Płodowa surowica bydlęca (FBS) - co należy wiedzieć?
- Jak obchodzić się z surowicą w laboratorium
- Geografia, patogeny i pozyskiwanie FBS
- Międzynarodowe praktyki testowe i regulacyjne
- Traceability and Documentation in the Serum Industry
- Economics 101: Globalne czynniki wpływające na cenę FBS
- Produkty pokrewne
Surowica jest towarem laboratoryjnym, którego jakość może być często brana za pewnik - może ona wpływać na wyniki wszystkich testów opartych na komórkach i zastosowań hodowli komórkowej. Te 5 kluczowych tematów zapewni ci solidne podstawy edukacyjne w zakresie stosowania surowic do hodowli komórkowych.
Biolodzy, którzy hodują komórki lub tkanki, wiedzą, że produkty surowicy, w tym płodowa surowica bydlęca lub FBS (czasami nazywana również FCS lub płodową surowicą cielęcą) stanowią niezbędny składnik pożywek do większości zastosowań. Surowica jest często jednym z najobficiej występujących składników pożywek do hodowli komórkowych (zwykle 2-15% objętości), więc jej jakość może mieć znaczący wpływ na powodzenie hodowli.
W szczególności FBS jest najczęściej stosowanym suplementem do hodowli komórek ssaków.hodowli komórek ssaków ze względu na łatwą dostępność, wraz z bogatą podażą czynników wzrostu, które promują rozwój i ekspansję komórek in vitro. Surowica działa również jako bufor dla systemu hodowli komórkowej przed różnymi toksycznymi efektami, które mogą zakłócać wzrost komórek, takimi jak zmiana pH, aktywność proteolityczna lub obecność endotoksyny.
Ułatwiamy określenie, który FBS będzie najlepszy dla danego zastosowania i budżetu, dzieląc nasze portfolio FBS na trzy odrębne kategorie - Classic, Premier i Select. Nasze Kategorie produktów FBS są oparte na odpowiednich parametrach dla danego zastosowania:
- surowica testowana pod kątem braku określonych zanieczyszczeń
- surowica napromieniowana, nienapromieniowana i inaktywowana termicznie
- pochodzenie geograficzne
- przydatność do hodowli komórek macierzystych i kardiomiocytów
- sterylna, filtrowana lub niefiltrowana surowica
Jak obchodzić się z surowicą w laboratorium
Każdy, kto kiedykolwiek zamawiał surowicę do laboratorium, wie, że czas dostawy jest ważny, ponieważ butelki są zwykle dostarczane od dostawcy w stanie zamrożonym. Wynika to z faktu, że aktywność krytycznych czynników makromolekularnych w surowicy jest najlepiej chroniona przez przechowywanie surowicy w temperaturze od -5 do -20 °C, a utrzymywanie surowicy w stanie zamrożonym do momentu użycia zmniejszy również częstość występowania zdarzeń, takich jak rozpad lipidów.Surowica powinna być rozmrożonej w łaźni wodnej lub inkubatorze o temperaturze 30-37 °C. Ważne jest, aby butelka z surowicą była okresowo mieszana w celu zmniejszenia gradientów soli i białek, które mogą tworzyć się w surowicy podczas rozmrażania. Osady te nie są toksyczne dla hodowli komórkowych, ale mogą wpływać na odtwarzalność danych komórkowych. Nie należy przekraczać temperatury 37 °C, która może pogorszyć wydajność surowicy poprzez przyspieszenie degradacji krytycznych składników surowicy.
Surowica może być wrażliwa na warunki środowiskowe wykraczające poza temperaturę. Na przykład światło o wysokiej intensywności/wysokiej energii może degradować aktywność czynników wzrostu, o czym należy pamiętać podczas stosowania surowicy w pobliżu oświetlenia UV mającego na celu promowanie sterylności w niektórych szafach bezpieczeństwa biologicznego. Typowe warunki oświetlenia laboratoryjnego będą miały niewielki lub żaden wpływ na integralność lub wydajność surowicy.
Lekarze mogą interpretować mętną próbkę pacjenta jako wskazującą na lipemię lub nadmiar tłuszczów we krwi. To samo może być prawdą w przypadku mętnej surowicy w laboratorium - jeśli bakteryjne zanieczyszczenie można wykluczyć poprzez hodowlę próbki, mętna surowica jest najprawdopodobniej wyjaśniona przez wytrącanie lipidów i lipoprotein.
Mętną surowicę można zminimalizować poprzez podzielenie bulionu na probówki jednorazowego użytku, aby uniknąć powtarzających się cykli zamrażania-rozmrażania. Chociaż obecność białka krzepnięcia fibryny jest czasami obwiniana za zmętnienie surowicy, surowica jest przygotowywana z frakcji po krzepnięciu krwi, a zatem zazwyczaj nie zawiera znacznych ilości fibryny lub innych czynników krzepnięcia.
Dobre praktyki, takie jak dzielenie surowicy do probówek jednorazowego użytku w celu przechowywania w stanie zamrożonym, zmniejszają możliwość wielokrotnego narażenia na zanieczyszczenia. Dzielenie pomaga również zapobiegać zmętnieniu, które może powstać w wyniku rozpadu lipidów i makrocząsteczek związanych z lipidami w wyniku powtarzających się cykli zamrażania-rozmrażania.
