Przejdź do zawartości
Merck
Wszystkie zdjęcia(3)

Kluczowe dokumenty

17-10099

Sigma-Aldrich

ChIPAb+ Acetylo-Histone H4 (Lys8) - przeciwciało i zestaw primerów zweryfikowane pod kątem ChIP

serum, from rabbit

Synonim(y):

H4K8Ac, histon H4 (acetyl K8)

Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych


About This Item

Kod UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.75

pochodzenie biologiczne

rabbit

Poziom jakości

forma przeciwciała

serum

klon

polyclonal

reaktywność gatunkowa

human, yeast, Saccharomyces cerevisiae

producent / nazwa handlowa

ChIPAb+
Upstate®

metody

ChIP: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

numer dostępu NCBI

numer dostępu UniProt

Warunki transportu

dry ice

Opis ogólny

Histon H4 jest jednym z 5 głównych białek histonowych zaangażowanych w strukturę chromatyny w komórkach eukariotycznych. Posiadając główną domenę globularną i długi N-końcowy ogon, histon H4 jest zaangażowany w strukturę nukleosomów o strukturze "koralików na sznurku".

N-końcowy ogon histonu H4 wystaje z kulistego rdzenia nukleosomu i może podlegać kilku różnym rodzajom modyfikacji epigenetycznych, które wpływają na procesy komórkowe. Modyfikacje te obejmują kowalencyjne przyłączanie grup metylowych lub acetylowych do aminokwasów lizyny i argininy oraz fosforylację seryny lub treoniny.
Wszystkie przeciwciała ChIPAb+ są indywidualnie walidowane pod kątem wytrącania chromatyny, w każdej partii, za każdym razem. Każdy zestaw przeciwciał ChIPAb+ zawiera startery kontrolne (testowane co partię za pomocą qPCR) w celu biologicznej walidacji wyników IP w kontekście specyficznym dla locus. Protokół qPCR i sekwencje starterów są dostarczane, umożliwiając badaczom walidację protokołów ChIP przy użyciu naszego przeciwciała w kontekście chromatyny. Każdy zestaw zawiera również ujemne przeciwciało kontrolne, aby zapewnić specyficzność reakcji ChIP.
Zestaw ChIPAb+ Acetylo-Histone H4 (Lys8) zawiera przeciwciało Acetylo-Histone H4 (Lys8), surowicę króliczą z kontrolą ujemną oraz startery qPCR, które amplifikują region 134 bp ludzkiego HSPCA. Acetylo-Histon H4 (Lys8) i kontrole ujemne są dostarczane w skalowalnym rozmiarze reakcji "na ChIP" i mogą być wykorzystane do funkcjonalnej walidacji wytrącania chromatyny związanej z Acetylo-Histonem H4 (Lys8).

Specyficzność

Na podstawie 100% homologii sekwencji oczekuje się szerokiej reaktywności krzyżowej między gatunkami.
Rozpoznaje acetylo-histonę H4 (Lys8).

Immunogen

Syntetyczny peptyd odpowiadający drożdżowemu histonowi H4 acetylowanemu przy lizynie 8.

Zastosowanie

Immunoprecypitacja chromatyny:
Sonikowaną chromatynę przygotowaną z komórek HeLa (1 X106 równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji chromatyny przy użyciu 2 µL normalnej surowicy króliczej lub 2 µL anty-acetylo-histonu H4 (Lys8) i zestawu Magna ChIP A (nr kat. 17-610).
Pomyślna immunoprecypitacja fragmentów DNA związanych z acetylo-histonem H4 (Lys8) została zweryfikowana za pomocą qPCR przy użyciu starterów ChIP, ludzkiego HSPCA dla testu pozytywnego i znanych starterów negatywnych (Martinato, F. i in., 2008) jako testu negatywnego (patrz rysunki).
Dane przedstawiono jako procentowy wkład każdej próbki IP w stosunku do chromatyny wejściowej dla każdego amplikonu i próbki ChIP, jak wskazano.
Szczegółowe informacje dotyczące eksperymentu można znaleźć w protokole EZ-Magna ChIP A (nr kat. 17-408) lub EZ-ChIP (nr kat. 17-371).

