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FLAG®精製

FLAG®タグは、遺伝子組換え融合タンパク質の優れた検出や安定した精製を可能にし、結合や活性の測定から構造解析に至るまで多くの下流アプリケーションでの利用が実証されています。FLAG®エピトープタグは、短い親水性の8アミノ酸ペプチド（DYKDDDDKタグ）で、エンテロキナーゼ（EK）によってすぐに切断できます。親水性でサイズが小さい性質から、FLAG®タグは一般に融合タンパク質の表面上に存在し、融合タンパク質の機能、分泌、輸送への影響を最小限に抑えます。私たちは、ご使用の最終アプリケーションを問わず、FLAG®融合タンパク質の発現、精製および検出に必要なツールを取り揃えています。

FLAG®タグタンパク質発現

FLAG®タグタンパク質発現ポートフォリオには、細菌系および哺乳類系で遺伝子組換え融合タンパク質の優れた発現をもたらすベクターが含まれています。SnapFast™ベクター技術を用いると、ターゲットの遺伝子をあるベクターから別のベクターへ簡単に移動でき、より有効で費用効率の高いクローニングが得られます。

  • 標準のFLAG®ペプチド（配列：DYKDDDDK）は、立体障害のおそれや、タンパク質溶解性への悪影響のリスクを最小限に抑えて導入できる小型のタグです。
  • 3xFLAG®のタグ配列は、3つのタンデムFLAG®エピトープを融合して融合タンパク質の検出を強化します（最大で200倍）。

FLAG® タグタンパク質精製

私たちは、FLAG®タグ付タンパク質の単離・精製のための、さまざまなアガロースアフィニティー精製ゲル、磁気ビーズ、精製キットおよびコーティングプレートを取り揃えています。

  • アガロースアフィニティーゲルは、アガロースビーズに架橋した抗FLAG® 抗体による融合タグ付タンパク質精製を可能にし、小～大規模精製に適しています。これらのレジンは、自然落下カラムによる精製に向いています。
  • 抗FLAG® M2磁気ビーズは、磁気ラックまたはプラットフォームによって遺伝子組換え融合タグ付タンパク質を精製することで、ビーズの分離およびタンパク質の単離を迅速に処理するために使用されます。
  • 抗FLAG® 高感度M2コーティング96ウェルプレートは、発現スクリーニング、タンパク質間相互作用の研究およびELISAアッセイに適しています。

FLAG®タグ検出

FLAG® および3xFLAG® タグは、高度に特異的な抗FLAG® モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、複合体のための結合部位を有し、ELISA、ブロッティングアプリケーション、免疫蛍光、免疫細胞、免疫組織染色（IHC）、ブロッティングおよびフローサイトメトリーに有用です。

  • M2抗FLAG® 抗体 は、N-末端FLAG®、C-末端FLAG®、Met-FLAG® の融合タンパク質と結合します。
  • M1抗FLAG® 抗体 結合は、カルシウム依存性およびFLAG® タグのN-末端に対する特異性を示します。
  • M5抗FLAG® 抗体 は、N-末端FLAG® 、Met-FLAG® の融合タンパク質と結合します。
*IP=免疫沈降、IC=免疫染色、WB=ウェスタンブロット、EIA=酵素結合免疫吸着測定法（ELISA）

関連製品資料

カタログ：Refine Protein Preparation
ユーザーガイド：FLAG - Proven System for Detection and Purification of Proteins
アプリケーションノート：EZviewTM Red Protein A and ANTI-FLAG® M2 Affinity Gels - Immunoprecipitation with Enhanced Visibility Affinity Beads

