Przewodnik po prekatalizatorach palladowych o wysokiej wydajności

24 wstępnie zważone prekatalizatory palladowe

Użyteczne dla:  Suzuki-Miyaura; Buchwald-Hartwig; Negishi; Heck; Sonagashira; Borylacja; Ni/Pd co catalyst screen

Wymagane materiały - konfiguracja: w zależności od projektu, potrzebujesz co najmniej:

• 1 torebki mylarowej z KitAlysis 24 Pd Precatalyst Reaction Screening Kit i będziesz używać następujących komponentów:
  - 24 x 1 wstępnie zważone katalizatory w szklanych fiolkach obciążonych mieszadłami i zwieńczonych matą korkową (w zestawie)
  - 2 puste fiolki reakcyjne o pojemności 4 ml (w zestawie)
  
• 1 NOWY KitAlysis 24-dołkowy blok reakcyjny z wymienną folią (w zestawie)
  
• KitAlysis 24-dołkowy blok reakcyjny (sprzedawany oddzielnie)
• KitAlysis Benchtop Inertion Box (sprzedawany oddzielnie) lub pudełko na rękawiczki/torba na rękawiczki
• KitAlysis Zestaw śrubokrętów dynamometrycznych (sprzedawany oddzielnie)

Potrzebne dodatkowe (nie dołączone) elementy:

• Pipeta (0-100 µL) & końcówki
• 1 (1 mL) strzykawki z długimi igłami
• Twoje substraty
• Nitrogen (lub Argon): z linii wyciągowej lub zbiornika
• 1 płyta grzejna z możliwością mieszania
• 1 płyta mieszająca (lub płyta grzejna do użycia bez ogrzewania)
• Fiolki HPLC, 96-dołkowy blok automatycznego próbnika HPLC lub płytki TLC.

Roztwory i zawiesiny do przygotowania: Przejdź do strony konfiguracji użytkownika online, aby wprowadzić masy cząsteczkowe do pliku Excel do pobrania.

Procedura konfiguracji:

