Przejdź do zawartości
Merck
Wszystkie zdjęcia(3)

Kluczowe dokumenty

17-663

Sigma-Aldrich

ChIPAb+ EED - przeciwciało i zestaw primerów zweryfikowane pod kątem ChIP

from mouse

Synonim(y):

EED, białko polikombinowe EED, białko WD wiążące się z ogonami cytoplazmatycznymi integryny 1, WAIT-1

Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych


About This Item

Kod UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.52

pochodzenie biologiczne

mouse

Poziom jakości

klon

monoclonal

reaktywność gatunkowa

human, mouse

producent / nazwa handlowa

ChIPAb+
Upstate®

metody

ChIP: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

izotyp

IgG2aκ

numer dostępu NCBI

numer dostępu UniProt

Warunki transportu

dry ice

informacje o genach

human ... EED(8726)

Opis ogólny

Wszystkie przeciwciała ChIPAb+ są indywidualnie walidowane pod kątem wytrącania chromatyny, w każdej partii, za każdym razem. Każdy zestaw przeciwciał ChIPAb+ zawiera startery kontrolne (testowane co partię za pomocą qPCR) w celu biologicznej walidacji wyników IP w kontekście specyficznym dla locus. Protokół qPCR i sekwencje starterów są dostarczane, umożliwiając badaczom walidację protokołów ChIP przy użyciu naszego przeciwciała w kontekście chromatyny. Każdy zestaw zawiera również ujemne przeciwciało kontrolne, aby zapewnić specyficzność reakcji ChIP.
Zestaw ChIPAb+ EED zawiera przeciwciało EED dla białka polikombinowego, przeciwciało kontroli negatywnej (oczyszczone mysie IgG) oraz startery qPCR, które amplifikują region 138 bp przed ludzkim genem HoxA2. Przeciwciała EED i przeciwciała kontroli negatywnej są dostarczane w skalowalnym rozmiarze reakcji "per ChIP" i mogą być stosowane do funkcjonalnej walidacji wytrącania chromatyny związanej z EED.

Specyficzność

Nie testowano na innych gatunkach.
Rozpoznaje EED, MW: ~50 kDa.

Immunogen

Rekombinowane białko fuzyjne pełnej długości mysiego EED znakowane MBP.

Zastosowanie

Immunoprecypitacja chromatyny:
Reprezentatywne dane partii.
Sonikowaną chromatynę przygotowaną z komórek Ntera2 (3 X106 równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji chromatyny przy użyciu 1 µg normalnej mysiej IgG lub przeciwciała anty-EED i zestawu Magna ChIP G Kit (nr kat. 17-611).
Pomyślna immunoprecypitacja fragmentów DNA związanych z EED została zweryfikowana przez qPCR przy użyciu starterów promotora GAPDH (negatywnych) i HoxA2 (pozytywnych) (patrz rysunki). Dane przedstawiono jako procentowy wkład każdej próbki IP w stosunku do chromatyny wejściowej dla każdego amplikonu i próbki ChIP, jak wskazano.
Szczegółowe informacje dotyczące eksperymentu można znaleźć w protokole EZ-Magna G ChIP (nr kat. 17-409) lub EZ-ChIP (nr kat. 17-371).

Analiza Western Blot:
Reprezentatywne dane partii.
Lizaty z komórek A431 zostały rozdzielone za pomocą elektroforezy, przeniesione na PVDF i sondowane anty-EED. Białka wizualizowano przy użyciu koziego przeciwciała anty-mysiego sprzężonego z HRP i detekcji chemiluminescencji (patrz rysunki).
Zestaw ChIPAb+ EED -ChIP Validated Antibody & Primer Set zawiera przeciwciało i specyficzne kontrolne startery PCR.
Research Category
Epigenetics & Nuclear Function
Research Sub Category
Chromatin Biology

Opakowanie

25 testów w zestawie. Zalecane użycie: ~2 μg przeciwciała na immunoprecypitację chromatyny (w zależności od kontekstu biologicznego).

