06-427

Przeciwciało przeciw fosfotyrozynie

Upstate^®, from rabbit

• Kod UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Właściwości

• pochodzenie biologiczne: rabbit
• Poziom jakości: 100
• forma przeciwciała: affinity purified immunoglobulin
• rodzaj przeciwciała: primary antibodies
• klon: polyclonal
• oczyszczone przez: affinity chromatography
• reaktywność gatunkowa: human
• reaktywność gatunkowa (przewidywana na podstawie homologii): all (based on 100% sequence homology)
• producent / nazwa handlowa: Upstate^®
• metody: immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Warunki transportu: wet ice
• docelowa modyfikacja potranslacyjna: acetylation (test)
• informacje o genach: human ... PID1(55022)

Opis

Opis ogólny

Wykazano, że fosforylacja specyficznych reszt tyrozynowych jest podstawowym mechanizmem transdukcji sygnału podczas normalnej mitogenezy, progresji cyklu komórkowego i transformacji onkogennej, a jej rola w innych obszarach, takich jak różnicowanie i komunikacja między połączeniami szczelinowymi, jest przedmiotem aktywnych i trwających badań. Przeciwciała, które specyficznie rozpoznają fosforylowane reszty tyrozyny, okazały się nieocenione w badaniu białek fosforylowanych tyrozyną i szlaków biochemicznych, w których funkcjonują.

Specyficzność

Immunoreaktywność przeciwciała jest całkowicie hamowana przez zastosowanie 100 mM fosforanu fenylu, analogu fosfotyrozyny. Przeciwciało fosfotyrozyny jest oczyszczane za pomocą chromatografii immunopowinowactwa przy użyciu podwójnego żelu fosfo-peptydowego lub żelu BSA-fosfotyrozyna. Cała immunoreaktywność fosfotyrozyny obecna w surowicy odpornościowej jest immunoadsorbowana niezależnie od tego, czy przeciwciało jest oczyszczane przez którykolwiek z żeli, co wskazuje, że przeciwciało nie jest specyficzne dla sekwencji, ale specyficzne dla reszt fosfotyrozyny.

Immunogen

W celu wytworzenia poliklonalnych przeciwciał fosfotyrozynowych o szerokim spektrum, króliki immunizowano trzema fosforylowanymi immunogenami: (1) fosfotyrozyną związaną kowalencyjnie z KLH; (2) fosfopeptydem regulującym terminal karboksylowy c-Src (TS-T-E-P-Q-pY-Q-P-G-E-N-L; nr katalogowy 12-218) związanym kowalencyjnie z KLH oraz (3) fosfopeptydem związanym z wysoką aktywnością kinazy tyrozynowej w ludzkich limfocytach (R-R-L-I-E-D-A-E-pY-A-A-R-G; nr katalogowy 12-217) związanym kowalencyjnie z KLH. Oba hapteny fosfopeptydowe służą jako silne substraty dla fosfataz tyrozynowych i są częścią dwóch kolorymetrycznych zestawów fosfatazy tyrozynowej dostarczanych przez Upstate, Inc (nr katalogowy 17-125, 17-126).

Zastosowanie

Analiza Western Blotting: Rozcieńczenie 1:500 z reprezentatywnej partii wykryło fosfotyrozynę w 10 µg lizatu tkankowego A431 poddanego działaniu EGF z fosfatazą Lambda.
Analiza immunoprecypitacji: 5 µl z reprezentatywnej partii immunoprecypitowało fosfotyrozynę w 0,5 mg lizatu komórek A431 poddanych działaniu EGF.

Kategoria badawcza
Sygnalizacja

Podkategoria badawcza
Ogólne modyfikacje posttranslacyjne

Neuronauka sygnalizacyjna

Przeciwciało antyfosfotyrozynowe wykrywa poziom fosfotyrozyny i zostało opublikowane i zatwierdzone do stosowania w IP i WB.

Jakość

Evaluated by Western Blotting in EGF treated A431 cell lysate.

Western Blotting Analysis: A 1:500 dilution of this antibody detected Phosphotyrosine in 10 µg of EGF treated A431 cell lysate.

Opis wartości docelowych

Różne

Postać fizyczna

Oczyszczony króliczy poliklonalny w buforze zawierającym 0,1 M Tris-Glicyna (pH 7,4), 150 mM NaCl z 0,05% azydkiem sodu.

Oczyszczony przez powinowactwo

Przechowywanie i stabilność

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze 2-8°C od daty otrzymania.

Komentarz do analizy

Kontrola
Pozytywna kontrola antygenu: Katalog #12-302, lizat komórek A431 stymulowany przez EGF. Dodać 2,5 µl 2-merkaptoetanolu/100 µl lizatu i gotować przez 5 minut w celu zredukowania preparatu. Załadować 20 µg zredukowanego lizatu na pas do minigelów.

Inne uwagi

Stężenie: Stężenie specyficzne dla danej partii można znaleźć w certyfikacie analizy.

Informacje prawne

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności

O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktu(-ów), nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanych zastosowań komercyjnych, zastosowań diagnostycznych in vitro, zastosowań terapeutycznych ex vivo lub in vivo lub jakiegokolwiek rodzaju konsumpcji lub zastosowania u ludzi lub zwierząt.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa zagrożenia wodnego (WGK): WGK 1
• Temperatura zapłonu (°F): does not flash
• Temperatura zapłonu (°C): does not flash