• Podgrzej płytkę grzejną do żądanej temperatury. Zaleca się użycie łaźni olejowej lub drugiego bloku reakcyjnego w celu utrzymania temperatury i uniknięcia skoków temperatury.
• Umieść  NOWY KitAlysis 24-dołkową folię zastępczą bloku reakcyjnego na pokrywie bloku reakcyjnego i sprawdź, czy wszystkie otwory, w tym otwór sondy temperatury, pokrywają się z odpowiednimi otworami w folii.
• Sprawdź wszystkie śruby, aby upewnić się, że nie są zerwane. Wymień wszystkie zerwane śruby na dostarczone zamienniki.
• Umieść KitAlysis Benchtop Inertion Box z rurką podłączoną do gazu obojętnego na drugiej, nieogrzewanej płytce mieszającej (zobacz konfigurację KitAlysis Benchtop Inertion Box dla szczegółów)
• Umieść KitAlysis 24-dołkowy blok reakcyjny z pokrywką w KitAlysis Benchtop Inertion Box. Rozpocząć przepływ azotu i przeczyszczać przez 5 minut. Pozostawić przepływ azotu do końca konfiguracji.
• Odważyć wszystkie substraty i stałe zasady do pustych fiolek reakcyjnych o pojemności 4 ml zgodnie z recepturą (dostarczoną w pliku Excel do pobrania)  pomijając rozpuszczalnik i ciekłe zasady.  Dodać jedno mieszadło do każdej mieszaniny fiolek. Oznacz fiolki etykietami, aby je śledzić.
• Częściowo otwórz pokrywę KitAlysis Benchtop Inertion Box. Upewnij się, że jedna fiolka jest umieszczona w środkowym otworze po obu stronach pojemnika do wprowadzania. Takie umieszczenie fiolki pozwala na najlepszy przepływ gazu obojętnego (zdejmij pokrywki z mieszanin stałych przed umieszczeniem ich w zalecanych otworach, zachowując pokrywki w pudełku do późniejszego użycia w razie potrzeby).
• Przenieś zakorkowane, 24-fiolkowe, wstępnie załadowane katalizatory do bloku reakcyjnego, upewniając się, że załadowano je zgodnie z pasującym schematem na opakowaniu i bloku reakcyjnym (A1 w lewym górnym rogu). Pozostaw matę na urządzeniu.
• Załaduj ampułki z rozpuszczalnikiem do otworów na ampułki znajdujących się wzdłuż dolnej części Inertion Box, poniżej bloku reakcyjnego. Można również użyć bezwodnych butelek SureSeal(ed)100 ml z dołączoną igłą kolektora zasilanego azotem.  Rygorystycznie odgazowane, ampułkowane rozpuszczalniki są dostępne dla wielu rozpuszczalników, specjalnie wykonanych dla KitAlysis i sprzedawanych oddzielnie, aby umożliwić dostosowanie.
• Gdy wszystkie komponenty znajdą się w KitAlysis Benchtop Inertion Box, zamknij pokrywę i przedmuchuj przez dodatkowe 5 minut. Pozostawić przepływ azotu do końca konfiguracji.
• Oczyścić igłę i strzykawkę w otworze dyfuzora azotu 2x, pociągając, a następnie popychając tłok. Używając oczyszczonej igły i strzykawki, dodaj wymagane ilości rozpuszczalnika do otwartych fiolek z mieszaniną substratów z ampułek lub butelek SureSeal.NIE dodawaj płynnych roztworów bazowych do żadnej mieszaniny substratów - są one dodawane bezpośrednio do każdej fiolki reakcyjnej oddzielnie w ostatnim kroku.
• Mieszaj mieszaniny aż do uzyskania roztworu (1-2 min). W przypadku zawiesin, patrz "dodatkowe wskazówki" poniżej.
• Podczas mieszania mieszanin, ostrożnie zdejmij matę nasadki z 24-fiolowych, wstępnie załadowanych katalizatorów w bloku reakcyjnym.
• Dozuj roztwory podstawowe zgodnie z projektem reakcji (100 µL 0.1M do każdej fiolki jest standardem)Dozuj 100 µL   "DMAc Substrate Mixture A" do fiolek A1-A6 zgodnie z poniższym schematem.
  - Może pozostać bardzo mała ilość nadmiaru roztworu dla każdej mieszaniny. Zachowaj go jako wzorzec reakcji
    dla HPLC/TLC później
• Po dozowaniu wszystkich mieszanin substratów i bazy zgodnie z recepturą, weź pokrywę 24-dołkowego bloku reakcyjnego KitAlysis   i wyrównaj śruby z otworami w płytce.Upewnij się, że otwory sondy temperatury znajdują się w jednej linii zarówno na pokrywie, jak i na bloku.
• Przykręć pokrywę zgodnie ze wskazówkami i wzorem przedstawionym w sekcji "dodatkowe wskazówki" poniżej. Przed wyjęciem KitAlysis 24-dołkowego bloku reakcyjnego z pudełka, upewnij się, że pokrywa jest równomiernie uszczelniona na podstawie. Wykonaj tę wizualną kontrolę, aby uniknąć konieczności odkręcania pokrywy i ponownego przykręcania.
• Po całkowitym uszczelnieniu wyjmij KitAlysis 24-dołkowy blok reakcyjny z pudełka. Umieść na podgrzanej płycie grzejnej z sondą przez pokrywę i włożoną do bloku. Upewnij się, że sonda znajduje się do końca w dolnej części bloku, aby uniknąć przegrzania. Podgrzewać w żądanej temperaturze przez noc mieszając przy lub blisko 300 obr/min.
• Przygotować roztwór gaszący w butelce z wymienną pokrywką zgodnie z poniższym przepisem do analizy HPLC. Możliwa jest również analiza TLC.
• Po zakończeniu reakcji, postępuj zgodnie z poniższą procedurą roboczą

Receptura roztworu gaszącego

• 49 mL CH₃CN
• 1 mL AcOH
• 15.4 mg bifenylu (KitAlysis wzorzec wewnętrzny dostarczony w zestawie)

Uwaga: Ten przepis pozwala uzyskać 50 ml roztworu podstawowego, który jest wystarczający dla wszystkich zestawów do badań przesiewowych w zestawie KitAlysis 24 Pd Precatalyst Reaction Screening Kit. Ilość wzorca wewnętrznego wynosi 10 mol%. Tak więc duży pik produktu do małego wzorca wewnętrznego wskazuje na dobrą reakcję.

