compresse cOmplete senza EDTA per assicurare l′inibizione delle proteasi (acide) aspartiche. Tutti gli esperimenti sono stati condotti a una temperatura compresa tra +15 e +25 °C.
Si utilizzano le compresse cOmplete senza EDTA per inibire l′attività proteolitica in grandi volumi (fino a 50 mL) nei casi in cui la presenza di EDTA potrebbe interferire con la stabilità delle proteine (ad es., proteine contenenti metalli) o con le analisi successive. Poiché l′EDTA interferisce con l′IMAC (cromatografia di affinità con ioni metallici immobilizzati), per l′isolamento di proteine di fusione marcate con poli-His è consigliabile l′utilizzo delle compresse cOmplete senza EDTA.
Se si lavora con volumi più piccoli (fino a 10 mL), raccomandiamo l′impiego delle compresse cOmplete, Mini, senza EDTA.
Una compressa cOmplete senza EDTA è stata aggiunta per 50 mL di soluzione di incubazione. L′attività proteolitica è stata determinata con il substrato per proteasi Roche Universal (marcato con caseina e resorufina). Nei casi in cui sono necessarie estrazioni o isolamenti con un solo passaggio entro il range del pH acido, è sufficiente aggiungere la pepstatina insieme alle compresse cOmplete senza EDTA per assicurare l′inibizione delle proteasi (acide) aspartiche. Tutti gli esperimenti sono stati condotti a una temperatura compresa tra +15 e +25 °C.
Il cocktail di inibitori delle proteasi cOmplete™ senza EDTA è stato utilizzato come componente in
- tampone di lisi per la lisi di cellule embrionali umane di rene (HEK293T) transfettate e tampone di lisi per saggio di radioimmunoprecipitazione (RIPA) per l′omogeneizzazione di embrioni di pesce zebra
- reagente per estrazione di proteine tissutali (T-PER) per l′omogeneizzazione di tessuti di ippocampo
- tampone di lisi con sodio dodecil solfato (SDS) per la lisi degli epatociti
Caratteristiche e vantaggi
Le compresse di inibitori della proteasi cOmplete consentono di proteggere le proteine da un'ampia gamma di proteasi. Se non inibita, in pochi minuti l'attività proteolitica può degradare la proteina isolata con giorni di lavoro. Ognuna di queste comode compresse solubili in acqua contiene una miscela di inibitori delle proteasi che inibisce l'attività proteolitica nella maggior parte delle cellule: animali, vegetali, lieviti e batteri. Non richiedono di essere pesate o dosate, assicurando così risultati riproducibili.
- Pratiche: basta spingere le compresse a dissoluzione rapida attraverso la lamina della confezione EASYpack facendole cadere nel tampone.
- Protezione completa: preservano istantaneamente le proteine da un'ampia gamma di proteasi.
- Versatili: assicurano la protezione delle proteine negli estratti ottenuti da quasi tutti i tipi di tessuti o cellule: animali, vegetali, lieviti, batteri e funghi.
- Sicure: queste compresse sono atossiche e non presentano rischi per l′operatore e per chi che lo circonda.
- Adatte all′uso per purificazione con IMAC: con la resina per purificazione cOmplete His-Tag si purificano le proteine con etichetta di poli-istidina
Confezionamento
20 compresse di cocktail di inibitori delle proteasi cOmplete confezionate singolarmente in blister di alluminio.
Componenti
Miscela proprietaria di diversi inibitori delle proteasi con ampia specificità inibitoria.
Qualità
Prestazioni analizzate su estratto pancreatico.
Stato fisico
Compresse in confezioni blister di alluminio
Nota sulla preparazione
Concentrazione di lavoro: 1 compressa per 50 mL di soluzione di estrazione
Soluzione di lavoro: Manipolazione
Spingere delicatamente la compressa attraverso la lamina della confezione con la base del pollice (non con l′unghia) per evitare la rottura delle compresse.
Preparazione della soluzione di lavoro
Una compressa cOmplete senza EDTA è sufficiente per inibire l′attività proteolitica in 50 mL di soluzione di estrazione. In caso di attività proteolitica molto elevata, è consigliabile aumentare la dose a una compressa per 25 mL di tampone di estrazione. Le compresse possono essere aggiunte direttamente al tampone di estrazione. In alternativa, è possibile preparare una soluzione madre (conc. 25 X).
Preparazione della soluzione madre (conc. 25 X):
Sciogliere una compressa di inibitore delle proteasi cOmplete senza EDTA in 2 mL di acqua distillata o in 2 mL di tampone fosfato 100 mM, pH 7,0.
Condizioni di conservazione (soluzione di lavoro): è possibile conservare la soluzione madre a 2 - 8 °C per 1-2 settimane o per almeno 12 settimane tra i -15 e i -25 °C.
Soluzione di lavoro: Manipolazione
Spingere delicatamente la compressa attraverso la lamina della confezione con la base del pollice (non con l′unghia) per evitare la rottura delle compresse.
Preparazione della soluzione di lavoro
Una compressa cOmplete senza EDTA è sufficiente per inibire l′attività proteolitica in 50 mL di soluzione di estrazione. In caso di attività proteolitica molto elevata, è consigliabile aumentare la dose a una compressa per 25 mL di tampone di estrazione. Le compresse possono essere aggiunte direttamente al tampone di estrazione. In alternativa, è possibile preparare una soluzione madre (conc. 25 X).
Preparazione della soluzione madre (conc. 25 X):
Sciogliere una compressa di inibitore delle proteasi cOmplete senza EDTA in 2 mL di acqua distillata o in 2 mL di tampone fosfato 100 mM, pH 7,0.
Condizioni di conservazione (soluzione di lavoro): è possibile conservare la soluzione madre a 2 - 8 °C per 1-2 settimane o per almeno 12 settimane tra i -15 e i -25 °C.
Ricostituzione
Solubili in tamponi acquosi, si possono aggiungere direttamente al tampone di estrazione. In alternativa, preparare una soluzione madre 25X in 2 mL di acqua o di tampone fosfato 100 mM, pH 7,0. La soluzione madre è stabile per 1-2 settimane a 2-8 °C o per almeno 12 settimane tra -15 e -25 °C; può essere utilizzata anche in soluzioni contenenti tioli a 15-25 °C.
Stoccaggio e stabilità
Conservare a una temperatura compresa tra 2 e 8 °C (è possibile anche la conservazione tra -15 e -25 °C).
Altre note
Solo per ricerche life science. Non usare in procedure diagnostiche.
Note legali
cOmplete is a trademark of Roche
Avvertenze
Danger
Indicazioni di pericolo
Classi di pericolo
Eye Dam. 1 - Skin Corr. 1B
Codice della classe di stoccaggio
8A - Combustible, corrosive hazardous materials
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 2
Punto d’infiammabilità (°F)
does not flash
Punto d’infiammabilità (°C)
does not flash
Certificati d'analisi (COA)
Cerca il Certificati d'analisi (COA) digitando il numero di lotto/batch corrispondente. I numeri di lotto o di batch sono stampati sull'etichetta dei prodotti dopo la parola ‘Lotto’ o ‘Batch’.
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