G005848

Analiza LC/MS/MS enancjomerów kwasu DL-d-hydroksyglutarowego na 6513 3826 R

application for HPLC

Właściwości

• metody: HPLC: suitable
• parametry testowe: column: CHIROBIOTIC R, 25 cm x 4.6 mm I.D., 5 μm particles (13024AST); mobile phase: (A) ethanol:methanol (3:1, v:v); (B) 0.1% v/v TEA in water, adjusted to pH 4.5 with acetic acid; 75:25 (A:B); flow rate: 0.4 mL/min; column temp.: 20 °C; detector: MS, ESI(-), 100-1000 m/z; injection: 5 μL; sample: each enantiomer, 100 μg/mL in water
• przydatność: application for HPLC
• Zastosowanie: clinical; forensics and toxicology; life science and biopharma

Opis

Komentarz do analizy

Chiralne 2-hydroksyglutarany (2-OHG) są ważnymi sygnaturami molekularnymi zarówno zdrowych, jak i chorych komórek biologicznych, ich specyficznych szlaków biochemicznych i wrodzonych błędów metabolizmu. Chiralne rozróżnienie i kwantyfikacja D-2-OHG (R(-)-2-OHG) i L-2-OHG (S(+)-2-OHG) jest kluczem do scharakteryzowania zaburzeń neurometabolicznych, takich jak kwasica 2-hydroksyglutarowa, która powoduje upośledzenie neurologiczne we wczesnym okresie życia. Zdolność do rozróżniania i ilościowego oznaczania enancjomerów 2-OHG jest zatem ważna, aby móc śledzić jego rozmieszczenie w szlaku metabolicznym normalnych i zmutowanych komórek. Przedstawiamy tutaj szybką i czułą metodę oddzielania i pomiaru D-2-OHG i L-2-OHG przy użyciu detekcji LC-MS/MS. Kolumna 6513 CHIROBIOTIC R (selektor chiralny ristocetyny) została uruchomiona w warunkach polarnej jonowej fazy ruchomej. Zastosowanie tandemowego MS wyeliminowało dwa podstawowe wyzwania analityczne związane z tymi związkami: brak chromoforu pochłaniającego promieniowanie UV w cząsteczce 2-OHG oraz obfitość konkurencyjnych kwasów o niskiej masie cząsteczkowej w moczu. Górny panel chromatogramu przedstawia rozdział D-2-OHG i L-2-OHG uzyskany podczas opracowywania metody. Dolny panel przedstawia czysty kwas L-2-hydroksyglutarowy.
Oprócz zapewnienia niezbędnej enancjoselektywności, kolumny 6513 CHIROBIOTIC mają tę zaletę, że działają w wodnych i polarnych organicznych fazach ruchomych, które są odpowiednie dla polarnych leków i metabolitów. Ich interakcje jonowe sprzyjają jonizacji analitu, co zwiększa czułość detekcji ESI. Oprócz kolumn CHIROBIOTIC, Sigma-Aldrich dostarcza również czynniki fazy ruchomej o wysokiej czystości, racemiczne i czyste chiralne enancjomery 2-OHG oraz inne związki w szlaku dehydrogenazy izocytrynianowej (IDH).

Informacje prawne

Astec is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

CHIROBIOTIC is a registered trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Analit

L-α-Hydroxyglutaric acid disodium salt, ≥98.0% (GC)
D-α-Hydroxyglutaric acid disodium salt, ≥95% (GC)