Procedura robocza i analiza

• Chłodzić blok reakcyjny. Zdejmij pokrywę za pomocą małego śrubokręta bez momentu obrotowego.
• Sprawdź każdą fiolkę pod kątem utraty rozpuszczalnika i zapisz.
• Dodać 500 µL przygotowanego roztworu gaszącego do każdej fiolki.
• Założyć pokrywkę, dokręcić środkową śrubę i mieszać na płytce mieszającej (BEZ OGRZEWANIA) przez 2-3 minuty.NIE ODWRACAĆ BLOKU.
• Po 2-3 minutach mieszania pozostawić płytkę na 5 minut (bez mieszania), aby umożliwić nierozpuszczalnemu materiałowi osadzenie się z roztworu na dnie fiolek.
• Podczas odpoczynku płytki dodaj 700 µl acetonitrylu do każdej z 24 indywidualnie oznakowanych (A1, A2 itd.) fiolek HPLC lub do każdej z 24 studzienek 96-dołkowego bloku automatycznego próbnika HPLC/UPLC (patrz "dodatkowe zalecane materiały" poniżej, aby uzyskać sugestie dotyczące bloku automatycznego próbnika i maty nasadkowej).
• Zdejmij ostrożnie pokrywkę z KitAlysis 24-dołkowego bloku reakcyjnego.
• Używając czystej pipety za każdym razem, usuń porcję 25 µL z każdej fiolki do odpowiednich fiolek HPLC lub bloku HPLC.Należy uważać, aby pobrać materiał z górnej części fiolek, aby uniknąć wytrącenia się osadu.
• Uruchomić na automatycznym próbniku HPLC. Może być konieczne dostosowanie ilości acetonitrylu z sugerowanych 700 µL, aby dostosować go do unikalnego systemu HPLC.

Dodatkowe wskazówki:

Uszczelnianie płytki - przykręcanie pokrywy

Prawidłowe uszczelnienie płytki ma kluczowe znaczenie dla sukcesu. Kluczem jest lekki, równomierny nacisk na pokrywę bloku, aby utrzymać pokrywę płasko podczas uszczelniania.

1. Wyrównaj śruby, upewniając się, że otwory sondy temperatury w podstawie i pokrywie są wyrównane w KitAlysis 24-dołkowym bloku reakcyjnym.
2. Wstępnie wyrównaj: Za pomocą kciuka i palca wskazującego naciśnij pokrywę pudełka, aż zrówna się z fiolkami. Następnie, używając KitAlysis Torque Screwdriver, włóż śruby, aż zrównają się, ale nie dokręcą, z górną częścią pudełka, zgodnie z krzyżowym wzorem podanym poniżej. Sprawdź, czy pokrywa jest równomiernie przylegająca do podstawy ze wszystkich stron. Wykonaj tę wizualną kontrolę, aby uniknąć konieczności odkręcania pokrywy i ponownego przykręcania.
3. Dokręć: Powtarzaj ten sam schemat, aż KitAlysis Torque Screwdriver "kliknie", wskazując na całkowite dokręcenie. Obejdź blok jeszcze raz, aby upewnić się, że wszystkie śruby są dokręcone.

.

Sonda do płyty grzejnej nie pasuje do otworu bloku reakcyjnego

Użyj małej łaźni olejowej lub innego metalowego bloku (aby uzyskać najlepsze wyniki) z tyłu płyty grzejnej i umieść tam sondę. Umieść blok reakcyjny jak najbliżej środka płyty grzejnej, aby uzyskać bardziej równomierne mieszanie.

Dodawanie zawiesiny

Z powodu wąskiego otworu końcówek pipety, dodawanie zawiesiny spowoduje zablokowanie. Aby pomóc w równomiernym dozowaniu, wystarczy odciąć koniec końcówki przy pierwszym znaczniku (~10 mm). Aby zapewnić równomierne rozproszenie porcji, bardzo ważne jest, aby mieszanina była dobrze mieszana podczas pobierania porcji do dozowania do odpowiedniej fiolki reakcyjnej.