Przydatne jest również uświadomienie sobie, że zawartość lipidów przyczyniająca się do zmętnienia surowicy może się znacznie różnić w zależności od gatunku. Na przykład (i być może nie jest to zaskakujące), surowica świńska ma wyższą zawartość lipidów niż jej bydlęcy odpowiednik. Tak więc surowica pochodząca z różnych źródeł biologicznych wymaga unikalnej obsługi i dodatkowych etapów przetwarzania w zakładzie produkcyjnym w celu przygotowania produktu końcowego do użycia w laboratorium. Dostawcy, którzy oferują surowice z wielu gatunków, będą zatem mieli zróżnicowane protokoły przetwarzania surowców w celu zapewnienia spójnego, odpowiedniego produktu surowicy dla użytkownika końcowego, niezależnie od biologii lipidów.
Geografia, patogeny i pozyskiwanie FBS
Ponieważ surowica jest produktem biologicznym, podlega wahaniom wynikającym ze stanu zdrowia zwierząt źródłowych, na który z kolei wpływają czynniki dietetyczne, środowiskowe i globalne. Dlatego jednym z najważniejszych atrybutów, na które zwracają uwagę użytkownicy surowicy, jest kraj pochodzenia.
Chociaż występowanie i wpływ różnych patogenów specyficznych dla gatunku, takich jak gąbczasta encefalopatia bydła (BSE), na surowicę są nadal badane, USDA prowadzi listy krajów zatwierdzonych do importu surowicy, które są częściowo oparte na aktualnych danych dotyczących występowania patogenów. Konsumenci surowicy powinni zatem zawsze oczekiwać od dostawców informacji o geograficznym źródle pochodzenia surowicy i innych produktów pochodzenia zwierzęcego.
USDA prowadzi listę krajów zatwierdzonych do importu surowicy do USA (wytyczne zmieniane co roku). Różni się to od surowicy pochodzącej z USA, która jest pobierana z zakładów w USA, które są poddawane ciągłej kontroli przez USDA.
International Testing and Regulatory Practices
Reputable suppliers will typically employ consensus testing methods specified by serum industry to ensure that serum supplied to laboratories meets standards for levels for common zanieczyszczenia które mogą mieć wpływ na jego wydajność w hodowli komórkowej. Niektóre typowe testy to:
Standardy dla testowania ogólnych właściwości i składników surowicy zostały również ustanowione, aby umożliwić spójną ocenę osmolalności, białka całkowitego, hemoglobiny i ogólnej wydajności w hodowli.
Traceability and Documentation in the Serum Industry
Podczas gdy "pochodzenie" wskazuje kraj, w którym surowica została pobrana, "identyfikowalność" odnosi się do tego, jak dobrze udokumentowano drogę produktu surowicy - od pobrania w miejscu pochodzenia, poprzez produkcję i dystrybucję.
Surowica dostarczona w stanie zamrożonym do zakładu przetwórczego jest rozmrażana i testowana pod kątem obecności bakterii, wirusów, endotoksyn i zawartości hemoglobiny. Najlepszej jakości surowica jest następnie filtrowana przez sekwencję filtrów membranowych, kończącą się filtracją porów 0,1 µm w warunkach aseptycznych.
Po filtracji zachowana jest procedura aseptyczna, ponieważ surowica jest dozowana do sterylnych butelek, szybko zamrażana do -20 °C i poddawana kwarantannie, dopóki wszystkie partie nie zostaną wykazane jako spełniające lub przekraczające standardy kontroli jakości. Certyfikat analizy dla każdej partii powinien być zawsze dostępny na żądanie od dostawcy.
Identyfikowalność leków biologicznych ma kluczowe znaczenie dla zapewnienia, że opisy na etykietach są dokładnym odzwierciedleniem historii i zawartości produktu.Pełna dokumentacja zapewnia, że zarówno klient, jak i agencje regulacyjne mogą przeprowadzić audyt przetwarzania produktów surowicy i mogą odkryć, czy dostawcy angażują się w łączenie surowicy w celu zrównoważenia lokalnych wahań kosztów dostawcy - praktyka, która może zagrozić wydajności.
Economics 101: Global Factors that Affect FBS Price
Surowica jest produktem towarowym, którego cena różni się w zależności od kraju pochodzenia. Na przykład koszt surowicy pochodzącej z Australii, Nowej Zelandii i Stanów Zjednoczonych może być wyższy niż surowicy z innych krajów.
Obecna ocena ryzyka geograficznego OIE (Światowej Organizacji Zdrowia Zwierząt) dla tych krajów i Stanów Zjednoczonych jest wysoka, ponieważ kraje te są nadal wolne od BSE i pryszczycy. W przypadku Australii i Nowej Zelandii jest to częściowo spowodowane izolacją geograficzną. Surowe praktyki regulacyjne w rolnictwie i zwiększony popyt na surowice z tych krajów mogą podnieść cenę.
Dostępność FBS i innych surowic zwierzęcych z natury podlega wahaniom w globalnych stanach chorobowych zwierząt, klimacie oraz zaopatrzeniu w żywność i wodę. Kiedy występują globalne zjawiska pogodowe, rolnikom często może być trudno przenieść swoje krowy w celu uzyskania surowicy. Ostatnio stada były rekordowo niskie, a rolnicy odbudowują swoje stada, zmniejszając ilość surowicy na rynku. Czynniki te sprawiają, że ceny surowicy w całej branży są wrażliwe w sposób, w jaki nie są wrażliwe ceny odczynników niebiologicznych.
I wreszcie - co nie mniej ważne - ponieważ hodowla komórkowa staje się coraz bardziej powszechna w większej liczbie krajów, szczególnie w sektorze farmaceutycznym, ceny surowicy z pewnością będą odzwierciedlać zmiany w podaży, które mogą wywołać ten popyt. Warunki te powodują niestabilność podaży i popytu na FBS, prowadząc do globalnych wahań cen surowic.
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?