関連製品分野
抗体タンパク質精製
ラボレベル、プロセスレベル、産業レベルのワークフローに適した抗体精製用レジンおよびプレパックカラムです。
遺伝子組換え／融合タグタンパク質の精製
バッチ精製法またはカラム精製法を用いて、非変性または変性件下でHisタグ、GSTタグ、FLAG®タグ、Sタグ™、StrepタグII、およびT7タグが付いたタンパク質を精製するためのアフィニティー精製用樹脂およびバッファー
タンパク質電気泳動用ゲル・バッファー
PAGE、SDS-PAGEタンパク質ゲル電気泳動用のプレキャストポリアクリルアミドタンパク質ゲル、ランニングバッファー、ポリアクリルアミドゲルを手動で注入するためのハンドキャスティング試薬です。
タンパク質電気泳動法用ゲル染色剤
ポリアクリルアミドゲル、アガロースゲル、PVDF、ニトロセルロースメンブレンに適した、高感度の比色・蛍光タンパク質ゲル染色剤、固定液および脱染試薬です。
ビオチン化タンパク質精製
ビオチン化タンパク質、抗体の小～大規模の精製に用いるストレプトアビジンレジン、アビジンレジンおよびプレパックカラムです。
細胞内分画・エンリッチメント・除去試薬
細胞内分画、タンパク質エンリッチメントにより、プロテオミクス研究におけるタンパク質の同定および研究が可能になります。細胞、組織、細菌、植物などから得たサンプルを処理するためのさまざまなキットを取り揃えており、細胞内分画、タンパク質抽出、除去およびエンリッチメントに利用できます。
細胞溶解試薬・エンハンサー
細菌、酵母、昆虫の培養物に加え、植物・哺乳類の培養細胞、組織サンプル由来のタンパク質を可溶化するためのタンパク質抽出キット、細胞溶解バッファーおよび試薬です。
ホスファターゼ・プロテアーゼ阻害剤カクテル
プロテアーゼ・ホスファターゼ阻害剤およびカクテルは、細胞溶解、タンパク質抽出、サンプル調製の際に、タンパク質の分解および脱リン酸化を防ぐとともにタンパク質の活動状態を維持します。
関連アプリケーション
タンパク質精製
イオン交換、サイズ排除、タンパク質アフィニティークロマトグラフィーなどの方法を用いた組換えタンパク質精製のためのタンパク質精製技術、試薬、プロトコル
タンパク質発現
基礎研究および治療法とワクチン生産のサポートのための大腸菌、昆虫、酵母、および哺乳類の発現システムで組換えタンパク質を発現させるためのタンパク質発現技術。
溶解・タンパク質抽出
界面活性剤可溶化、凍結融解溶解、浸透圧ショック、超音波処理、酵素細胞溶解、および、機械的破砕技術（ダウンス、ポリトロン、乳鉢と乳棒によるホモジナイズなど）を含む細胞溶解とタンパク質抽出法の概要。
タンパク質プルダウンアッセイ
アフィニティーまたはGSTプルダウン法、タンデムアフィニティー精製（TAP）法、共免疫沈降法を用いてin vitroのタンパク質間相互作用を検討するためのプルダウンアッセイ、試薬、プロトコル
タンパク質濃縮・バッファー交換
精製、バイオプロセシングおよび分析ワークフロー用のタンパク質試料の濃縮および精製に用いる技術の概要ろ過および限外ろ過技術、および透析、透析ろ過およびクロマトグラフィー法を用いたタンパク質のエンリッチメントおよび脱塩・緩衝液交換のプロトコルおよびビデオなど。
ゲル電気泳動
ゲル電気泳動は、タンパク質の精製、検出、同定のためにタンパク質を分離する方法です。ウエスタンブロット、質量分析およびプロテオミクス解析などの下流工程での用途に向けた調製において、ネイティブPAGE、SDS-PAGE、二次元PAGEおよび等電点電気泳動（IEF）などの方法を使用します。
ウェスタンブロッティング
タンパク質検出手法であるウェスタンブロッティングの原理と応用の概要。タンパク質抽出、ゲル電気泳動、PVDFまたはニトロセルロースメンブレンへの転写、および化学発光、比色、蛍光の各検出法に関する詳細なプロトコルと動画、その他のリソースへのリンクが含まれます。
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