11465007001
Roche
Kit de proliferação celular I (MTT)
Sinônimo(s):
mtt
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About This Item
Código UNSPSC:
12352200
Produtos recomendados
Formulário
liquid
Nível de qualidade
uso
sufficient for ≤2,500 tests
embalagem
pkg of 1 kit
fabricante/nome comercial
Roche
condição de armazenamento
protect from light
técnica(s)
tissue culture: suitable
λmax
550-600 nm
aplicação(ões)
cell analysis
detection
método de detecção
colorimetric
temperatura de armazenamento
−20°C
Descrição geral
O kit de proliferação celular I (MTT) é um ensaio colorimétrico para quantificação não radioativa de proliferação e viabilidade celular, bem como citotoxicidade. O material amostrado são células aderentes ou em suspensão cultivadas em microplacas de 96 poços.
Os ensaios colorimétricos analisam o número de células viáveis por meio da clivagem de sais de tetrazólio adicionados ao meio de cultura. Essa técnica não requer lavagem nem coleta de células, e todo o ensaio, desde a microcultura até a análise dos dados por um leitor de ELISA, é feito na mesma microplaca.
O MTT foi o primeiro sal de tetrazólio descrito. Ele é clivado em formazan pelas enzimas do retículo endoplasmático. A biorredução ocorre somente em células viáveis e está relacionada à produção de NAD(P)H por meio da glicólise. Portanto, a quantidade de corante formazan formado está diretamente correlacionada ao número de células metabolicamente ativas na cultura.
Ensaio colorimétrico (à base de MMT) para quantificação não radioativa da proliferação e viabilidade celular, bem como citotoxicidade.
Os ensaios colorimétricos analisam o número de células viáveis por meio da clivagem de sais de tetrazólio adicionados ao meio de cultura. Essa técnica não requer lavagem nem coleta de células, e todo o ensaio, desde a microcultura até a análise dos dados por um leitor de ELISA, é feito na mesma microplaca.
O MTT foi o primeiro sal de tetrazólio descrito. Ele é clivado em formazan pelas enzimas do retículo endoplasmático. A biorredução ocorre somente em células viáveis e está relacionada à produção de NAD(P)H por meio da glicólise. Portanto, a quantidade de corante formazan formado está diretamente correlacionada ao número de células metabolicamente ativas na cultura.
Ensaio colorimétrico (à base de MMT) para quantificação não radioativa da proliferação e viabilidade celular, bem como citotoxicidade.
Aplicação
O Kit de proliferação celular I (MTT) é usado para a quantificação não radioativa, espectrofotométrica da proliferação e viabilidade celular em populações de células usando um formato de placa de 96 poços. Ele pode ser utilizado para:
- Medição da proliferação celular em resposta a fatores de crescimento, citocinas, mitógenos e nutrientes.
- Análise de compostos citotóxicos e citostáticos, como medicamentos antineoplásicos e outros compostos farmacêuticos.
- Avaliação de anticorpos inibidores do crescimento e mediadores fisiológicos
- Teste de biocompatibilidade de várias estruturas poliméricas (scaffolds) usadas na engenharia de tecidos ósseos para crescimento de células ósseas
Características e benefícios
- Seguro e fácil: Elimine isótopos radioativos, etapas de lavagem e reagentes adicionais.
- Preciso: A absorbância obtida está fortemente correlacionada com o número de células.
- Sensível: Detecte baixos números de células.
- Rápido: Processe um grande número de amostras usando um leitor de ELISA de vários poços.
O ensaio se baseia na clivagem do sal de tetrazólio MTT na presença de um reagente de acoplamento de elétrons. O sal de formazan insolúvel em água produzido deve ser solubilizado em uma etapa adicional. As células cultivadas em placa de cultura de tecidos de 96 poços são incubadas com a solução de MTT por cerca de 4 horas. Após este período de incubação, forma-se um corante de formazan insolúvel em água. Após a solubilização, o corante formazan é quantificado usando um espectrofotômetro de varredura de vários poços (leitor de ELISA). A absorbância medida está diretamente correlacionada com o número de células viáveis.
Ensaios de proliferação e viabilidade celular são particularmente importantes para aplicações de rotina em biologia celular. Os sais de tetrazólio (p. ex., MTT, XTT, WST-1) são particularmente úteis para esse tipo de análise. Os sais de tetrazólio são clivados em formazan pelo sistema de redutase de succinato-tetrazólio (EC 1.3.99.1), que pertence à cadeia respiratória da mitocôndria e só é ativo em células metabolicamente intactas (vide abaixo).
Ensaios de proliferação e viabilidade celular são particularmente importantes para aplicações de rotina em biologia celular. Os sais de tetrazólio (p. ex., MTT, XTT, WST-1) são particularmente úteis para esse tipo de análise. Os sais de tetrazólio são clivados em formazan pelo sistema de redutase de succinato-tetrazólio (EC 1.3.99.1), que pertence à cadeia respiratória da mitocôndria e só é ativo em células metabolicamente intactas (vide abaixo).
Embalagem
1 kit contendo 2 componentes.
Nota de preparo
Condições de armazenamento (solução de trabalho): 2 ºC a 8 °C
Após o descongelamento, os reagentes de marcação de MTT podem ser armazenados ao abrigo da luz a 2 ºC a 8 °C por até 4 semanas. Neste caso, recomenda-se filtrar o reagente através de uma membrana de tamanho de poro de 0,2 μm.
Após o descongelamento, os reagentes de marcação de MTT podem ser armazenados ao abrigo da luz a 2 ºC a 8 °C por até 4 semanas. Neste caso, recomenda-se filtrar o reagente através de uma membrana de tamanho de poro de 0,2 μm.
Somente componentes do kit
Nº do produto
Descrição
- MTT Labeling Reagent
- Solubilization Solution
produto relacionado
Código de classe de armazenamento
12 - Non Combustible Liquids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 2
Ponto de fulgor (°F)
does not flash
Ponto de fulgor (°C)
does not flash
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Cell based assays for cell proliferation (BrdU, MTT, WST1), cell viability and cytotoxicity experiments for applications in cancer, neuroscience and stem cell research.
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