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Benzonase^® Nuclease HC

Purity > 99%, Effective Viscosity Reduction and Removal of Nucleic Acids from protein solutions

• Sinonimo/i: Endonucleasi
• Numero CAS: 9025-65-4
• Classificazione EC (Enzyme Commission): 3.1.30.2 (BRENDA, IUBMB)
• Numero MDL: MFCD00131010
• Codice UNSPSC: 12352202
• NACRES: NA.54

Proprietà

• product name: Nucleasi Benzonase^® HC, purezza > 99%, Effective Viscosity Reduction and Removal of Nucleic Acids from protein solutions
• Origine biologica: Serratia marcescens
• Livello qualitativo: 100
• Ricombinante: expressed in E. coli
• Saggio: >99% (SDS-PAGE)
• Forma fisica: buffered aqueous glycerol solution
• Produttore/marchio commerciale: Novagen^®
• Condizioni di stoccaggio: OK to freeze
• Concentrazione: ≥250 units/μL
• Impurezze: <0.25 EU/kU Total endotoxin
• applicazioni: research use
• Condizioni di spedizione: wet ice
• Temperatura di conservazione: −20°C

Descrizione

Descrizione generale

La nucleasi Benzonase^® è un'endonucleasi geneticamente modificata prodotta da Serratia marcescens. Degrada tutte le forme di DNA ed RNA (a singolo o doppio filamento, lineare e circolare) mentre è priva di attività proteolitica. È efficace in un′ampia gamma di condizioni e possiede un′attività specifica straordinariamente elevata. L′enzima digerisce completamente gli acidi nucleici a oligonucleotidi 5′-monofosfato lunghi 2-5 basi (al di sotto del limite di ibridazione), condizione ideale per la rimozione degli acidi nucleici dalle proteine ricombinanti, in conformità alle linee guida della FDA per la contaminazione con acidi nucleici. La capacità della Benzonase di idrolizzare rapidamente gli acidi nucleici la rende un enzima eccellente per la riduzione della viscosità, al fine di ridurre il tempo di processamento ed aumentare la resa proteica. Per esempio, l′enzima è compatibile con i reagenti per l′estrazione delle proteine BugBuster e PopCulture e può quindi essere aggiunto a tali reagenti per eliminare la viscosità e rimuovere gli acidi nucleici dagli estratti di E. coli.

L′enzima è costituito da due subunità da 30 kDa ciascuna. Agisce entro un intervallo di pH tra 6 e 10 e a temperature tra 0 e 42 °C e per l′attivazione necessita di di Mg²⁺ 1-2 mM. L′enzima è attivo anche in presenza di detergenti ionici e non ionici, agenti riducenti, PMSF (1 mM), EDTA (1 mM) e urea (l′attività relativa dipende da condizioni specifiche). L′attività è inibita da cationi monovalenti > 150 mM, fosfato > 100 mM, solfato di ammonio > 100 mM o da cloridrato di guanidina > 100 mM.

La nucleasi Benzonase è disponibile in grado ultrapuro (> 99% con SDS-PAGE) e puro (> 90%) alla concentrazione standard di 25-29 U/µL e in concentrazione elevata (HC) di 250 U/µL. Entrambe le preparazioni sono prive di proteasi rilevabili e hanno un′attività specifica > 1 × 10⁶ U/mg di proteina. Il grado di purezza > 99% viene analizzato per la presenza di endotossine e contiene <0.25 EU/1000 units. The product is suppliedas a 0.2 µm filtered solution in 50% glycerol.Store at -20°C.

Total endotoxin:<0.25 EU/1,000 units.Purity: > 0,25 EU/1.000 unità.

Applicazioni

Utilizzato per rimuovere gli acidi nucleici dai campioni di proteine.

Azioni biochim/fisiol

Digerisce DNA ed RNA nativi o denaturati con calore.

Attenzione

Tossicità: normale manipolazione (A)

Definizione di unità

Un′unità è definita come la quantità di enzima che provoca un ΔA₂₆₀ di 1,0 in 30 minuti, che corrisponde alla digestione completa di 37 µg di DNA.

Note legali

Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 10 - Combustible liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 2