MABF2820

Anti-HCV E2 Antibody, clone AP33

• Synonim(y): Glikoproteina E2 otoczki wirusa HCV
• Kod UNSPSC: 12352203
• NACRES: NA.41

Właściwości

• pochodzenie biologiczne: mouse
• Poziom jakości: 200
• forma przeciwciała: purified antibody
• rodzaj przeciwciała: primary antibodies
• klon: AP33, monoclonal
• masa cząsteczkowa: observed mol wt ~60 kDa
• oczyszczone przez: using protein G
• reaktywność gatunkowa: virus
• opakowanie: antibody small pack of 100 μg
• metody: ELISA: suitable; electron microscopy: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; inhibition assay: suitable; neutralization: suitable; western blot: suitable
• izotyp: IgG1κ
• sekwencja epitopowa: N-terminal half
• numer dostępu Protein ID: N/A
• numer dostępu UniProt: P27958
• temp. przechowywania: -10 to -25°C
• docelowa modyfikacja potranslacyjna: unmodified
• informacje o genach: vaccinia virus ... E2(684)

Opis

Opis ogólny

Poliproteina genomowa (UniProt: P27958) jest kodowana przez gen POLY (identyfikator genu: 951475) w wirusie zapalenia wątroby typu C. HCV jest małym (~55-65 nm), otoczkowym, pozytywnym jednoniciowym wirusem RNA, który jest czynnikiem sprawczym zapalenia wątroby typu C i raka wątrobowokomórkowego. HCV wyraża kilka białek, które promują replikację wirusa. Poliproteina genomowa HCV może być rozszczepiona na 11 różnych łańcuchów. Dojrzałe białko rdzeniowe pakuje wirusowy RNA, tworząc wirusowy nukleokapsyd i promuje pączkowanie wirionów. Zapobiega również ustanowieniu komórkowego stanu antywirusowego poprzez blokowanie szlaków sygnałowych interferonu- /β i interferonu- oraz poprzez indukowanie degradacji STAT1. Białka otoczki E1 i E2, które tworzą heterodimer, są silnie glikozylowane i biorą udział w przyłączaniu wirusa do komórki gospodarza, internalizacji wirionu poprzez endocytozę zależną od klatryny i fuzji z błoną gospodarza. W HCV wiroproteina P7, heptameryczne białko kanału jonowego, odgrywa istotną rolę w montażu, otoczce i wydzielaniu cząstek wirusa. Zawiera również NS2, proteazę cysteinową i NS3, proteazę serynową. NS2 jest wymagana do proteolitycznego auto-rozszczepienia między NS2 i NS3. NS3 wiąże pojedynczy ATP i katalizuje rozpinanie pojedynczej pary zasad dsRNA. Niestrukturalne białko 4A (NS4A), kofaktor peptydowy, tworzy niekowalencyjny kompleks z N-końcem NS3 i kompleks ten zapobiega fosforylacji IRF3 gospodarza, co również zapobiega ustanowieniu stanu antywirusowego indukowanego dsRNA. NS4B indukuje specyficzną zmianę błony, która służy jako rusztowanie dla kompleksu replikacji wirusa. Niestrukturalne białko 5A (NS5A), wielofunkcyjna fosfoproteina, jest wiążącym RNA obwodowym białkiem błonowym, które według doniesień antagonizuje liczne szlaki komórkowe, w tym przeciwwirusową odpowiedź interferonu-a. NS5A występuje w postaci hipo- i hiperfosforylowanej, a dynamiczne przejście między tymi dwoma stanami jest zaangażowane w funkcje NS5A. Hiperfosforylacja występuje głównie na sześciu resztach serynowych w sekwencji NS5A o niskiej złożoności. Wykazano, że fosforylowany NS5A jest niezbędny do replikacji i składania wirusa. Klon AP33 rozpoznaje epitop w N-końcowej części ektodomeny E2 (aa 412 do 423). Wykazano, że hamuje on interakcję skróconego E2 (E2(660)), kompleksu E1E2 o pełnej długości wyrażonego w komórkach ssaków oraz cząstek wirusopodobnych HCV z CD81. Wykazuje również silną aktywność neutralizującą przeciwko HCV niosącemu E1E2 wszystkich genotypów. (Ref.: Owsianka, A., et al. (2005). J. Virol. 79(17); 11095-11104; Clayton, RF., et al. (2002). J. Virol. 76(15); 7672-7682; Owsianka, A., et al. (2001). J. Gen. Virol. 82(8); 1877-1883).