Analiza Western Blot:
Reprezentatywne dane partii.
Ekstrakt kwasu HeLa traktowany maślanem sodu został rozdzielony przez elektroforezę, przeniesiony na membranę PVDF i sondowany anty-acetylem histonu H4 (Lys8) (rozcieńczenie 1:1000). Aby wykazać swoistość, surowicę wstępnie inkubowano ze zmodyfikowanymi peptydami Histone H4:
Pas 1: Bez peptydu
Pasek 2: acetylo-Histon H4 (K5) (Nr kat.: 12-343)
Pas 3: acetylo-Histon H4 (K8) (Nr kat.:12-344)
Pas 4: acetylo-histyna H4 (K12) (Nr kat.:12-345)
Pas 5: acetylo-histyna H4 (K16) (Nr kat.:12-346)
Pas 6: acetylo-Histon H4 (K5, 8, 12, 16) (Nr kat.:12-353)
Pas 7: Histon H4 (Nr kat.:12-347)
Białka były wizualizowane przy użyciu oślego anty-królika IgG sprzężonego z HRP i wizualizowane przy użyciu systemu detekcji chemiluminescencji (patrz rysunki).

Immunoprecypitacja: 5 μL poprzedniej partii immunoprecypitowało acetyl Histone H4 z 1 mg lizatów całych komórek drożdży typu dzikiego, ale nie ze szczepu drożdży zawierającego substytucję Histone H4 Lys8R.
Zestaw ChIPAb+ Acetyl-Histone H4 (Lys8) zawiera przeciwciało Acetyl-Histone H4 (Lys8), króliczą surowicę kontroli ujemnej i startery qPCR, które amplifikują region 134 bp ludzkiego HSPCA.
Research Category
Epigenetics & Nuclear Function
Research Sub Category
Histones

Opakowanie

25 testów w zestawie. Zalecane użycie: ~2 μL przeciwciała na immunoprecypitację chromatyny (w zależności od kontekstu biologicznego).

Jakość

Chromatin Immunoprecipitation:
Sonicated chromatin prepared from HeLa cells (1 X 106 cell equivalents per IP) were subjected to chromatin immunoprecipitation using either 2 µL of Normal Rabbit Serum or 2 µL of Anti-Acetyl-Histone H4 (Lys8) and the Magna ChIP® A Kit (Cat. # 17-610).
Successful immunoprecipitation of Acetyl-Histone H4 (Lys8) associated DNA fragments was verified by qPCR using ChIP Primers, human HSPCA (Please see figures).
Please refer to the EZ-Magna ChIP A (Cat. # 17-408) or EZ-ChIP (Cat. # 17-371) protocol for experimental details.

Opis wartości docelowych

~11 kDa

Postać fizyczna

Anty-Acetylo-Histon H4 (Lys8) (króliczy poliklonalny). Jedna fiolka zawierająca 50 μL surowicy odpornościowej zawierającej 0,05% azydku sodu. Przechowywać w temperaturze -20°C.

Normalna surowica królicza. Jedna fiolka zawierająca 100 μL surowicy odpornościowej zawierającej 0,05% azydku sodu.
Przechowywać w temperaturze -20°C.

Primery ChIP, HSPCA. Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego primera specyficznego dla ludzkiego HSPCA.
Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: GCA ACA GCT ACC ACA GGA CCA
REV: GAG CGT GTG AAA TCA ACA TAA AGC
Unpurified

Przechowywanie i stabilność

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania. Zalecenia dotyczące postępowania: Po pierwszym rozmrożeniu, a przed zdjęciem korka, odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu.

Komentarz do analizy

Kontrola
Zawiera kontrolę ujemną, przeciwciało normalnej surowicy króliczej i startery specyficzne dla ludzkiego HSPCA.

Informacje prawne

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Kod klasy składowania

10 - Combustible liquids


Certyfikaty analizy (CoA)

Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.

Masz już ten produkt?

Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.

Odwiedź Bibliotekę dokumentów

Marcin Cieślik et al.
Epigenetics & chromatin, 6(1), 28-28 (2013-09-06)
The epithelial-mesenchymal transition (EMT) is a de-differentiation process required for wound healing and development. In tumors of epithelial origin aberrant induction of EMT contributes to cancer progression and metastasis. Studies have begun to implicate epigenetic reprogramming in EMT; however, the
Manti Guha et al.
PloS one, 13(11), e0206897-e0206897 (2018-11-15)
Telomeres protect against chromosomal damage. Accelerated telomere loss has been associated with premature aging syndromes such as Werner's syndrome and Dyskeratosis Congenita, while, progressive telomere loss activates a DNA damage response leading to chromosomal instability, typically observed in cancer cells

Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.

Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej