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Sistema de PCR rica em GC

sufficient for ≤50 reactions, pkg of 100 U, optimum reaction temp. 72 °C

• Sinônimo(s): Sistema de PCR rica em GC, PCR | rica em GC
• Código UNSPSC: 41106300

Propriedades

• uso: sufficient for ≤50 reactions
• Nível de qualidade: 100
• embalagem: pkg of 100 U
• fabricante/nome comercial: Roche
• Parâmetros: 72 °C optimum reaction temp.
• técnica(s): PCR: suitable
• temperatura de armazenamento: −20°C

Descrição

Descrição geral

O sistema de PCR rica em GC é composto por uma mistura de enzimas de Taq DNA polimerase termoestável e Tgo DNA polimerase, uma enzima termoestável com atividade de revisão (exonuclease 3′-5′). Esta mistura de polimerases por si só tem um desempenho melhor que a Taq DNA polimerase em relação aos rendimentos, fidelidade e especificidade, além da possibilidade de amplificar fragmentos de até 5 kb de comprimento. O tampão de reação de PCR rica em GC, em combinação com a solução de resolução rica em GC incluída separadamente, permite amplificar moldes difíceis como alvos com alto teor de GC de forma muito eficiente. Recomenda-se clonagem TA. A mistura de enzimas produz mais fragmentos com extremidades "rombas" que a Taq DNA polimerase. A maioria dos produtos tem alças A únicas. Use 2 U para um PCR padrão de 50 μl.

Conteúdo

• Mistura de enzimas rica em GC, em tampão de armazenamento
• Tampão de reação rico em GC, concentrado 5x, com MgCl2 7,5 mM e DMSO
• Solução de resolução rica em GC, 5 M
• Solução-estoque de MgCl2, 25 mM
• Água, grau de PCR

Aplicação

O sistema de PCR rica em GC foi usado em análises semi‐quantitativas, de genotipagem, além de recuperação e clonagem da sequência do gene candidato com alto teor de GC.

O sistema de PCR rica em GC, uma mistura da Taq DNA polimerase e de uma polimerase de revisão, permite a amplificação de moldes que são difíceis ou impossíveis de amplificar com outras polimerases e outras misturas de polimerases. A melhor processividade da mistura e a exclusiva solução de resolução rica em GC se combinam para oferecer um desempenho excepcional, particularmente a partir de moldes problemáticos.
O sistema de PCR rica em GC também pode ser usado em aplicações de PCR padrão, fornecendo resultados melhores (maior rendimento, maior precisão) que a Taq DNA polimerase isoladamente.

Vantagens do sistema de PCR rica em GC:

• Acesso mais fácil a moldes difíceis, incluindo alvos com alto teor de GC e sequências repetitivas.
• Os reagentes, a solução de resolução rica em GC e água de grau para PCR são fornecidos.
• Amplificação de fragmentos de DNA até 5 kb.

Características e benefícios

A mistura de Taq DNA polimerase e uma polimerase de revisão amplifica moldes difíceis. A processividade aprimorada e a solução de resolução rica GC exclusiva proporcionam um desempenho superior.

• PCR
• Moldes difíceis de até 5 kb

Use o sistema de PCR rica em GC, dNTPack, com a mistura de nucleotídeos para PCR pronta para uso.

O sistema de PCR rica em GC é uma mistura de Taq DNA polimerase e uma polimerase de revisão para amplificar fragmentos de ácidos nucleicos mais longos. A solução rica em GC fornece uma solução para permitir a amplificação de todos os tipos de produtos de PCR difíceis.
Ao usar o tampão contendo magnésio fornecido, a concentração final de MgCl2 é 1,5 mM.

Embalagem

1 kit contendo 5 componentes

Qualidade

O sistema de PCR rica em GC é testado quanto à função, amplificando um fragmento genômico ApoE humano de 284 pb, usando os protocolos do sistema de PCR rica em GC

Definição da unidade

Atividade por volume: 2 U/μl

Nota de preparo

Concentração de trabalho: Concentração enzimática
A concentração enzimática ideal varia de 0,5 a 5 U por ensaio. Para 50 μl de PCR padrão, recomendamos usar 2 U da mistura enzimática.

Outras notas

Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.

Informações legais

O uso deste produto está coberto pela patente N.º 6.127.155 dos EUA e pelas reivindicações de patente correspondentes fora dos EUA.  A compra deste produto inclui imunidade limitada e intransferível contra processos judiciais relacionados às reivindicações das patentes supracitadas, para uso apenas desta quantidade de produto para fins de pesquisa interna do próprio comprador.  Nenhum direito nos termos de nenhum outro pedido de patente e nenhum direito a realizar serviços comerciais de nenhum tipo, incluindo sem limitações a apresentação dos resultados das atividades do comprador em troca de remuneração ou outra contraprestação comercial, é expresso explicitamente, por implicação ou preclusão.  Este produto destina-se apenas ao uso em pesquisa. Usos em diagnósticos humanos e veterinários nos termos dos pedidos de patente da Roche exigem uma licença separada da Roche.  Todos os usos, exceto para pesquisa interna e uso diagnóstico humano e veterinário, nos termos dos pedidos de patente da Roche, exigem uma licença separada da Thermo Fisher Scientific. Mais informações sobre a compra de licenças da Roche podem ser obtidas junto ao Licensing Department (Departamento de licenças) da Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, Califórnia 94588, EUA ou Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Alemanha.  Mais informações sobre a compra de licenças da Thermo Fisher Scientific podem ser obtidas junto ao Departamento de licenças (Licensing Department) da  Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, Califórnia 92008, EUA.

Somente componentes do kit

• GC-RICH Enzyme Mix, in storage buffer
• GC-RICH PCR Reaction Buffer, with 7.5 mM MgCl₂ and DMSO 5x concentrated
• GC-RICH Resolution Solution 5 M
• MgCl₂ Stock Solution 25 mM
• Water, PCR Grade

Informações de segurança

• Frases de perigo: H412
• Declarações de precaução: P273 - P501
• Classificações de perigo: Aquatic Chronic 3
• Código de classe de armazenamento: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe de risco de água (WGK): WGK 2
• Ponto de fulgor (°F): does not flash
• Ponto de fulgor (°C): does not flash