Specyficzność

Klon AP33 jest mysim przeciwciałem monoklonalnym wykrywającym glikoproteinę otoczkową E2. Celuje w epitop w obrębie 12 aminokwasów od N-końcowej połowy.

Immunogen

Znakowana His rekombinowana postać szczepu HCV Gla E1E2 ekspresjonowanego w komórkach ssaków, zemulgowana w kompletnym adiuwancie Freunda.

Zastosowanie

Testy kontroli jakości

Oceniane metodą Western Blotting w lizacie z komórek HEK293T transfekowanych plazmidem wyrażającym glikoproteiny HCV E1 i E2.

Analiza Western Blotting: Rozcieńczenie 1:1000 tego przeciwciała wykryło HCV E2 w lizacie z komórek HEK293T transfekowanych plazmidem wyrażającym glikoproteiny HCV E1 i E2, ale nie w lizatach z nietransfekowanych komórek.

Testowane aplikacje

Inhibicja: Reprezentatywna partia Hamowała interakcję cząstek wirusopodobnych (VLP) z CD81 i hamowała zakażenie HCVpp o różnych genotypach.(Owsianka, A., et al. (2001). J Gen Virol. 82(Pt8):1877-1883; Owsianka, A., et al. (2005). J Virol. 79(17):11095-104).

ELISA: Reprezentatywna partia wykryła HCV E2 w aplikacji ELISA. (Owsianka, A., et al. (2005). J Virol. 79(17):11095-104; Rychłowska, M., et al. (2011). J Gen Virol. 92(Pt10)2249-2261; Vasiliauskaite, I., et al. (2017). mBio. 8(3):e00382-17).

Mikroskopia elektronowa: Reprezentatywna partia wykryła wirusopodobne cząstki HCV w aplikacji kriomikroskopii elektronowej (Owsianka, A., et al. (2001). J Gen Virol. 82(Pt8):1877-1883; Clayton, R.F., et al. (2002). J Virol. 76(15):7672-82).

Analiza Western Blotting: Reprezentatywna partia wykryła HCV E2 w aplikacji Western Blotting (Clayton, R.F., et al. (2002). J Virol. 76(15):7672-82; Rychlowska, M., et al. (2011). J Gen Virol. 92(Pt10)2249-2261; Hu, Z., et al. (2020). Cell Chem Biol. 27(7):780-792.e5).

Analiza immunoprecypitacji: Reprezentatywna partia immunoprecypitowanego HCV E2 w aplikacji immunoprecypitacji (Owsianka, A., et al. (2005). J Virol. 79(17):11095-104).

Neutralizacja: Reprezentatywna partia neutralizowała zakażenie HCV we wszystkich głównych genotypach HCV (Owsianka, A., et al. (2005). J Virol. 79(17):11095-104; Potter, J.A., et al. (2012). J Virol. 86(23):12923-32).

Uwaga: Rzeczywiste optymalne rozcieńczenia robocze muszą być określone przez użytkownika końcowego jako próbki, a warunki eksperymentalne mogą się różnić w zależności od użytkownika końcowego.

Postać fizyczna

Oczyszczone mysie przeciwciało monoklonalne IgG1 w PBS bez azydku.

Rekonstytucja

1,0 mg/ml. Należy zapoznać się ze wskazówkami dotyczącymi sugerowanych początkowych rozcieńczeń i/lub mian w zależności od zastosowania i rodzaju próbki.

Przechowywanie i stabilność

Przechowywać w temperaturze od -10°C do -25°C. Zalecenia dotyczące postępowania: Po otrzymaniu i przed zdjęciem nasadki odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek do mikrowirówki i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu.

Inne uwagi

Stężenie: Stężenie specyficzne dla danej partii można znaleźć w certyfikacie analizy.

Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności

O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktu(-ów), nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanych zastosowań komercyjnych, zastosowań diagnostycznych in vitro, zastosowań terapeutycznych ex vivo lub in vivo lub jakiegokolwiek rodzaju konsumpcji lub zastosowania u ludzi lub zwierząt.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Kod klasy składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• Klasa zagrożenia wodnego (WGK): WGK 2
• Temperatura zapłonu (°F): Not applicable
• Temperatura zapłonu (°C): Not applicable