MAB351
Anticorpo antiglutamato descarboxilase, isoforma de 65 kDa, clone GAD-6
clone GAD-6, Chemicon®, from mouse
Sinônimo(s):
GAD65
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About This Item
Código UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Produtos recomendados
fonte biológica
mouse
Nível de qualidade
forma do anticorpo
purified immunoglobulin
tipo de produto de anticorpo
primary antibodies
clone
GAD-6, monoclonal
reatividade de espécies
rat, human
fabricante/nome comercial
Chemicon®
técnica(s)
immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable
Isotipo
IgG2a
nº de adesão NCBI
nº de adesão UniProt
Condições de expedição
dry ice
modificação pós-traducional do alvo
unmodified
Informações sobre genes
human ... GAD2(2572)
Descrição geral
Ácido glutâmico descarboxilase (GAD; E.C. 4.1.1.15) é a enzima responsável pela conversão do ácido glutâmico em ácido gama-aminobutírico (GABA), o principal transmissor inibitório nas regiões cerebrais superiores e hormônio parácrino putativo nas ilhotas pancreáticas. Duas formas moleculares de GAD (65 kDa e 67 kDa, 64% de identidade de a.a. entre as isoformas) são altamente conservadas e ambas são expressas no SNC, células das ilhotas pancreáticas, testículos, ovidutos e ovário. As isoformas são distribuídas regionalmente no citoplasma nos cérebros de ratos e camundongos (Sheikh, S. et al. 1999). GAD65 é uma proteína anfifílica, ancorada à membrana (585 a.a.), codificada no cromossomo humano 10 e é responsável pela produção vesicular de GABA. GAD67 é citoplasmática (594 a.a.), codificada no cromossomo 2 e parece ser responsável por uma produção citoplasmática significativa de GABA. A expressão de GAD muda durante o desenvolvimento neural na medula espinhal de ratos. GAD65 é expressa transitoriamente nos axônios comissurais por volta de E13, mas sua expressão diminui no dia seguinte, enquanto a expressão de GAD67 aumenta principalmente no soma desses neurônios (Phelps, P. et al. 1999). No pâncreas de rato maduro, GAD65 e GAD67 parecem estar localizadas diferencialmente, a GAD65 principalmente nas células beta que contêm insulina e a GAD67 nas células (A) que contêm glucagon (Li, L. et al. 1995). A expressão de GAD67 parece ser particularmente plástica e pode mudar em resposta à manipulação experimental (por exemplo, estimulação ou transecção neuronal) ou progressão de doenças e doenças emergentes, como esquizofrenia (Volk et al., 2000). A localização concomitante das duas isoformas de GAD também apresenta alterações nas distribuições de GAD65/GAD67 correlacionadas a alguns estados patológicos, como diabetes mellitus insulinodependente e síndrome de Stiff-Man.
Especificidade
Reconhece a isoforma de peso molecular mais baixo das duas isoformas de GAD identificadas no cérebro (Gottlieb, et al., 1986; Chang & Gottlieb, 1988). Este anticorpo monclonal pode ser utilizado para localização imuno-histoquímica no cérebro ou no pâncreas. O anti-GAD também tem sido usado para marcar o GAD purificado em Western blots (Chang & Gottlieb, 1988).
Imunogênio
Descarboxilase de ácido glutâmico de cérebro de rato purificada.
Aplicação
Anticorpo anti-GAD. A isoforma de 65 kDa, clone GAD-6 detecta nível de glutamato descarboxilase & foi publicado & e validada para uso em IH & WB.
Categoria de pesquisa
Neurociência
Neurociência
Imuno-histoquímica: (1 μg/ml *Ver protocolo)
Western blot
As diluições de trabalho ideais devem ser determinadas pelo usuário final.
NOTAS DE APLICAÇÃO PARA MAB351
IMUNO-HISTOQUÍMICA
1) Perfundir ratos com tampão fosfato de 100 mM, pH 7,4 contendo 1% de paraformaldeído, 0,34% de L-lisina e 0,05% de m-periodato (1% de PLP).
2) Cérebros pós-fixados em PLP a 1% durante 1-2 horas.
3) Transferir os cérebros para tampão fosfato de 100 mM contendo 30% de sacarose e agitar suavemente em uma plataforma agitadora a +4°C por 48-60 horas.
4) Usando uma lâmina com micrótomo, corte seções de 30 mm de cerebelo congelado. À medida que as seções são cortadas, colete-as em um frasco de tampão fosfato frio de 100 mM.
