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DNA 및 RNA 정제

DNA 구조 – DNA 정제를 위해 다양한 기법이 사용됩니다

DNA 및 RNA 추출은 분자생물학에서 사용되는 기본적인 방법입니다. 고품질, 고순도 핵산의 필요성은 광범위한 분야의 연구 및 임상적 애플리케이션을 위해 중요합니다. 핵산 정제는 여러 분자생물학 및 유전체 작업흐름에서 시작 단계입니다. 

DNA 및 RNA 시료를 비정제 준비물에서 확보하는 경우가 종종 있습니다. 유전체 DNA, 플리스미드 DNA 및 총 RNA는 박테리아 및 포유류 세포, 식물 조직, 균류 조직, 포유류 조직, 혈액, 혈장, 혈청, 바이러스, 구강 및 비강 면봉, 겔 매트릭스, PCR 및 기타 효소 반응물을 포함하는 여러 출처에서 추출되어 정제될 수 있습니다. 이러한 샘플에서의 핵산 분리 작업은 세포막의 용해 또는 시료 균질화, 그 후 단백질, 효소, 계면활성제, 염류 및 지질의 제거를 포함합니다. 

일반적인 방법:

  • 알카리 추출
  • 페놀-클로로폼 추출
  • 염화세슘(CsCl) 밀도 기울기 원심분리
  • 올리고(dT)-셀루로오스 크로마토그래피
  • 실리카 매트릭스
  • 유리구술(Glass bead)
  • 규조토
  • 음이온 교환 크로마토그래피
  • 크기 배제 크로마토그래피


최종 애플리케이션에 따라서 최상의 정제법이 결정됩니다. 다운스트림 애플리케이션은 PCR, qPCR, 제한효소 처리, 접합, 클로닝, 유전자형분석, 유전자 발현 분석, 차세대 염기서열분석(NGS) 그리고 노던 및 서던 블로팅(blotting)을 포함합니다.


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