OGS630

pSF-CMV-NEO-NH2-PPT-3XFLAG-COOH-Cmyc

plasmid vector for molecular cloning

• Synonim(y): szybki wektor
• Kod UNSPSC: 12352200
• NACRES: NA.85

Właściwości

• rekombinowane: expressed in human cells
• znacznik: 3X FLAG tagged; c-Myc tagged
• Formularz: buffered aqueous solution
• masa cząsteczkowa: size 5973 bp
• selekcja bakterii: ampicillin
• Pochodzenie replikacji: pUC
• Rozszczepienie peptydów: EKT
• Lokalizacja znacznika peptydowego: C-terminal; N-terminal
• Promotor: Promoter name: CMV; Promoter activity: constitutive; Promoter type: mammalian
• Warunki transportu: ambient
• temp. przechowywania: −20°C

Opis

Opis ogólny

Wektor ekspresyjny pSF-CMV-NEO-NH2-PPT-3XFLAG-COOH-Cmyc jest 6 kb pochodną pSF-CMV-Amp do przejściowej lub stabilnej ekspresji wydzielanych podwójnie znakowanych N-końcowych białek fuzyjnych 3XFLAG i C-końcowych białek fuzyjnych c-myc w komórkach ssaków. Wektor ten koduje trzy epitopy FLAG w tandemie (DYKDHDG-DYKDHDI-DYKDDDDK), co skutkuje zwiększoną czułością przy użyciu przeciwciała anty-FLAG M2 (numer katalogowy F3165). Trzeci epitop zawiera sekwencję rozpoznającą enterokinazę, umożliwiając rozszczepienie peptydu 3XFLAG z oczyszczonego białka fuzyjnego. Sekwencja liderowa preprotrypsyny (PPT) poprzedza sekwencję 3XFLAG i kieruje wydzielaniem białka fuzyjnego do pożywki hodowlanej. Znacznik epitopowy c-myc (EQKLISEEDL) jest obecny za miejscem wielokrotnego klonowania. pSF-CMV-NEO-NH2-PPT-3XFLAG-COOH-Cmyc jest wektorem wahadłowym, zawierającym zarówno źródła replikacji E. coli, jak i SV40, do rozmnażania w komórkach bakteryjnych i ssaczych. Wydajność replikacji i integracji genomu jest optymalna przy użyciu gospodarza ssaków wyrażającego antygen T SV40. Region regulatorowy promotora ludzkiego wirusa cytomegalii napędza transkrypcję konstruktów fuzyjnych FLAG i c-myc. Gen fosfotransferazy aminoglikozydowej II (neo-R) nadaje oporność na aminoglikozydy, takie jak G418, umożliwiając selekcję stabilnych transfekantów.

Zastosowanie

Klonowanie genu: Ten plazmid zawiera gen w obrębie głównego miejsca wielokrotnego klonowania (NotI-ClaI). Każdy plazmid, który sprzedajemy, w którym gen jest w tej konfiguracji, będzie znajdował się dokładnie w tej samej pozycji w stosunku do kodonu start i stop genu. Jedynymi wyjątkami od tej reguły są białka fuzyjne, w których gen fuzyjny może być umieszczony z przodu lub na końcu MCS, aby umożliwić fuzję genów. Umieszczenie wszystkich naszych genów w tym samym miejscu umożliwia ich przenoszenie między plazmidami przy użyciu tej samej metody klonowania i miejsc restrykcyjnych, niezależnie od używanego plazmidu z naszej oferty produktów. Wstawienie nowego genu do tego plazmidu powinno być łatwo możliwe przy użyciu szeregu standardowych miejsc enzymów restrykcyjnych, które otaczają gen obecnie znajdujący się w wektorze. Uwagi dotyczące miejsca wielokrotnego klonowania: W miejscu wielokrotnego klonowania znajdują się dwa ważne miejsca restrykcyjne zwane miejscami BsgI i BseRI. Miejsca te przecinają DNA w tym samym miejscu i przecinają kodon stop genu w miejscu wielokrotnego klonowania w tym plazmidzie, tworząc w ten sposób nawis TA. Ten nawis jest kompatybilny z dowolnym z naszych plazmidów peptydowych lub plazmidów z reporterowym znacznikiem fuzyjnym, również ciętych jednym z tych enzymów. Pozwala to na tworzenie płynnych fuzji C-końcowych z genem w tym miejscu wielokrotnego klonowania przy użyciu jednego etapu klonowania z naszego asortymentu C-końcowych peptydów i znaczników reporterowych. Zwykle najprostszą metodą jest sklonowanie C-końcowego znacznika z naszych innych produktów plazmidowych do tego plazmidu przy użyciu BsgI lub BseRI i miejsca restrykcyjnego ClaI. Miejsca BseRI i BsgI są niepalindromowe i rozszczepiają określoną liczbę zasad z dala od ich miejsc wiązania. Pozwala im to przeciąć kodon stop w genie w tym plazmidzie niezależnie od sekwencji genu.

Sekwencja

Aby wyświetlić informacje o sekwencji dla tego produktu, odwiedź stronę produktu .

Komentarz do analizy

Aby wyświetlić certyfikat analizy dla tego produktu, należy odwiedzić stronę www.oxgene.com .

Inne uwagi

Szukasz więcej opcji wektorów, aby przyspieszyć swoje eksperymenty? Rozważ niestandardowy wektor do klonowania zaprojektowany i zbudowany przez 8969. Dowiedz się więcej na stronie Oxford Genetics - partnera Sigma w zakresie wektorów do klonowania i ekspresji do zastosowań w biologii molekularnej i biologii syntetycznej.

Informacje prawne

Oxford Genetics jest znakiem towarowym firmy Oxford Genetics Ltd

Oxford Genetics is a trademark of Oxford Genetics Ltd

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Kod klasy składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• Temperatura zapłonu (°F): Not applicable
• Temperatura zapłonu (°C): Not applicable