5) Incube secções em PBS contendo 1,5% de soro normal e 0,2% de Triton X-100 durante 30 minutos.
6) Em uma plataforma agitadora, incube seções com MAB351 (diluído em 1 μg/ml em PBS contendo 1,5% de soro normal e 0,2% de Triton X-100) por 12-36 horas a +4°C.
7) Em uma plataforma agitadora, enxágue as seções oito vezes, 10-15 minutos por enxágue, em PBS.
8) Detecte com sistema de detecção de anticorpos secundários padrão (PAP, ABC, etc.).
9) Monte as seções, desidrate e aplique lamelas.
Western blot
As diluições de trabalho ideais devem ser determinadas pelo usuário final.
NOTAS DE APLICAÇÃO PARA MAB351
IMUNO-HISTOQUÍMICA
1) Perfundir ratos com tampão fosfato de 100 mM, pH 7,4 contendo 1% de paraformaldeído, 0,34% de L-lisina e 0,05% de m-periodato (1% de PLP).
2) Cérebros pós-fixados em PLP a 1% durante 1-2 horas.
3) Transferir os cérebros para tampão fosfato de 100 mM contendo 30% de sacarose e agitar suavemente em uma plataforma agitadora a +4°C por 48-60 horas.
4) Usando uma lâmina com micrótomo, corte seções de 30 mm de cerebelo congelado. À medida que as seções são cortadas, colete-as em um frasco de tampão fosfato frio de 100 mM.
5) Incube secções em PBS contendo 1,5% de soro normal e 0,2% de Triton X-100 durante 30 minutos.
6) Em uma plataforma agitadora, incube seções com MAB351 (diluído em 1 μg/ml em PBS contendo 1,5% de soro normal e 0,2% de Triton X-100) por 12-36 horas a +4°C.
7) Em uma plataforma agitadora, enxágue as seções oito vezes, 10-15 minutos por enxágue, em PBS.
8) Detecte com sistema de detecção de anticorpos secundários padrão (PAP, ABC, etc.).
9) Monte as seções, desidrate e aplique lamelas.
Subcategoria de pesquisa
Neurotransmissores &e receptores
Neurotransmissores &e receptores
Descrição-alvo
65 kDa
forma física
Formato: Purificado
Imunoglobulina purificada. Liofilizado a partir de tampão fosfato de potássio 10 mM, cloreto de sódio 70 M, pH 7,4, com 0,02% de azida sódica. Reconstitua com 100 μl de água(1 mg/ml).
Purificado com proteína A
Armazenamento e estabilidade
Manter o material liofilizado a -20 °C por até 12 meses. Após a reconstituição, manter congelado a -20°C em alíquotas não diluídas por até seis meses. Evite ciclos repetidos de congelamento/descongelamento.
Nota de análise
Controle
Tecido cerebral de rato,
lisados de cérebro de humano
Tecido cerebral de rato,
lisados de cérebro de humano
Outras notas
Concentração: Vide a concentração específica do lote no certificado de análise.
Informações legais
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Exoneração de responsabilidade
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recomendado
Nº do produto
Descrição
Preços
Palavra indicadora
Warning
Frases de perigo
Declarações de precaução
Classificações de perigo
Acute Tox. 4 Dermal - Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3
Código de classe de armazenamento
13 - Non Combustible Solids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 3
Ponto de fulgor (°F)
Not applicable
Ponto de fulgor (°C)
Not applicable
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Differential activation of neuronal cell types in the basolateral amygdala by corticotropin releasing factor.
Rostkowski, AB; Leitermann, RJ; Urban, JH
Neuropeptides null
Synaptic reorganisation of the medial amygdala during puberty.
Cooke BM
Journal of Neuroendocrinology null
Thalamocortical dysfunction and thalamic injury after asphyxial cardiac arrest in developing rats.
Shoykhet, M; Simons, DJ; Alexander, H; Hosler, C; Kochanek, PM; Clark, RS
The Journal of Neuroscience null
Quantitative effects produced by modifications of neuronal activity on the size of GABAA receptor clusters in hippocampal slice cultures.
Serge Marty, Rosine Wehrle, Jean-Marc Fritschy, Constantino Sotelo
The European Journal of Neuroscience null
Quantitative analysis of ER alpha and GAD colocalization in the hippocampus of the adult female rat.
S A Hart, J D Patton, C S Woolley, S A Hart, J D Patton, C S Woolley
The Journal of Comparative Neurology null
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