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H6908

Sigma-Aldrich

Anti-HA

affinity isolated antibody, buffered aqueous solution

Sinônimo(s):

Anti-HA

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About This Item

Número MDL:
Código UNSPSC:
12352203
NACRES:
NA.43

fonte biológica

rabbit

Nível de qualidade

conjugado

unconjugated

forma do anticorpo

affinity isolated antibody

tipo de produto de anticorpo

primary antibodies

clone

polyclonal

forma

buffered aqueous solution

técnica(s)

immunoprecipitation (IP): 2.5-4 μg/test using HA-tagged fusion protein from cell lysates
indirect immunofluorescence: 10-20 μg/mL using HA-tagged fusion protein transfected cells
western blot: 0.5-0.8 μg/mL using HA-tagged fusion protein transfected cell extracts

aplicação(ões)

research pathology

Condições de expedição

dry ice

temperatura de armazenamento

−20°C

modificação pós-traducional do alvo

unmodified

Descrição geral

O gene da hemaglutinina (HA) foi mapeado no segmento 4 do genoma viral de influenza B. A HA é um antígeno dominante que está presente na superfície do vírus influenza. A HA é um homotrímero, no qual cada monômero é produzido como um único polipeptídeo. Esse monômero é clivado em duas subunidades, HA1 e HA2, pela protease do hospedeiro.
A proteína hemaglutinina de influenza é um nonapeptídeo derivado da importante glicoproteína spike da membrana do vírus da influenza humano. Essa glicoproteína específica da cepa é um homotrímero de monômeros de 84 kDa. Cada monômero contém duas subunidades ligadas por pontes bissulfeto: HA1 e HA2.
O anti-HA é produzido em coelho usando um peptídeo sintético que corresponde a resíduos aminoácidos de hemaglutinina (HA) de influenza humana conjugada com KLH. O anticorpo é purificado por afinidade no peptídeo imunizante imobilizado.

O anticorpo anti-HA é específico para proteínas de fusão etiquetadas com HA na terminação N ou C. O produto pode detectar bandas de reação cruzada em determinadas células de mamíferos. O peptídeo HA imunizante (produto N.º I2149) inibe especificamente a coloração da banda de proteína etiquetada com HA.

Especificidade

O anticorpo anti-HA é específico para proteínas de fusão etiquetadas com HA na terminação N ou C.
O anticorpo reage especificamente com proteínas de fusão com etiqueta HA por immunoblotting e imunoprecipitação.

Imunogênio

Peptídeo sintético que corresponde a resíduos de aminoácidos de hemaglutinina (HA) do vírus da influenza humano, conhecido como etiqueta de HA, conjugado a KLH.

Aplicação

O anticorpo anti-HA é adequado para uso em imunoprecipitação e western blot.
Ele também é adequado para imunofluorescência indireta (10-20μg/ml usando células transfectadas com proteínas de fusão etiquetadas com HA), imunoprecipitação (2,5-4 μg/teste usando proteínas de fusão etiquetadas com HA de lisados celulares) e western blot (0,5-0,8 μg/ml usando extratos de células transfectadas com proteínas de fusão etiquetadas com HA).

Ações bioquímicas/fisiológicas

A hemaglutinina (HA) é uma glicoproteína do vírus influenza que regula as funções de fusão de membrana e ligação a receptores durante a entrada e infecção por vírus. O vírus entra na célula hospedeira por endocitose e fusão sucessiva à membrana mediada pelo antígeno HA. A HA tem um papel essencial na patogênese viral e na resposta do hospedeiro à infecção viral.
O gene HA frequentemente é usado como etiqueta de afinidade em proteínas-alvo de sistemas de vetor de expressão recombinante. As proteínas etiquetadas com HA produzidas por esses sistemas geram produtos de fusão estáveis que não interferem na função nem na distribuição das proteínas-alvo. O anticorpo contra HA pode detectar bandas de reação cruzada em determinadas células de mamíferos. O peptídeo HA imunizante (produto N.º I2149) inibe especificamente a coloração da banda de proteína etiquetada com HA. A sequência de ácidos nucleicos que codifica o peptídeo HA foi incorporada a diversos plasmídeos de expressão adjacentes ao sítio de clonagem, possibilitando assim a clonagem e a expressão de proteínas de fusão etiquetadas com HA. Essas proteínas de fusão podem ser expressas nas células de diversos organismos: bactérias, levedura, insetos e mamíferos. Na proteína de fusão, a sequência de HA pode funcionar com um alvo de reconhecimento para anticorpos específicos, permitindo assim a detecção, localização subcelular, caracterização, quantificação, análise funcional e purificação por afinidade de proteínas etiquetadas com HA e proteínas ligadas associadas. A inserção do epítopo de HA em diferentes regiões de uma proteína celular, seguida pela avaliação da imunorreatividade do epítopo em células intactas e permeabilizadas, é útil para estudar os níveis de expressão celular, a topologia e a atividade funcional da proteína etiquetada. A detecção mediada por anticorpo da etiqueta de HA elimina a necessidade de realizar o demorado processo de gerar anticorpos específicos para proteínas recém-identificadas, em baixa quantidade, instáveis, difíceis de purificar, com reatividade cruzada ou pouco imunogênicas.

forma física

Solução em solução salina tamponada com fosfato 0,01 M, pH 7,4, contendo albumina sérica bovina 1% e azida sódica 15 mM

Armazenamento e estabilidade

Para uso contínuo, armazene a 2-8 °C por até um mês.
Para armazenamento prolongado, congele em alíquotas de trabalho. Não é recomendado congelar e descongelar repetidamente. Se houver leve turbidez após o armazenamento prolongado, clarifique a solução por centrifugação antes do uso. Soluções em diluição de trabalho devem ser descartadas se não forem usadas em 12 horas.

Exoneração de responsabilidade

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Código de classe de armazenamento

12 - Non Combustible Liquids

Classe de risco de água (WGK)

WGK 2

Ponto de fulgor (°F)

Not applicable

Ponto de fulgor (°C)

Not applicable


Certificados de análise (COA)

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J J Skehel et al.
Annual review of biochemistry, 69, 531-569 (2000-08-31)
Hemagglutinin (HA) is the receptor-binding and membrane fusion glycoprotein of influenza virus and the target for infectivity-neutralizing antibodies. The structures of three conformations of the ectodomain of the 1968 Hong Kong influenza virus HA have been determined by X-ray crystallography:
Proline isomerase Pin1 represses terminal differentiation and myocyte enhancer factor 2C function in skeletal muscle cells.
Magli A, et al
The Journal of Biological Chemistry, jbc-M110 (2010)
Daniel Sanghoon Shin et al.
Blood, 116(24), 5162-5169 (2010-09-02)
The proton-coupled folate transporter (PCFT; SLC46A1) mediates folate transport into enterocytes in the proximal small intestine; pcft loss-of-function mutations are the basis for hereditary folate malabsorption. The current study explored the roles of Asp residues in PCFT function. A novel
Maarten Hoogenkamp et al.
Blood, 114(2), 299-309 (2009-04-03)
At the cellular level, development progresses through successive regulatory states, each characterized by their specific gene expression profile. However, the molecular mechanisms regulating first the priming and then maintenance of gene expression within one developmental pathway are essentially unknown. The
Functional evaluation of Dent?s disease-causing mutations: implications for ClC-5 channel trafficking and internalization.
Ludwig M, et al.
Human Genetics, 117(2-3), 228-237 (2005)

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