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NS225

Sigma-Aldrich

Kit de ensaio de formação de projeções de neuritos (1 µm)

The NS225 Neurite Outgrowth Assay Kit (1 μm) is based on the use of Millicell cell culture inserts (chambers) containing a permeable membrane with 1 μm pores at the base.

Sinônimo(s):

Ensaio de crescimento de neuritos

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About This Item

Código UNSPSC:
12352207
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.84

Nível de qualidade

reatividade da espécie (prevista por homologia)

all

fabricante/nome comercial

Chemicon®

técnica(s)

cell based assay: suitable

método de detecção

colorimetric

Condições de expedição

wet ice

Descrição geral

Aplicação O kit de ensaio de formação de projeções de neuritos NS225 (1 μm) da CHEMICON utiliza a tecnologia de inserto de cultura de tecido microporoso da Millipore e baseia-se no uso de insertos de cultura celular Millicell (câmaras) contendo uma membrana permeável com poros de 1 μm na base. Os insertos são projetados para caber em um recipiente receptor que, quando em uso, contém meios de diferenciação em contato com o fundo da membrana do inserto. As membranas permeáveis possibilitam a diferenciação entre neuritos e corpos celulares, pois os neuritos com suas projeções passam facilmente pelos poros, mas os corpos celulares não. Portanto, ao induzir os neuritos a atravessar esses poros da membrana, uma população purificada de neuritos pode ser encontrada na parte inferior da membrana, em posição distal em relação à superfície na qual os corpos celulares neurais são depositados. Este kit foi projetado especificamente e validado com células PC12. O diâmetro dos corpos de células PC12 é relativamente pequeno em comparação com o de muitos outros tipos celulares comumente usados em ensaios de formação de projeções de neuritos [5, 6, 7]. Como resultado, muitos corpos de células PC12 podem passar por poros maiores que 1 μm, mascarando significativamente os resultados do ensaio de formação de projeções de neuritos. O uso de um tamanho de poro de 1 μm reduz muito a interferência e melhora a relação sinal-ruído em estudos que utilizam células PC12. O uso deste tamanho de poro de 1 μm com tipos de células maiores que projetam neuritos de diâmetro maior, como, por exemplo, as células N1E-115, diminui muito o número de neuritos capazes de se projetar para a parte inferior da membrana e, por isso, não é recomendado. O ensaio é um sistema simples, eficiente e versátil para a determinação quantitativa de compostos que influenciam a formação e repulsão de neuritos. Com esse sistema, é possível rastrear inúmeros agentes biológicos e farmacológicos simultaneamente, avaliar diretamente funções dos receptores de adesão e orientação responsáveis pela projeção e repulsão dos neuritos, bem como analisar a função gênica em células transfectadas. O filtro microporoso possibilita a separação bioquímica e a purificação dos neuritos e corpos celulares para uma análise molecular detalhada da expressão de proteínas, processos de transdução de sinal e identificação de alvos de medicamentos que regulam os processos de formação de projeções ou de retração dos neuritos. Os reagentes e materiais fornecidos no kit de ensaio de formação de projeções de neuritos NS225 são suficientes para realizar 12 testes.

Aplicação

O kit de ensaio de formação de projeções de neuritos NS225 (1 μm) baseia-se no uso de insertos de cultura celular Millicell (câmaras) contendo uma membrana permeável com poros de 1 μm na base.

Componentes

Conjunto de placa para formação de projeções de neuritos, 1 µm: (N.º do item 2007254) 1 x placa de 24 poços contendo 12 x insertos suspensos Millicell com membranas com tamanho de poro de 1 µm.

Solução de coloração de neuritos: (N.º do item 90242) Um frasco de 20 ml.

Tampão de extração de coloração de neuritos: (N.º do item 90243) Um frasco de 20 ml.

Placa de ensaio de formação de projeções de neuritos: (N.º do item 2007255) Duas placas de 24 poços.

Cotonetes: (N.º do item 10202), 50 cotonetes.

Pinça: (N.º do item 10203) Uma cada.

Armazenamento e estabilidade

Quando armazenados a 2-8 °C, os componentes do kit são estáveis até a data de validade. Não congele nem exponha a temperaturas elevadas. Descarte todos os reagentes restantes após o prazo de validade.

Informações legais

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Exoneração de responsabilidade

Exceto quando indicado em contrário em nosso catálogo ou em outros documentos da empresa que acompanham o(s) produto(s), os nossos produtos destinam-se somente ao uso em pesquisa e não devem ser usados para qualquer outra finalidade, o que inclui, dentre outros, usos comerciais não autorizados, usos para diagnóstico in vitro, usos terapêuticos ex vivo ou in vivo, ou qualquer tipo de consumo ou aplicação em humanos ou animais.

Pictogramas

FlameExclamation mark

Palavra indicadora

Danger

Frases de perigo

Classificações de perigo

Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 2

Código de classe de armazenamento

3 - Flammable liquids


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Yue Tang et al.
Life sciences, 91(19-20), 951-958 (2012-09-25)
It is well known that neural stem/progenitor cells (NS/PC) are an ideal cell type for the treatment of central nervous system (CNS) disease. However, ethical problems have severely hampered fetal NS/PC from being widely used as a source for stem
D G Drubin et al.
The Journal of cell biology, 101(5 Pt 1), 1799-1807 (1985-11-01)
Nerve growth factor (NGF) regulates the microtubule-dependent extension and maintenance of axons by some peripheral neurons. We show here that one effect of NGF is to promote microtubule assembly during neurite outgrowth in PC12 cells. Though NGF causes an increase
P Lamoureux et al.
The Journal of cell biology, 110(1), 71-79 (1990-01-01)
Several groups have shown that PC12 will extend microtubule-containing neurites on extracellular matrix (ECM) with no lag period in the absence of nerve growth factor. This is in contrast to nerve growth factor (NGF)-induced neurite outgrowth that occurs with a
M T Filbin
Current biology : CB, 10(3), R100-R103 (2000-02-19)
Myelin is a potent inhibitor of axon regeneration, but has been viewed as just one of many factors that prevent regeneration after injury. So it comes as a surprise that immunization against myelin has been found to allow extensive axon
J Qiu et al.
Glia, 29(2), 166-174 (2000-01-14)
The lack of axonal regeneration in the adult mammalian CNS is due to both unfavorable environmental glial factors and the intrinsic neuronal state. Inhibitors associated with myelin and the glial scar have been extensively studies and it has been shown

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