NS225
Kit de ensaio de formação de projeções de neuritos (1 µm)
The NS225 Neurite Outgrowth Assay Kit (1 μm) is based on the use of Millicell cell culture inserts (chambers) containing a permeable membrane with 1 μm pores at the base.
Sinônimo(s):
Ensaio de crescimento de neuritos
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About This Item
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Nível de qualidade
reatividade da espécie (prevista por homologia)
all
fabricante/nome comercial
Chemicon®
técnica(s)
cell based assay: suitable
método de detecção
colorimetric
Condições de expedição
wet ice
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Descrição geral
Aplicação O kit de ensaio de formação de projeções de neuritos NS225 (1 μm) da CHEMICON utiliza a tecnologia de inserto de cultura de tecido microporoso da Millipore e baseia-se no uso de insertos de cultura celular Millicell (câmaras) contendo uma membrana permeável com poros de 1 μm na base. Os insertos são projetados para caber em um recipiente receptor que, quando em uso, contém meios de diferenciação em contato com o fundo da membrana do inserto. As membranas permeáveis possibilitam a diferenciação entre neuritos e corpos celulares, pois os neuritos com suas projeções passam facilmente pelos poros, mas os corpos celulares não. Portanto, ao induzir os neuritos a atravessar esses poros da membrana, uma população purificada de neuritos pode ser encontrada na parte inferior da membrana, em posição distal em relação à superfície na qual os corpos celulares neurais são depositados. Este kit foi projetado especificamente e validado com células PC12. O diâmetro dos corpos de células PC12 é relativamente pequeno em comparação com o de muitos outros tipos celulares comumente usados em ensaios de formação de projeções de neuritos [5, 6, 7]. Como resultado, muitos corpos de células PC12 podem passar por poros maiores que 1 μm, mascarando significativamente os resultados do ensaio de formação de projeções de neuritos. O uso de um tamanho de poro de 1 μm reduz muito a interferência e melhora a relação sinal-ruído em estudos que utilizam células PC12. O uso deste tamanho de poro de 1 μm com tipos de células maiores que projetam neuritos de diâmetro maior, como, por exemplo, as células N1E-115, diminui muito o número de neuritos capazes de se projetar para a parte inferior da membrana e, por isso, não é recomendado. O ensaio é um sistema simples, eficiente e versátil para a determinação quantitativa de compostos que influenciam a formação e repulsão de neuritos. Com esse sistema, é possível rastrear inúmeros agentes biológicos e farmacológicos simultaneamente, avaliar diretamente funções dos receptores de adesão e orientação responsáveis pela projeção e repulsão dos neuritos, bem como analisar a função gênica em células transfectadas. O filtro microporoso possibilita a separação bioquímica e a purificação dos neuritos e corpos celulares para uma análise molecular detalhada da expressão de proteínas, processos de transdução de sinal e identificação de alvos de medicamentos que regulam os processos de formação de projeções ou de retração dos neuritos. Os reagentes e materiais fornecidos no kit de ensaio de formação de projeções de neuritos NS225 são suficientes para realizar 12 testes.
Aplicação
O kit de ensaio de formação de projeções de neuritos NS225 (1 μm) baseia-se no uso de insertos de cultura celular Millicell (câmaras) contendo uma membrana permeável com poros de 1 μm na base.
Componentes
Conjunto de placa para formação de projeções de neuritos, 1 µm: (N.º do item 2007254) 1 x placa de 24 poços contendo 12 x insertos suspensos Millicell com membranas com tamanho de poro de 1 µm.
Solução de coloração de neuritos: (N.º do item 90242) Um frasco de 20 ml.
Tampão de extração de coloração de neuritos: (N.º do item 90243) Um frasco de 20 ml.
Placa de ensaio de formação de projeções de neuritos: (N.º do item 2007255) Duas placas de 24 poços.
Cotonetes: (N.º do item 10202), 50 cotonetes.
Pinça: (N.º do item 10203) Uma cada.
Solução de coloração de neuritos: (N.º do item 90242) Um frasco de 20 ml.
Tampão de extração de coloração de neuritos: (N.º do item 90243) Um frasco de 20 ml.
Placa de ensaio de formação de projeções de neuritos: (N.º do item 2007255) Duas placas de 24 poços.
Cotonetes: (N.º do item 10202), 50 cotonetes.
Pinça: (N.º do item 10203) Uma cada.
Armazenamento e estabilidade
Quando armazenados a 2-8 °C, os componentes do kit são estáveis até a data de validade. Não congele nem exponha a temperaturas elevadas. Descarte todos os reagentes restantes após o prazo de validade.
Informações legais
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
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Palavra indicadora
Danger
Frases de perigo
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Artigos
Optimized cell based neurite outgrowth assays and reagents to study neuron function and development.
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