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E1014

Millipore

Nucleasi® Benzonase

≥250 units/μL, ≥90% (SDS-PAGE), recombinant, expressed in E. coli, buffered aqueous glycerol solution

Sinonimo/i:

Endonucleasi

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About This Item

Numero CAS:
Classificazione EC (Enzyme Commission):
Numero MDL:
Codice UNSPSC:
12352204
NACRES:
NA.54

Origine biologica

Serratia marcescens

Livello qualitativo

Ricombinante

expressed in E. coli

Saggio

≥90% (SDS-PAGE)

Forma fisica

buffered aqueous glycerol solution

PM

30 kDa

Concentrazione

≥250 units/μL

applicazioni

research use

Attività estranea

protease, essentially free

Condizioni di spedizione

wet ice

Temperatura di conservazione

−20°C

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Descrizione generale

Benzonase® è un'endonucleasi geneticamente modificata, altamente efficiente, estratta da Serratia marcescens. Questa proteina dimerica caratterizzata da due ponti disolfuro essenziali è in grado di attaccare e degradare tutte le forme di DNA e RNA (a singolo o doppio filamento, lineare e circolare) ed è efficace in una vasta gamma di condizioni operative. La nucleasi Benzonase® è in grado di rimuovere gli acidi nucleici e migliorare la purezza e la qualità dei campioni di proteine.

Applicazioni

La nucleasi Benzonase® è stata impiegata: come componente in un tampone di lisi C ghiacciato per la digestione di DNA e  RNA per facilitare il rilascio completo di tutte le proteine nucleari nella fase di immunoprecipitazione per liberare i complessi proteici dal nucleoplasma e dalla cromatinacome supplemento nel tampone RIPA per il frazionamento delle cellule SHSY5Y per l'immunoprecipitazione per rimuovere gli acidi nucleici residui dalle radici aortiche con il metodo della decellularizzazione
Utilizzato per rimuovere gli acidi nucleici dai campioni di proteine.

Azioni biochim/fisiol

La nucleasi Benzonase® può digerire completamente gli acidi nucleici a oligonucleotidi 5′-monofosfato lunghi 3-5 basi, caratteristica che la rende ideale per la rimozione degli acidi nucleici dalle proteine ricombinanti e per le applicazioni che richiedono la digestione completa degli acidi nucleici. Oltre a ridurre la viscosità degli estratti proteici e a evitare la formazione di aggregati di cellule, il pretrattamento dei campioni di proteine con la nucleasi Benzonase® può migliorare significativamente la risoluzione all'elettroforesi 2D su gel eliminando tutti gli acidi nucleici legati. Questo enzima versatile è in grado di digerire il DNA e l'RNA sia nella forma nativa che in quella denaturata al calore, al suo pH ottimale per l'attività enzimatica di 8,0-9,2. La nucleasi Benzonase® è efficace nel rimuovere il DNA dell'ospite nei campioni di microbioma. In molti casi, i campioni di microbioma (salivari o cutanei) contengono un'elevata percentuale di DNA dell'ospite che interferisce con i risultati delle applicazioni a valle. I nostri esperti hanno dimostrato che la riduzione del DNA dell'ospite abbassa i costi del sequenziamento mentre arricchisce e migliora i dati. I dati sperimentali sono presentati nell'articolo tecnico - La nucleasi Benzonase® per i flussi operativi con il microbioma
Digerisce DNA ed RNA nativi o denaturati con calore.

Caratteristiche e vantaggi

  • Deplezione del DNA dell'ospite in campioni di microbioma.


    Digestione efficace degli acidi nucleici in diversi tipi di sequenze operative


  • Riduzione della viscosità durante l'estrazione delle proteine.

Definizione di unità

Un'unità rappresenta la quantità di enzima in grado di digerire il DNA di sperma di salmone sonicato a oligonucleotidi solubili in acido equivalenti a ΔA260 pari a 1,0 in 30 minuti a pH 8,0 e a 37 °C (volume di reazione 2,625 mL)

Stato fisico

Soluzione in glicerolo al 50% contenente Tris HCl 20 mM, pH 8,0, MgCl22 mM e NaCl 20 mM.

Note legali

La nucleasi Benzonase® è fornita da Merck KGaA, Darmstadt, Germania e/o dalle sue affiliate.
Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Codice della classe di stoccaggio

10 - Combustible liquids

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 1

Punto d’infiammabilità (°F)

Not applicable

Punto d’infiammabilità (°C)

Not applicable

Dispositivi di protezione individuale

Eyeshields, Gloves


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Articoli

This page lists nine frequently asked questions and answers about Benzonase® Nuclease.

The field of proteomics is continually looking for new ways to investigate protein dynamics within complex biological samples. Recently, many researchers have begun to use RNA interference (RNAi) as a method of manipulating protein levels within their samples, but the ability to accurately determine these protein amounts remains a challenge. Fortunately, over the past decade, the field of proteomics has witnessed significant advances in the area of mass spectrometry. These advances, both in instrumentation and methodology, are providing researchers with sensitive assays for both identification and quantification of proteins within complex samples. This discussion will highlight some of these methodologies, namely the use of Multiple Reaction Monitoring (MRM) and Protein-AQUA.

Il team dei nostri ricercatori vanta grande esperienza in tutte le aree della ricerca quali Life Science, scienza dei materiali, sintesi chimica, cromatografia, discipline analitiche, ecc..

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