Jakość

Chromatin Immunoprecipitation:
Sonicated chromatin prepared from Ntera2 cells (3 X 106 cell equivalents per IP) were subjected to chromatin immunoprecipitation using 2 µg of either a normal mouse IgG, or Anti-EED antibody and the Magna ChIP® G Kit (Cat. # 17-611).
Successful immunoprecipitation of EED-associated DNA fragments was verified by qPCR using Control Primers (Please see figures).
Please refer to the EZ-Magna ChIP G (Cat. # 17-409) or EZ-ChIP (Cat. # 17-371) protocol for experimental details.

Opis wartości docelowych

~50 kDa

Postać fizyczna

Anty-EED (mysia monoklonalna IgG). Jedna fiolka zawierająca 50 μg przeciwciała oczyszczonego z białka G w 0,1 M roztworze Tris-Glicyna (pH 7,4) 150 mM NaCl, zawierającym 0,05% azydku. Może zawierać 30% glicerolu (szczegóły w certyfikacie analizy). Przechowywać w temperaturze -20°C.

Normalne mysie IgG. Dwie fiolki zawierające 25 μg oczyszczonej mysiej IgG w 25 μl buforu do przechowywania zawierającego 0,1% azydku sodu. Przechowywać w temperaturze -20°C.

Primery ChIP, HoxA2 upstream. Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego primera specyficznego dla regionu promotora ludzkiego HoxA2. Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: AGG AAA GAT TTT GGT TGG GAA G
REV: AAA AAG AGG GAA AGG GAC AGA C
Format: Oczyszczony

Przechowywanie i stabilność

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania. Zalecenia dotyczące postępowania: Po pierwszym rozmrożeniu, a przed zdjęciem korka, odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu. Uwaga: Zmienność temperatur w zamrażarce poniżej -20°C może powodować zamarzanie roztworów zawierających glicerol podczas przechowywania.

Komentarz do analizy

Kontrola
Zawiera mysie przeciwciało IgG kontroli ujemnej i startery specyficzne dla ludzkiego regionu HoxA2.

Inne uwagi

Stężenie: Stężenie specyficzne dla danej partii można znaleźć w certyfikacie analizy.

Informacje prawne

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Kod klasy składowania

10 - Combustible liquids


Certyfikaty analizy (CoA)

Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.

Masz już ten produkt?

Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.

Odwiedź Bibliotekę dokumentów

Adrian P Bracken et al.
Genes & development, 20(9), 1123-1136 (2006-04-19)
The Polycomb group (PcG) proteins form chromatin-modifying complexes that are essential for embryonic development and stem cell renewal and are commonly deregulated in cancer. Here, we identify their target genes using genome-wide location analysis in human embryonic fibroblasts. We find
Diego Pasini et al.
Molecular and cellular biology, 27(10), 3769-3779 (2007-03-07)
Polycomb group (PcG) proteins form multiprotein complexes, called Polycomb repressive complexes (PRCs). PRC2 contains the PcG proteins EZH2, SUZ12, and EED and represses transcription through methylation of lysine (K) 27 of histone H3 (H3). Suz12 is essential for PRC2 activity
Adrian P Bracken et al.
The EMBO journal, 22(20), 5323-5335 (2003-10-09)
Recent experiments have demonstrated that the Polycomb group (PcG) gene EZH2 is highly expressed in metastatic prostate cancer and in lymphomas. EZH2 is a component of the PRC2 histone methyltransferase complex, which also contains EED and SUZ12 and is required
Yu Zhang et al.
The Journal of biological chemistry, 286(49), 42414-42425 (2011-10-20)
Polycomb group proteins play essential roles in transcriptional regulation of multiple gene families involved in various pathophysiological processes. It is believed that Polycomb Repressive Complex 2 (PRC2) is targeted to chromatin by the EED subunit to methylate histone H3 lysine

Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.

Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej